牛肌红蛋白基因合成、原核表达及抗体的制备
| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-16页 |
| 1.1 肉制品的掺假情况 | 第10页 |
| 1.2 肉制品掺假检测的意义 | 第10-11页 |
| 1.3 肉品掺假检测的技术 | 第11-14页 |
| 1.3.1 形态学检测方法 | 第11页 |
| 1.3.2 电泳检测技术 | 第11-12页 |
| 1.3.3 色谱分析技术 | 第12页 |
| 1.3.4 聚合酶链反应（PCR）方法 | 第12页 |
| 1.3.5 免疫学技术 | 第12-14页 |
| 1.4 免疫分析技术在熟食制品中的应用 | 第14页 |
| 1.5 本课题立题意义及主要内容 | 第14-16页 |
| 第2章 牛肌红蛋白的原核表达与纯化 | 第16-32页 |
| 2.1 引言 | 第16页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第16-18页 |
| 2.2.1 实验菌株与质粒 | 第16-17页 |
| 2.2.2 实验试剂与药品 | 第17页 |
| 2.2.3 主要溶液的配制 | 第17-18页 |
| 2.2.4 实验仪器与设备 | 第18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-26页 |
| 2.3.1 牛肌红蛋白全基因的合成 | 第18-21页 |
| 2.3.2 转换酶切 | 第21-23页 |
| 2.3.3 目的蛋白的诱导表达 | 第23-24页 |
| 2.3.4 融合蛋白的大量诱导表达 | 第24-25页 |
| 2.3.5 蛋白的纯化 | 第25页 |
| 2.3.6 蛋白浓度的测定 | 第25-26页 |
| 2.4 实验结果 | 第26-30页 |
| 2.4.1 牛肌红蛋白全基因的鉴定结果分析 | 第26页 |
| 2.4.2 目的片段和载体的连接产物的鉴定结果 | 第26-27页 |
| 2.4.3 牛肌红蛋白的亚克隆方案 | 第27-28页 |
| 2.4.4 融合蛋白诱导条件优化结果 | 第28-29页 |
| 2.4.5 融合蛋白的纯化 | 第29页 |
| 2.4.6 融合蛋白浓度的确定 | 第29-30页 |
| 2.5 本章结论 | 第30-31页 |
| 2.6 本章小结 | 第31-32页 |
| 第3章 抗牛肌红蛋白多克隆抗体的制备 | 第32-42页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 实验动物、材料及设备 | 第32-34页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.2.2 实验材料 | 第33页 |
| 3.2.3 实验试剂的配置 | 第33-34页 |
| 3.2.4 实验设备 | 第34页 |
| 3.3 试验方法 | 第34-38页 |
| 3.3.1 实验动物的免疫程序 | 第34页 |
| 3.3.2 血液的采集与抗血清的制备 | 第34-35页 |
| 3.3.3 抗血清效价的测定 | 第35-36页 |
| 3.3.4 抗血清亲和性的测定 | 第36-37页 |
| 3.3.5 抗体的纯化 | 第37页 |
| 3.3.6 抗体浓度的测定 | 第37页 |
| 3.3.7 抗体的鉴定 | 第37-38页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第38-41页 |
| 3.4.1 小鼠血清效价的检测结果 | 第38-39页 |
| 3.4.2 小鼠抗血清敏感性的测定结果 | 第39-40页 |
| 3.4.3 抗体的浓度测定结果 | 第40页 |
| 3.4.4 抗体的鉴定结果 | 第40-41页 |
| 3.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第4章 单克隆抗体制备 | 第42-54页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 实验材料及设备 | 第42-43页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 4.2.2 实验试剂及配置 | 第43页 |
| 4.2.3 实验设备 | 第43页 |
| 4.3 试验方法 | 第43-46页 |
| 4.3.1 动物免疫及效价的测定 | 第43-44页 |
| 4.3.2 杂交瘤细胞株的建立 | 第44-45页 |
| 4.3.3 杂交瘤细胞的扩大培养及使用 | 第45-46页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第46-52页 |
| 4.4.1 抗原的选择分析结果 | 第46-48页 |
| 4.4.2 多肽偶联结果结果 | 第48页 |
| 4.4.3 抗原最优包被浓度的确定 | 第48-50页 |
| 4.4.4 小鼠抗血清效价的测定结果 | 第50页 |
| 4.4.5 亚克隆的筛选结果 | 第50-51页 |
| 4.4.6 腹水效价的检测结果 | 第51页 |
| 4.4.7 单抗的亲和性检测结果 | 第51-52页 |
| 4.4.8 抗体的纯化鉴定结果 | 第52页 |
| 4.5 本章讨论 | 第52-53页 |
| 4.6 本章小结 | 第53-54页 |
| 第5章 结论与展望 | 第54-56页 |
| 5.1 结论 | 第54页 |
| 5.2 创新点 | 第54-55页 |
| 5.3 展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第64-65页 |
| 附件 | 第65页 |
