致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第17-19页 |
第一章 绪论 | 第19-36页 |
1.1 果蔬损伤愈合概述 | 第19-20页 |
1.2 木栓质 | 第20-29页 |
1.2.1 木栓质的定位 | 第21-22页 |
1.2.2 木栓质的组成成分 | 第22页 |
1.2.3 木栓质合成的相关酶 | 第22-23页 |
1.2.4 木栓质合成的相关基因 | 第23-29页 |
1.3 损伤愈合与抗氧化防护系统 | 第29-30页 |
1.4 脱落酸参与了果蔬的损伤愈合 | 第30-32页 |
1.5 脱落酸信号转导途径 | 第32-34页 |
1.6 研究内容及意义 | 第34-36页 |
第二章 脱落酸诱导番茄果实损伤木栓化相关基因差异表达 | 第36-50页 |
引言 | 第36页 |
2.1 材料与方法 | 第36-41页 |
2.1.1 试验材料 | 第36-37页 |
2.1.2 果实损伤和处理 | 第37页 |
2.1.3 果实乙烯释放率和重量损失率测定 | 第37页 |
2.1.4 木栓化测定 | 第37-38页 |
2.1.5 RNA提取,cDNA合成,实时荧光定量PCR分析 | 第38-40页 |
2.1.6 LOX和PPO活性测定 | 第40页 |
2.1.7 统计分析 | 第40-41页 |
2.2 结果与分析 | 第41-48页 |
2.2.1 果实乙烯释放率和重量损失率 | 第41页 |
2.2.2 损伤木栓化显微观察 | 第41-43页 |
2.2.3 SlPAL5和Sl4CL的转录水平 | 第43-44页 |
2.2.4 SPA合成相关基因的转录水平 | 第44-47页 |
2.2.5 PPO和LOX的转录水平和酶活性 | 第47-48页 |
2.3 讨论 | 第48-49页 |
2.4 小结 | 第49-50页 |
第三章 脱落酸促进猕猴桃损伤木栓化 | 第50-63页 |
引言 | 第50页 |
3.1 材料与方法 | 第50-54页 |
3.1.1 试验材料和处理 | 第50-51页 |
3.1.2 显微观察 | 第51-52页 |
3.1.3 乙烯释放率测定 | 第52页 |
3.1.4 重量损失率测定 | 第52页 |
3.1.5 PAL、CAD和POD酶活性测定 | 第52-53页 |
3.1.6 总酚和总黄酮含量测定 | 第53页 |
3.1.7 木栓质成分提取和气相色谱质谱联用(GC-MSD)分析 | 第53-54页 |
3.1.8 数据分析 | 第54页 |
3.2 结果与分析 | 第54-61页 |
3.2.1 损伤果实乙烯释放率和重量损失率 | 第54-55页 |
3.2.2 木栓质的显微观察 | 第55-57页 |
3.2.3 PAL、CAD和POD酶活性 | 第57-58页 |
3.2.4 总酚和总黄酮含量 | 第58-59页 |
3.2.5 损伤木栓质的可溶性化学成分 | 第59-61页 |
3.3 讨论 | 第61-62页 |
3.4 小结 | 第62-63页 |
第四章 脱落酸促进猕猴桃损伤木栓化的蛋白质组学分析 | 第63-96页 |
引言 | 第63页 |
4.1 材料与方法 | 第63-71页 |
4.1.1 试验材料和处理 | 第63-64页 |
4.1.2 iTRAQ分析 | 第64-67页 |
4.1.3 实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR) | 第67-69页 |
4.1.4 PAL、4CL和C4H酶活性测定 | 第69页 |
4.1.5 抗氧化酶活性测定 | 第69-70页 |
4.1.6 总酚和单体酚含量测定 | 第70页 |
4.1.7 GC-MSD分析 | 第70-71页 |
4.1.8 统计分析 | 第71页 |
4.2 结果与分析 | 第71-91页 |
4.2.1 总蛋白质含量 | 第71-72页 |
4.2.2 蛋白质SDS-PAGE电泳 | 第72-73页 |
4.2.3 iTRAQ鉴定蛋白的统计学分析 | 第73-77页 |
4.2.4 脱落酸响应蛋白的丰度变化和功能分类 | 第77-80页 |
4.2.5 差异丰度蛋白的Pathway富集分析 | 第80-86页 |
4.2.6 脱落酸响应蛋白的互作分析 | 第86-87页 |
4.2.7 差异丰度蛋白基因的qRT-PCR分析 | 第87-88页 |
4.2.8 损伤愈合相关酶活性分析 | 第88-90页 |
4.2.9 外源脱落酸诱导木栓质成分变化 | 第90-91页 |
4.3 讨论 | 第91-94页 |
4.3.1 脱落酸对采后猕猴桃损伤木栓化的促进作用 | 第91页 |
4.3.2 脱落酸对损伤木栓化代谢通路的调控 | 第91-93页 |
4.3.3 脱落酸促进木栓化的调控代谢网 | 第93-94页 |
4.4 小结 | 第94-96页 |
第五章 脱落酸诱导木栓质合成相关基因AchnKCS表达的调控 | 第96-123页 |
引言 | 第96-98页 |
5.1 材料与方法 | 第98-107页 |
5.1.1 试验材料和处理 | 第98-99页 |
5.1.2 CTAB法提取总DNA | 第99页 |
5.1.3 CTAB法提取总RNA和cDNA第一条链的合成 | 第99页 |
5.1.4 AchnKCS(Achn030011)基因克隆及其启动子序列扩增 | 第99-102页 |
5.1.5 AchnKCS(Achn030011)序列分析 | 第102页 |
5.1.6 AchnKCS-Pro-pAbAi载体的构建 | 第102-103页 |
5.1.7 AchnKCS亚细胞定位 | 第103-104页 |
5.1.8 转录因子亚细胞定位 | 第104页 |
5.1.9 酵母单杂交 | 第104-105页 |
5.1.10 双荧光素酶实验 | 第105-107页 |
5.2 结果与分析 | 第107-118页 |
5.2.1 AchnKCS基因CDS序列克隆 | 第107-108页 |
5.2.2 AchnKCS氨基酸序列同源性比较 | 第108-110页 |
5.2.3 AchnKCS蛋白的亚细胞定位 | 第110页 |
5.2.4 AchnKCS基因启动子序列分析 | 第110-112页 |
5.2.5 转录因子氨基酸序列同源性分析 | 第112-114页 |
5.2.6 酵母单杂交分析 | 第114-115页 |
5.2.7 双荧光素酶实验分析 | 第115-116页 |
5.2.8 转录因子的亚细胞定位 | 第116-117页 |
5.2.9 转录因子和AchnKCS的基因表达水平 | 第117-118页 |
5.3 讨论 | 第118-122页 |
5.4 小结 | 第122-123页 |
第六章 结论 | 第123-126页 |
6.1 结论 | 第123-124页 |
6.2 主要创新点 | 第124-125页 |
6.3 展望 | 第125-126页 |
参考文献 | 第126-145页 |
附录 | 第145-155页 |
作者简介 | 第155页 |
博士期间学术成果 | 第155页 |