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安石榴苷对金黄色葡萄球菌的抑菌作用及机制研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 文献综述第14-30页
    1.1 安石榴苷概述第14-16页
        1.1.1 安石榴苷的来源第14页
        1.1.2 安石榴苷的结构特性第14页
        1.1.3 安石榴苷的生物活性第14-16页
        1.1.4 安石榴苷的体内代谢情况第16页
        1.1.5 安石榴苷的安全性评价第16页
    1.2 金黄色葡萄球菌概述第16-19页
        1.2.1 金黄色葡萄球菌的生物学性状第16-17页
        1.2.2 金黄色葡萄球菌污染食品概况第17页
        1.2.3 金黄色葡萄球菌的毒力因子第17-19页
        1.2.4 金黄色葡萄球菌的耐药性第19页
    1.3 细菌生物膜第19-23页
        1.3.1 生物膜的概念第19-20页
        1.3.2 生物膜的组成第20页
        1.3.3 生物膜的形成过程第20-21页
        1.3.4 生物膜的危害性第21-22页
        1.3.5 研究生物膜的技术方法第22-23页
        1.3.6 金黄色葡萄球菌生物膜第23页
    1.4 蛋白质组定量技术第23-27页
        1.4.1 蛋白质组学概念第23-24页
        1.4.2 基于凝胶成像的蛋白质组学技术第24页
        1.4.3 基于质谱的定量蛋白质组学技术第24-27页
    1.5 研究的目的及主要内容第27-30页
        1.5.1 研究目的及意义第27-28页
        1.5.2 研究的主要内容第28-29页
        1.5.3 技术路线第29-30页
第二章 石榴皮中安石榴苷的纯化及对金黄色葡萄球菌抑菌效果初探第30-38页
    2.1 材料与仪器第30-31页
        2.1.1 试剂材料第30-31页
        2.1.2 仪器设备第31页
    2.2 实验方法第31-32页
        2.2.1 石榴皮单宁的提取第31页
        2.2.2 安石榴苷的纯化第31-32页
        2.2.3 高效液相色谱分析第32页
        2.2.4 抑菌效果研究第32页
    2.3 结果与分析第32-37页
        2.3.1 高效液相色谱检测安石榴苷的含量第32-36页
        2.3.2 安石榴苷纯化物的抑菌效果第36-37页
    2.4 讨论第37页
    2.5 小结第37-38页
第三章 安石榴苷对金黄色葡萄球菌细胞膜完整性及细胞形态的影响第38-48页
    3.1 材料与仪器第38-40页
        3.1.1 试剂材料第38-39页
        3.1.2 主要溶液的配制第39页
        3.1.3 仪器设备第39-40页
    3.2 实验方法第40-43页
        3.2.1 食源性金黄色葡萄球菌的分离鉴定第40-41页
        3.2.2 最小抑菌浓度的测定第41页
        3.2.3 生长曲线的测定第41页
        3.2.4 膜电位的测定第41-42页
        3.2.5 钾离子流出的测定第42页
        3.2.6 扫描电子显微镜观察第42页
        3.2.7 透射电子显微镜观察第42-43页
    3.3 结果与分析第43-46页
        3.3.1 最小抑菌浓度第43页
        3.3.2 安石榴苷对细菌生长的影响第43页
        3.3.3 安石榴苷对膜电位的影响第43-44页
        3.3.4 安石榴苷对钾离子流出的影响第44-45页
        3.3.5 扫描电子显微镜图谱第45页
        3.3.6 透射电子显微镜图谱第45-46页
    3.4 讨论第46-47页
    3.5 小结第47-48页
第四章 安石榴苷对金黄色葡萄球菌毒力因子表达的影响第48-60页
    4.1 材料与仪器第48-49页
        4.1.1 试剂材料第48页
        4.1.2 主要试剂的配制第48-49页
        4.1.3 仪器设备第49页
    4.2 实验方法第49-53页
        4.2.1 菌种活化及菌悬液制备第49页
        4.2.2 菌落计数第49-50页
        4.2.3 溶血活性的测定第50页
