摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第1章 绪论 | 第14-27页 |
1.1 鱼卵的研究进展 | 第14-17页 |
1.1.1 鱼卵的概况 | 第14页 |
1.1.2 鱼卵的加工现状 | 第14页 |
1.1.3 鲟鱼卵及副产品 | 第14-15页 |
1.1.4 鱼卵过敏原的研究状况 | 第15-17页 |
1.2 鱼卵中卵黄蛋白原的研究现状 | 第17-20页 |
1.2.1 卵黄蛋白原简介 | 第17-18页 |
1.2.2 鱼类卵黄蛋白原的结构特性 | 第18-19页 |
1.2.3 鱼类卵黄蛋白原的免疫功能 | 第19-20页 |
1.3 糖蛋白的研究现状 | 第20-25页 |
1.3.1 糖蛋白简介 | 第20-22页 |
1.3.2 蛋白质糖基化 | 第22-24页 |
1.3.3 糖蛋白的质谱研究 | 第24-25页 |
1.3.4 糖蛋白研究所面临的挑战 | 第25页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
1.5 本论文的主要研究内容 | 第26-27页 |
第2章 鲟鱼卵β'-c糖蛋白的提取及分离纯化 | 第27-43页 |
2.1 引言 | 第27页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第27-29页 |
2.2.1 材料与处理 | 第27页 |
2.2.2 主要仪器和试剂 | 第27-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-34页 |
2.3.1 卵黄糖蛋白粗提物的制备 | 第29页 |
2.3.2 卵黄糖蛋白粗提物的初步分离 | 第29-30页 |
2.3.3 BCA试剂盒测定卵黄糖蛋白蛋白含量 | 第30页 |
2.3.4 苯酚硫酸法测定卵黄糖蛋白多糖含量 | 第30-31页 |
2.3.5 SDS-PAGE电泳分析 | 第31-32页 |
2.3.6 热处理分离纯化卵黄糖蛋白 | 第32页 |
2.3.7 碱处理分离纯化卵黄糖蛋白 | 第32-33页 |
2.3.8 超速离心法进一步纯化卵黄糖蛋白 | 第33页 |
2.3.9 PAS染色法鉴定糖蛋白 | 第33-34页 |
2.4 结果与分析 | 第34-42页 |
2.4.1 卵黄糖蛋白蛋白含量分析 | 第34-35页 |
2.4.2 卵黄糖蛋白多糖含量分析 | 第35-36页 |
2.4.3 卵黄糖蛋白初步分离结果比较 | 第36-37页 |
2.4.4 热处理与碱处理分离纯化卵黄糖蛋白 | 第37-38页 |
2.4.5 PAS染色法鉴定糖蛋白 | 第38-41页 |
2.4.6 超速离心法进一步纯化卵黄糖蛋白 | 第41-42页 |
2.5 本章小结 | 第42-43页 |
第3章 鲟鱼卵β'-c糖蛋白蛋白部分的结构表征 | 第43-58页 |
3.1 引言 | 第43页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第43-44页 |
3.2.1 材料与处理 | 第43页 |
3.2.2 主要实验仪器和试剂 | 第43-44页 |
3.3 实验方法 | 第44-47页 |
3.3.1 卵黄糖蛋白组分亚基分析 | 第44-45页 |
3.3.2 蛋白质胶条内酶切 | 第45-46页 |
3.3.3 液相质谱联用(LC-MS/MS)分析 | 第46页 |
3.3.4 蛋白数据库检索分析 | 第46页 |
3.3.5 鲟鱼卵卵黄糖蛋白生物信息学分析 | 第46页 |
3.3.6 氨基酸序列同源性分析 | 第46页 |
3.3.7 圆二色(CD)光谱分析糖蛋白二级结构 | 第46-47页 |
3.4 结果与分析 | 第47-56页 |
3.4.1 卵黄糖蛋白组分亚基分析 | 第47-48页 |
3.4.2 鲟鱼卵卵黄糖蛋白鉴定结果分析 | 第48-51页 |
3.4.3 鲟鱼卵卵黄糖蛋白生物信息学分析 | 第51-52页 |
3.4.4 鲟鱼卵β'-c蛋白同源性分析 | 第52-55页 |
3.4.5 圆二色(CD)光谱分析β,-c糖蛋白的二级结构 | 第55-56页 |
3.5 本章小结 | 第56-58页 |
第4章 鲟鱼卵β'-c糖蛋白糖肽及糖链的结构表征 | 第58-75页 |
4.1 引言 | 第58页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第58-60页 |
4.2.1 材料与处理 | 第58页 |
4.2.2 主要实验仪器和试剂 | 第58-60页 |
4.3 实验方法 | 第60-64页 |
4.3.1 N-型糖苷键的鉴定 | 第60-61页 |
4.3.2 O-型糖苷键的鉴定 | 第61页 |
4.3.3 糖蛋白中糖肽的制备及富集纯化 | 第61页 |
4.3.4 糖肽中N-糖链的释放及分离纯化 | 第61-62页 |
4.3.5 糖肽中N-糖链的完全甲基化及分离纯化 | 第62-63页 |
4.3.6 ESI(+)多级质谱分析N-糖链结构 | 第63页 |
4.3.7 HILIC-MS~n液质联用分析糖肽结构 | 第63-64页 |
4.3.8 糖链及糖肽的数据分析 | 第64页 |
4.4 结果与分析 | 第64-74页 |
4.4.1 N-型糖苷键的鉴定结果分析 | 第64-65页 |
4.4.2 O-型糖苷键的鉴定结果分析 | 第65-67页 |
4.4.3 鲟鱼卵β'-c糖蛋白糖链的结构鉴定 | 第67-71页 |
4.4.4 鲟鱼卵β'-c糖蛋白糖肽的结构鉴定 | 第71-74页 |
4.5 本章小结 | 第74-75页 |
第5章 总结 | 第75-77页 |
5.1 主要研究结论 | 第75页 |
5.2 创新点 | 第75-76页 |
5.3 展望 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
附录: 中英文缩略词对照 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |