| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-14页 |
| 1 文献综述 | 第14-24页 |
| 1.1 芽孢杆菌类抗菌物质 | 第14-18页 |
| 1.1.1 核糖体肽 | 第14-16页 |
| 1.1.2 未修饰细菌素 | 第16页 |
| 1.1.3 抗菌蛋白 | 第16-17页 |
| 1.1.4 非核糖体合成肽和聚酮化合物 | 第17-18页 |
| 1.2 短短芽孢杆菌简介 | 第18页 |
| 1.3 短短芽孢杆菌研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 国外研究进展概述 | 第18-19页 |
| 1.3.2 国内研究进展概述 | 第19-20页 |
| 1.4 抗菌物质的提取方法 | 第20-21页 |
| 1.4.1 有机溶剂萃取法 | 第20页 |
| 1.4.2 硫酸铵分段沉淀法 | 第20页 |
| 1.4.3 吸附剂吸附法提取 | 第20页 |
| 1.4.4 低温乙醇沉淀法 | 第20-21页 |
| 1.5 抗菌蛋白的分离纯化 | 第21页 |
| 1.6 抗菌蛋白的生物质谱鉴定 | 第21-22页 |
| 1.7 猕猴桃细菌性溃疡病研究概况 | 第22页 |
| 1.8 课题提出的研究目的意义及内容 | 第22-24页 |
| 1.8.1 本课题研究的目的及意义 | 第22页 |
| 1.8.2 本课题研究内容 | 第22-23页 |
| 1.8.3 研究技术路线 | 第23-24页 |
| 2 短短芽孢杆菌YNP-1的分离与鉴定 | 第24-36页 |
| 2.1 材料 | 第24-26页 |
| 2.1.1 分离土样 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第24页 |
| 2.1.4 培养基配制 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-28页 |
| 2.2.1 土样预处理 | 第26页 |
| 2.2.2 菌株YNP-1的分离纯化 | 第26页 |
| 2.2.3 菌株YNP-1的形态观察 | 第26页 |
| 2.2.4 菌株YNP-116SrDNA测序 | 第26-27页 |
| 2.2.5 菌株YNP-1生理生化试验 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-35页 |
| 2.3.1 拮抗菌株筛选 | 第28页 |
| 2.3.2 菌株YNP-1形态特征 | 第28-29页 |
| 2.3.3 菌株YNP-1的16SrDNA测序分析 | 第29-30页 |
| 2.3.4 菌株YNP-1生理生化试验结果 | 第30-35页 |
| 2.4 小结 | 第35-36页 |
| 3 菌株YNP-1发酵培养基及发酵工艺优化 | 第36-59页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 菌株 | 第36页 |
| 3.1.2 试剂 | 第36页 |
| 3.1.3 培养基配制 | 第36-37页 |
| 3.1.4 实验仪器设备 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 菌株YNP-1发酵生长曲线的测定 | 第37页 |
| 3.2.2 菌株YNP-1胞外抗菌物质的验证及活性测定 | 第37-38页 |
| 3.2.3 菌株YNP-1发酵培养基的优化 | 第38-39页 |
| 3.2.4 菌株YNP-1发酵产抗菌物质关键工艺参数优化 | 第39-40页 |
| 3.2.5 Plackett-Burman试验设计 | 第40-41页 |
| 3.2.6 最陡爬坡试验 | 第41页 |
| 3.2.7 Box-BehnkenDesign实验设计 | 第41-42页 |
| 3.3 结果与分析 | 第42-58页 |
| 3.3.1 菌株YNP-1的生长曲线 | 第42页 |
| 3.3.2 菌株YNP-1代谢抗菌物质活性的测定 | 第42-43页 |
| 3.3.3 发酵培养基对抗菌物质抑菌活性的影响 | 第43-47页 |
| 3.3.4 发酵工艺参数对抗菌物质抑菌活性的影响 | 第47-50页 |
| 3.3.5 Plackett-Burman(PB)设计试验结果 | 第50-52页 |
| 3.3.6 最陡爬坡实验结果 | 第52-53页 |
| 3.3.7 Box-BehnkenDesign实验结果 | 第53-57页 |
| 3.3.8 预测结果验证 | 第57-58页 |
| 3.4 小结 | 第58-59页 |
| 4 抗菌粗提物部分性质探究 | 第59-69页 |
| 4.1 材料 | 第59-60页 |
| 4.1.1 菌株 | 第59页 |
| 4.1.2 试剂 | 第59-60页 |
| 4.1.3 培养基配制 | 第60页 |
| 4.1.4 实验仪器设备 | 第60页 |
| 4.2 实验方法 | 第60-61页 |
| 4.2.1 菌株YNP-1的抗菌活性物质预提取 | 第60页 |
| 4.2.2 低温乙醇沉淀法提取抗菌活性物质 | 第60-61页 |
| 4.3 抗菌粗提物部分理化性质探究 | 第61-62页 |
| 4.3.1 蛋白酶对抗菌粗提物抑菌活性影响 | 第61页 |
| 4.3.2 pH对抗菌粗提物抑菌活性影响 | 第61页 |
| 4.3.3 温度对抗菌粗提物抑菌活性影响 | 第61页 |
| 4.3.4 抗菌粗提物储藏稳定性测定 | 第61页 |
| 4.3.5 紫外照射对抗菌粗提物抑菌活性的影响 | 第61页 |
| 4.3.6 抗菌粗提物最大吸收波长的测定 | 第61-62页 |
| 4.3.7 抑菌谱测定 | 第62页 |
| 4.4 结果与分析 | 第62-64页 |
| 4.4.1 有机溶剂提取效果 | 第62-63页 |
| 4.4.2 低温乙醇法提取抗菌活性物质 | 第63-64页 |
| 4.5 抗菌粗提物部分性质探究结果 | 第64-68页 |
| 4.5.1 蛋白酶对抗菌粗提物抑菌活性影响 | 第64页 |
| 4.5.2 pH对抗菌粗提物抑菌活性影响 | 第64-65页 |
| 4.5.3 水浴温度对抗菌粗提物抑菌活性影响 | 第65页 |
| 4.5.4 抗菌粗提物储藏稳定性测定结果 | 第65-66页 |
| 4.5.5 紫外线照射对抗菌粗提物抑菌活性影响 | 第66页 |
| 4.5.6 抑菌谱测试结果 | 第66-67页 |
| 4.5.7 抗菌粗提物精分离后最大吸收波长的测定结果 | 第67-68页 |
| 4.6 小结 | 第68-69页 |
| 5 抗菌物质的分离纯化及其结构初步鉴定 | 第69-82页 |
| 5.1 材料 | 第69-70页 |
| 5.1.1 抗菌粗提物溶解液 | 第69页 |
| 5.1.2 试剂 | 第69页 |
| 5.1.3 实验仪器设备 | 第69-70页 |
| 5.2 实验方法 | 第70-74页 |
| 5.2.1 透析 | 第70页 |
| 5.2.2 凝胶过滤层析 | 第70页 |
| 5.2.3 阴离子交换层析 | 第70-71页 |
| 5.2.4 高效液相色谱纯化 | 第71页 |
| 5.2.5 抗菌物质的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第71-72页 |
| 5.2.6 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳条带的回收与抑菌活性验证 | 第72页 |
| 5.2.7 纯化抗菌蛋白的液质鉴定分析(LC-MS) | 第72-74页 |
| 5.3 结果与分析 | 第74-81页 |
| 5.3.1 透析结果 | 第74-75页 |
| 5.3.2 葡聚糖凝胶G-150分析结果 | 第75页 |
| 5.3.3 纤维素DEAE-52分析结果 | 第75-76页 |
| 5.3.4 抗菌物质的RP-HPLC分析结果 | 第76-77页 |
| 5.3.5 抗菌物质的的非变性凝胶电泳及抑菌试验结果 | 第77-79页 |
| 5.3.6 抗菌纯化蛋白的质谱分析结果 | 第79-81页 |
| 5.4 小结 | 第81-82页 |
| 6 结论与展望 | 第82-84页 |
| 6.1 结论 | 第82-83页 |
| 6.2 创新点 | 第83页 |
| 6.3 展望 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 附录A：短短芽孢杆菌YNP-116SrDNA碱基序列 | 第96-97页 |
| 附录B：PeptidaseM4氨基酸序列 | 第97-98页 |
| 附录C：GNATfamilyN-acetyltransferase氨基酸序列 | 第98-99页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第99-100页 |