        4.2.4 凝固酶效价的测定第50页
        4.2.5 总肠毒素的检测第50页
        4.2.6 qRT-PCR第50-53页
    4.3 结果与分析第53-58页
        4.3.1 安石榴苷对细菌生长的影响第53页
        4.3.2 安石榴苷对金黄色葡萄球菌溶血活性的影响第53-54页
        4.3.3 安石榴苷对金黄色葡萄球菌凝固酶表达的影响第54页
        4.3.4 安石榴苷对金黄色葡萄球菌总肠毒素表达的影响第54-55页
        4.3.5 安石榴苷对金黄色葡萄球菌毒力基因表达的影响第55-58页
    4.4 讨论第58-59页
    4.5 小结第59-60页
第五章 亚致死浓度下安石榴苷对金黄色葡萄球菌生物膜形成的影响第60-74页
    5.1 材料与仪器第60-61页
        5.1.1 试剂材料第60页
        5.1.2 主要试剂的配制第60-61页
        5.1.3 仪器设备第61页
    5.2 实验方法第61-65页
        5.2.1 菌种活化及菌悬液制备第61-62页
        5.2.2 亚抑菌浓度下生长曲线的测定第62页
        5.2.3 结晶紫染色法检测安石榴苷对生物膜形成的影响第62页
        5.2.4 MTT染色法检测安石榴苷对生物膜代谢的影响第62页
        5.2.5 生物膜中活菌的计数第62页
        5.2.6 扫描电镜观察生物膜的形态第62-63页
        5.2.7 激光共聚焦显微镜观察生物膜的形态第63页
        5.2.8 qRT-PCR第63-65页
    5.3 结果与分析第65-72页
        5.3.1 亚抑菌浓度的安石榴苷对细菌生长的影响第65页
        5.3.2 结晶紫染色法反映的抗生物膜效果第65-66页
        5.3.3 MTT染色法显示的抗生物膜效果第66-67页
        5.3.4 生物膜中活菌的数量第67页
        5.3.5 扫描电镜观察安石榴苷对金黄色葡萄球菌生物膜的影响第67-70页
        5.3.6 激光共聚焦显微镜观察安石榴苷对金黄色葡萄球菌生物膜的影响第70页
        5.3.7 安石榴苷对金黄色葡萄球菌生物膜相关基因转录水平的影响第70-72页
    5.4 讨论第72页
    5.5 小结第72-74页
第六章 亚致死浓度下安石榴苷对金黄色葡萄球菌蛋白组表达的影响第74-96页
    6.1 仪器与材料第74-75页
        6.1.1 试剂材料第74-75页
        6.1.2 主要试剂的配制第75页
        6.1.3 仪器设备第75页
    6.2 实验方法第75-79页
        6.2.1 蛋白质的提取与定量第75-76页
        6.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳第76页
        6.2.3 蛋白质的消化第76页
        6.2.4 多肽的脱盐纯化与定量第76-77页
        6.2.5 多肽的标记第77页
        6.2.6 液相色谱-质谱联用分析第77-78页
        6.2.7 蛋白质鉴定及数据库查询第78页
        6.2.8 生物信息学分析第78-79页
    6.3 结果与分析第79-93页
        6.3.1 安石榴苷对金黄色葡萄球菌生长的抑制作用第79页
        6.3.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱分析第79-80页
        6.3.3 蛋白定量与聚类分析第80-81页
        6.3.4 差异表达蛋白的细胞定位第81页
        6.3.5 表达量显著降低的蛋白第81-84页
        6.3.6 表达量显著增加的蛋白第84-85页
        6.3.7 安石榴苷对金黄色葡萄球菌代谢通路的影响第85-92页
        6.3.8 蛋白相互作用分析第92-93页
    6.4 讨论第93-95页
    6.5 小结第95-96页
第七章 结论、创新点与展望第96-98页
    7.1 结论第96-97页
    7.2 创新点第97页
    7.3 展望第97-98页
参考文献第98-109页
缩略词第109-111页
致谢第111-113页
作者简介第113页

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