| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第8-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-23页 |
| 1.1 概述 | 第13-14页 |
| 1.2 酶促褐变 | 第14-21页 |
| 1.2.1 酶促褐变反应机理 | 第14页 |
| 1.2.2 多酚氧化酶(PPO) | 第14-17页 |
| 1.2.3 酚类物质 | 第17-18页 |
| 1.2.4 蛋白质质谱鉴定技术 | 第18-19页 |
| 1.2.5 同源建模 | 第19-20页 |
| 1.2.6 分子对接 | 第20-21页 |
| 1.3 本课题研究的目的、意义及主要内容 | 第21-23页 |
| 1.3.1 课题来源 | 第21页 |
| 1.3.2 研究价值与意义 | 第21页 |
| 1.3.3 主要研究内容 | 第21-23页 |
| 第2章 莲子PPO的分离与纯化 | 第23-38页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 材料与设备 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第23页 |
| 2.2.3 实验设备 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 莲子PPO酶活力测定 | 第24页 |
| 2.3.2 莲子PPO酶活力比测定 | 第24页 |
| 2.3.3 蛋白质含量测定 | 第24-25页 |
| 2.3.4 四种提取莲子PPO方法的对比 | 第25页 |
| 2.3.5 匀浆后丙酮提取法条件优化 | 第25-26页 |
| 2.3.6 莲子PPO的纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.7 数据分析 | 第27页 |
| 2.4 结果与分析 | 第27-36页 |
| 2.4.1 四种提取莲子PPO的方法对比 | 第27-29页 |
| 2.4.2 匀浆后丙酮提取法优化分析 | 第29-32页 |
| 2.4.3 莲子PPO的纯化 | 第32-36页 |
| 2.5 讨论 | 第36-37页 |
| 2.6 本章小结 | 第37-38页 |
| 第3章 莲子酚类物质的定性与定量 | 第38-47页 |
| 3.1 引言 | 第38页 |
| 3.2 材料与设备 | 第38-39页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第38-39页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 实验设备 | 第39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-40页 |
| 3.3.1 莲子酚类化合物的提取 | 第39页 |
| 3.3.2 莲子总酚含量的测定 | 第39页 |
| 3.3.3 莲子贮藏期间总酚含量的变化 | 第39-40页 |
| 3.3.4 HPLC和Q-TOFLC/MS分析测定酚类化合物 | 第40页 |
| 3.3.5 数据处理 | 第40页 |
| 3.4 结果 | 第40-45页 |
| 3.4.1 HPLC和Q-TOFLC/MS分析测定酚类化合物 | 第40-45页 |
| 3.4.2 HPLC测定莲子酚类化合物的含量 | 第45页 |
| 3.4.3 莲子贮藏期间总酚含量的变化 | 第45页 |
| 3.5 讨论 | 第45-46页 |
| 3.6 本章小结 | 第46-47页 |
| 第4章 莲子PPO的纯化鉴定及特异性底物筛选 | 第47-56页 |
| 4.1 前言 | 第47页 |
| 4.2 材料与设备 | 第47-48页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第47页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第47-48页 |
| 4.3 实验方法 | 第48-50页 |
| 4.3.1 莲子PPOSDS-PAGE胶内酶解 | 第48页 |
| 4.3.2 莲子PPO质谱鉴定 | 第48-49页 |
| 4.3.3 莲子PPO粗酶液制备 | 第49页 |
| 4.3.4 褐变反应最佳检测波长λmax的确定 | 第49页 |
| 4.3.5 不同乙醇浓度对莲子PPO的影响 | 第49页 |
| 4.3.6 莲子PPO与酚类底物反应 | 第49-50页 |
| 4.3.7 数据处理 | 第50页 |
| 4.4 结果与分析 | 第50-54页 |
| 4.4.1 莲子PPO质谱鉴定 | 第50-51页 |
| 4.4.2 酚类底物褐变反应最佳检测波长λmax的确定 | 第51-52页 |
| 4.4.3 不同乙醇浓度对莲子PPO的影响 | 第52-53页 |
| 4.4.4 莲子PPO与酚类底物反应 | 第53-54页 |
| 4.5 讨论 | 第54-55页 |
| 4.6 本章小结 | 第55-56页 |
| 第5章 莲子PPO的酶促褐变机理的探讨 | 第56-68页 |
| 5.1 概述 | 第56-57页 |
| 5.2 实验方法 | 第57-58页 |
| 5.2.1 莲子PPO的同源建模 | 第57页 |
| 5.2.2 莲子PPO三维结构评估 | 第57页 |
| 5.2.3 莲子PPO活性位点预测 | 第57页 |
| 5.2.4 分子对接 | 第57-58页 |
| 5.3 结果分析 | 第58-66页 |
| 5.3.1 莲子PPO的同源建模 | 第58-61页 |
| 5.3.2 莲子PPO三维模型的评估 | 第61-62页 |
| 5.3.3 莲子PPO的活性中心 | 第62-63页 |
| 5.3.4 莲子PPO与酚类底物分子对接模拟 | 第63-66页 |
| 5.4 讨论 | 第66-67页 |
| 5.5 本章小结 | 第67-68页 |
| 第6章 结论与展望 | 第68-71页 |
| 6.1 结论 | 第68-69页 |
| 6.1.1 莲子PPO的分离与纯化 | 第68页 |
| 6.1.2 莲子酚类物质的定性与定量 | 第68页 |
| 6.1.3 莲子PPO的分析鉴定及酚类底物筛选 | 第68-69页 |
| 6.2 展望 | 第69-71页 |
| 6.2.1 莲子PPO与酚类底物结合反应前后的变化研究 | 第69-70页 |
| 6.2.2 莲子酚类物质的代谢与转化 | 第70页 |
| 6.2.3 抑制莲子酶促褐变的方法 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第78页 |
