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俄罗斯鲟鱼卵β-c糖蛋白的提取分离与结构表征

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
第1章 绪论第14-27页
    1.1 鱼卵的研究进展第14-17页
        1.1.1 鱼卵的概况第14页
        1.1.2 鱼卵的加工现状第14页
        1.1.3 鲟鱼卵及副产品第14-15页
        1.1.4 鱼卵过敏原的研究状况第15-17页
    1.2 鱼卵中卵黄蛋白原的研究现状第17-20页
        1.2.1 卵黄蛋白原简介第17-18页
        1.2.2 鱼类卵黄蛋白原的结构特性第18-19页
        1.2.3 鱼类卵黄蛋白原的免疫功能第19-20页
    1.3 糖蛋白的研究现状第20-25页
        1.3.1 糖蛋白简介第20-22页
        1.3.2 蛋白质糖基化第22-24页
        1.3.3 糖蛋白的质谱研究第24-25页
        1.3.4 糖蛋白研究所面临的挑战第25页
    1.4 本研究的目的和意义第25-26页
    1.5 本论文的主要研究内容第26-27页
第2章 鲟鱼卵β'-c糖蛋白的提取及分离纯化第27-43页
    2.1 引言第27页
    2.2 实验材料与仪器第27-29页
        2.2.1 材料与处理第27页
        2.2.2 主要仪器和试剂第27-29页
    2.3 实验方法第29-34页
        2.3.1 卵黄糖蛋白粗提物的制备第29页
        2.3.2 卵黄糖蛋白粗提物的初步分离第29-30页
        2.3.3 BCA试剂盒测定卵黄糖蛋白蛋白含量第30页
        2.3.4 苯酚硫酸法测定卵黄糖蛋白多糖含量第30-31页
        2.3.5 SDS-PAGE电泳分析第31-32页
        2.3.6 热处理分离纯化卵黄糖蛋白第32页
        2.3.7 碱处理分离纯化卵黄糖蛋白第32-33页
        2.3.8 超速离心法进一步纯化卵黄糖蛋白第33页
        2.3.9 PAS染色法鉴定糖蛋白第33-34页
    2.4 结果与分析第34-42页
        2.4.1 卵黄糖蛋白蛋白含量分析第34-35页
        2.4.2 卵黄糖蛋白多糖含量分析第35-36页
        2.4.3 卵黄糖蛋白初步分离结果比较第36-37页
        2.4.4 热处理与碱处理分离纯化卵黄糖蛋白第37-38页
        2.4.5 PAS染色法鉴定糖蛋白第38-41页
        2.4.6 超速离心法进一步纯化卵黄糖蛋白第41-42页
    2.5 本章小结第42-43页
第3章 鲟鱼卵β'-c糖蛋白蛋白部分的结构表征第43-58页
    3.1 引言第43页
    3.2 实验材料与仪器第43-44页
        3.2.1 材料与处理第43页
        3.2.2 主要实验仪器和试剂第43-44页
    3.3 实验方法第44-47页
        3.3.1 卵黄糖蛋白组分亚基分析第44-45页
        3.3.2 蛋白质胶条内酶切第45-46页
        3.3.3 液相质谱联用(LC-MS/MS)分析第46页
        3.3.4 蛋白数据库检索分析第46页
        3.3.5 鲟鱼卵卵黄糖蛋白生物信息学分析第46页
        3.3.6 氨基酸序列同源性分析第46页
        3.3.7 圆二色(CD)光谱分析糖蛋白二级结构第46-47页
    3.4 结果与分析第47-56页
        3.4.1 卵黄糖蛋白组分亚基分析第47-48页
        3.4.2 鲟鱼卵卵黄糖蛋白鉴定结果分析第48-51页
        3.4.3 鲟鱼卵卵黄糖蛋白生物信息学分析第51-52页
        3.4.4 鲟鱼卵β'-c蛋白同源性分析第52-55页
        3.4.5 圆二色(CD)光谱分析β,-c糖蛋白的二级结构第55-56页
    3.5 本章小结第56-58页
第4章 鲟鱼卵β'-c糖蛋白糖肽及糖链的结构表征第58-75页
    4.1 引言第58页
    4.2 实验材料与仪器第58-60页
        4.2.1 材料与处理第58页
        4.2.2 主要实验仪器和试剂第58-60页
    4.3 实验方法第60-64页
        4.3.1 N-型糖苷键的鉴定第60-61页
        4.3.2 O-型糖苷键的鉴定第61页
        4.3.3 糖蛋白中糖肽的制备及富集纯化第61页
        4.3.4 糖肽中N-糖链的释放及分离纯化第61-62页
        4.3.5 糖肽中N-糖链的完全甲基化及分离纯化第62-63页
        4.3.6 ESI(+)多级质谱分析N-糖链结构第63页
        4.3.7 HILIC-MS~n液质联用分析糖肽结构第63-64页
        4.3.8 糖链及糖肽的数据分析第64页
    4.4 结果与分析第64-74页
        4.4.1 N-型糖苷键的鉴定结果分析第64-65页
        4.4.2 O-型糖苷键的鉴定结果分析第65-67页
        4.4.3 鲟鱼卵β'-c糖蛋白糖链的结构鉴定第67-71页
        4.4.4 鲟鱼卵β'-c糖蛋白糖肽的结构鉴定第71-74页
    4.5 本章小结第74-75页
第5章 总结第75-77页
    5.1 主要研究结论第75页
    5.2 创新点第75-76页
    5.3 展望第76-77页
参考文献第77-83页
附录: 中英文缩略词对照第83-84页
致谢第84-85页

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