| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 酿酒酵母及其胞外蛋白 | 第10-12页 |
| 1.1.1 酿酒酵母的研究价值 | 第10页 |
| 1.1.2 酿酒酵母胞外蛋白 | 第10-12页 |
| 1.1.3 蛋白糖基化 | 第12页 |
| 1.2 酵母蛋白组学 | 第12-13页 |
| 1.2.1 蛋白质组学的诞生以及现状 | 第12-13页 |
| 1.2.2 酿酒酵母蛋白组学研究意义与方法 | 第13页 |
| 1.3 双向电泳 | 第13-16页 |
| 1.3.1 双向电泳技术的起源 | 第13-14页 |
| 1.3.2 双向电泳步骤 | 第14页 |
| 1.3.3 双向电泳难以解决的问题 | 第14-16页 |
| 1.4 关于衰老 | 第16-17页 |
| 1.4.1 衰老的特性 | 第16页 |
| 1.4.2 衰老的原因 | 第16页 |
| 1.4.3 衰老与自由基 | 第16-17页 |
| 1.4.4 抗氧化酶 | 第17页 |
| 1.5 本课题研究工作 | 第17-19页 |
| 1.5.1 本课题研究内容 | 第17页 |
| 1.5.2 本课题研究意义 | 第17-19页 |
| 第二章 酵母胞外蛋白提取 | 第19-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 实验菌种 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 酵母培养基的选择 | 第20页 |
| 2.2.2 菌体生长曲线的绘制 | 第20-21页 |
| 2.2.3 胞外蛋白提取时间的确定 | 第21-22页 |
| 2.2.4 硫铵沉淀法提取胞外蛋白 | 第22页 |
| 2.2.5 冻干—平衡酚法提取胞外蛋白 | 第22页 |
| 2.2.6 超滤法提取胞外蛋白 | 第22页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 胞外蛋白的双向电泳与质谱分析 | 第24-33页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-26页 |
| 3.1.1 实验菌种 | 第24页 |
| 3.1.2 主要用到的试剂 | 第24-25页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第25-26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 3.2.1 蛋白溶解与定量 | 第26-27页 |
| 3.2.2 一维等电聚焦 | 第27-28页 |
| 3.2.3 胶条平衡 | 第28页 |
| 3.2.4 SDS-PAGE | 第28页 |
| 3.2.5 染色 | 第28页 |
| 3.2.6 图谱分析 | 第28页 |
| 3.2.7 质谱鉴定 | 第28-29页 |
| 3.2.8 信号肽预测 | 第29页 |
| 3.3 实验结果 | 第29-31页 |
| 3.3.1 菌体生长与培养基蛋白含量的关系 | 第29页 |
| 3.3.2 三种方法提取率 | 第29-30页 |
| 3.3.3 不同方法提取蛋白的双向电泳图谱 | 第30-31页 |
| 3.3.4 质谱分析结果 | 第31页 |
| 3.4 讨论 | 第31-33页 |
| 第四章 连续衰老过程中酵母胞外蛋白的变化 | 第33-43页 |
| 4.1 实验材料 | 第33-35页 |
| 4.1.1 实验菌种 | 第33页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第33-34页 |
| 4.1.3 实验设备 | 第34-35页 |
| 4.2 实验方法 | 第35-37页 |
| 4.2.1 菌落计数法测定菌体浓度 | 第35页 |
| 4.2.2 菌种持续老化培养 | 第35页 |
| 4.2.3 胞内粗酶干粉的提取 | 第35页 |
| 4.2.4 胞外蛋白提取 | 第35-36页 |
| 4.2.5 胞内酶活性测定 | 第36-37页 |
| 4.2.6 胞外蛋白双向电泳 | 第37页 |
| 4.2.7 质谱分析 | 第37页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第37-42页 |
| 4.3.1 连续培养过程中活细胞数与胞外蛋白测定结果 | 第37-38页 |
| 4.3.2 连续培养过程中胞内酶活性测定结果 | 第38-40页 |
| 4.3.3 双向电泳图谱比较 | 第40-41页 |
| 4.3.4 质谱分析结果 | 第41-42页 |
| 4.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第五章 结论与展望 | 第43-45页 |
| 5.1 结论 | 第43页 |
| 5.2 展望 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 附录 | 第49-51页 |