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一氧化氮对桃果实ETR1蛋白原核表达及李果实线粒体膜氧化损伤的影响

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
1 引言第12-31页
   ·一氧化氮第12-16页
     ·NO 在植物体内的产生第12-15页
       ·依赖于一氧化氮合成酶(NOS)的生成途径第13-14页
       ·依赖于硝酸还原酶(NR)的生成途径第14页
       ·非酶促的NO 生成途径第14-15页
     ·NO 在植物体内的调节作用第15-16页
       ·NO 介导脱落素诱导的气孔关闭第15页
       ·NO 与抗氧化酶的关系第15页
       ·NO 和乙烯的相互作用第15-16页
   ·乙烯第16-25页
     ·乙烯的生物合成第17页
     ·乙烯的生理效应第17-18页
     ·乙烯信号转导第18-23页
       ·乙烯反应突变体第18-20页
       ·乙烯信号转导模型第20页
       ·乙烯转导途径中各个因子的上下关系第20-23页
     ·乙烯受体的研究现状第23-25页
       ·乙烯受体家族第23-24页
       ·乙烯受体蛋白第24-25页
   ·线粒体第25-28页
     ·线粒体结构特点与功能第26页
     ·线粒体通透性转变孔第26-28页
   ·细胞色素c-凋亡起始因子第28-29页
   ·论文研究内容及意义第29-31页
2 材料与方法第31-43页
   ·试材与试材处理第31-32页
   ·仪器与试剂第32-35页
   ·试验方法第35-43页
     ·乙烯受体蛋白的原核表达及NO 对乙烯受体基因的影响第35-40页
       ·特异性引物设计第35页
       ·RNA 提取第35页
       ·总浓度测定第35页
       ·cDNA 第一链的合成第35-36页
       ·梯度PCR第36页
       ·回收目的DNA 片段第36-37页
       ·克隆载体的构建及鉴定第37-39页
       ·原核表达载体构建及鉴定第39页
       ·目的基因的诱导表达条件的优化及可溶性分析第39页
       ·含重组质粒的大肠杆菌的繁殖培养第39页
       ·大肠杆菌的破碎和目的蛋白的获得第39-40页
       ·ETR1 蛋白的组氨酸激酶活性第40页
       ·NO 乙烯受体基因的扩增的影响第40页
     ·一氧化氮对采后李果实线粒体膜氧化损伤的影响第40-43页
       ·果实呼吸速率第40页
       ·超氧自由基和氢过氧化物含量的测定第40页
       ·抗氧化酶活性测定第40-41页
       ·线粒体的提取和活性测定第41页
       ·线粒体膜通透性转换孔(MPTP)的测定第41页
       ·细胞色素Cyt c/a 测定第41页
       ·线粒体膜流动性检测第41-42页
       ·线粒体膜电位的测定第42-43页
3 结果与分析第43-56页
   ·乙烯受体的纯化与NO 对乙烯受体基因转录的影响第43-50页
     ·桃果实RNA 的完整性第43页
     ·RT-PCR第43-44页
     ·ETR1 基因的扩增第44-45页
     ·ETR1 基因的扩增及原核表达载体的构建第45-46页
     ·融合蛋白诱导表达条件优化体系的建立及蛋白可溶性分析第46-48页
     ·ETR1 蛋白的组氨酸激酶活性第48-49页
     ·NO 饱和溶液处理对基因表达的影响第49-50页
   ·一氧化氮(NO)对采后李果实线粒体膜氧化的影响第50-56页
     ·NO 对果实呼吸速率、超氧阴离子和氢过氧化物含量的影响第50-52页
     ·NO 对SOD、CAT 和POD 活性的影响第52-54页
     ·线粒体膜变化第54-56页
4 讨论第56-59页
   ·乙烯受体蛋白的原核表达及NO 对乙烯受体基因表达的影响第56-57页
   ·一氧化氮(NO)对采后李果实线粒体膜氧化的影响第57-59页
5 结论第59-60页
6 创新之处第60-61页
参考文献第61-71页
致谢第71-72页
攻读学位期间发表的学术论文目录第72页

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