| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-20页 |
| 1.1 白酒概述 | 第8页 |
| 1.2 白酒分类及其风味物质概述 | 第8-12页 |
| 1.2.1 白酒的分类 | 第8-10页 |
| 1.2.2 白酒的风味物质 | 第10-12页 |
| 1.3 白酒中的乙酸酯 | 第12-15页 |
| 1.3.1 乙酸酯的合成途径和机理 | 第12-13页 |
| 1.3.2 影响乙酸酯合成的因素 | 第13-15页 |
| 1.3.3 腺苷酸环化酶与乙酸酯合成的关系 | 第15页 |
| 1.4 调控酿酒酵母乙酸酯合成的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 启动子工程研究进展 | 第16-17页 |
| 1.6 本论文的立题依据及研究内容 | 第17-20页 |
| 1.6.1 立题依据 | 第17-18页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-38页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第20-25页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器 | 第20-22页 |
| 2.1.3 培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.4 主要溶液 | 第23-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 引物设计 | 第25-26页 |
| 2.2.2 整合表达载体的构建 | 第26-31页 |
| 2.2.3 基因无痕敲除方法和目的片段无缝插入方法 | 第31页 |
| 2.2.4 重组菌株的获得及验证 | 第31-32页 |
| 2.2.5 生长曲线的测定 | 第32页 |
| 2.2.6 实时荧光定量PCR | 第32-34页 |
| 2.2.7 玉米原料液态白酒发酵工艺 | 第34页 |
| 2.3 分析方法 | 第34-38页 |
| 2.3.1 酶活力的测定 | 第34页 |
| 2.3.2 酵母细胞耐热性的测定 | 第34-35页 |
| 2.3.3 酵母细胞时序寿命的测定 | 第35页 |
| 2.3.4 发酵速度的测定 | 第35页 |
| 2.3.5 酒精度测定 | 第35页 |
| 2.3.6 残余还原糖测定 | 第35-36页 |
| 2.3.7 总酸测定 | 第36-37页 |
| 2.3.8 总酯测定 | 第37页 |
| 2.3.9 高级醇和酯类含量的测定 | 第37-38页 |
| 3 结果与讨论 | 第38-56页 |
| 3.1 PGK1_P无缝插入调控乙酸酯的合成 | 第38-48页 |
| 3.1.1 目的片段无缝插入策略 | 第38页 |
| 3.1.2 整合插入质粒YIplac211-UPD的构建及验证 | 第38-41页 |
| 3.1.3 重组菌株AY15a-P的构建与验证 | 第41-45页 |
| 3.1.4 菌株AY15a-P生长性能的测定 | 第45-46页 |
| 3.1.5 测定菌株AY15a-P的ATF1基因转录水平和醇乙酰基转移酶活力 | 第46页 |
| 3.1.6 菌株AY15a-P玉米原料液态白酒发酵 | 第46-48页 |
| 3.1.7 小结 | 第48页 |
| 3.2 CYR1_P梯度敲除调控乙酸酯的合成 | 第48-56页 |
| 3.2.1 启动子梯度弱化策略 | 第48页 |
| 3.2.2 AY-ΔU-P-U60、AY-ΔAU-P-U90和AY-ΔU-P-U120的构建及验证 | 第48-49页 |
| 3.2.3 AY-ΔU-P-C60、AY-ΔU-P-C90和AY-ΔU-P-C120的构建及验证 | 第49-50页 |
| 3.2.4 AY-ΔU-P-C60、AY-ΔU-P-C90和AY-ΔU-P-C120突变ura3基因的回复 | 第50-51页 |
| 3.2.5 AY-P-C60、AY-P-C90和AY-P-C120中CYR1基因转录水平测定 | 第51-52页 |
| 3.2.6 菌株AY-P-C60、AY-P-C90和AY-P-C120耐热性的测定 | 第52-53页 |
| 3.2.7 菌株AY-P-C60、AY-P-C90和AY-P-C120时序寿命的测定 | 第53页 |
| 3.2.8 AY-P-C60、AY-P-C90和AY-P-C120玉米原料液态白酒发酵 | 第53-55页 |
| 3.2.9 小结 | 第55-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 5 展望 | 第57-58页 |
| 6 参考文献 | 第58-64页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第64-65页 |
| 8 致谢 | 第65页 |
