摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第13-30页 |
1.1 课题研究背景及意义 | 第13-14页 |
1.2 脂质代谢概述 | 第14-16页 |
1.2.1 胆固醇代谢 | 第14-15页 |
1.2.2 甘油三酯代谢 | 第15-16页 |
1.3 降血脂天然产物的研究现状 | 第16-18页 |
1.4 食物蛋白源降脂肽的研究现状 | 第18-24页 |
1.4.1 食物蛋白源降脂肽的分类 | 第18-21页 |
1.4.2 食物蛋白源降脂肽的作用途径和机理 | 第21-23页 |
1.4.3 食物蛋白活性肽的常见分离方法 | 第23-24页 |
1.5 红松松仁的国内外研究进展 | 第24-27页 |
1.5.1 红松松仁中活性物质及其生理功能的研究 | 第24-26页 |
1.5.2 红松松仁的综合利用及未来展望 | 第26-27页 |
1.6 课题研究的主要内容 | 第27-30页 |
第2章 材料与方法 | 第30-43页 |
2.1 实验材料的准备 | 第30-32页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第30-31页 |
2.1.2 实验仪器设备 | 第31-32页 |
2.2 红松松仁降脂肽酶解工艺的优化 | 第32-36页 |
2.2.1 脱脂松仁的制备 | 第32页 |
2.2.2 松仁蛋白的制备 | 第32页 |
2.2.3 体外降脂模型的建立 | 第32-35页 |
2.2.4 蛋白酶的筛选实验 | 第35页 |
2.2.5 酶解单因素实验 | 第35-36页 |
2.2.6 酶解条件优化的响应面分析 | 第36页 |
2.3 松仁降脂肽的活性组分筛选及分离实验 | 第36-38页 |
2.3.1 不同水解阶段松仁降脂肽的体外降脂活性测定 | 第36页 |
2.3.2 大孔树脂分离实验 | 第36-38页 |
2.3.3 DEAE-52离子交换层析分离实验 | 第38页 |
2.3.4 SephadexG-25凝胶层析分离实验 | 第38页 |
2.4 分子量分布的测定 | 第38-39页 |
2.5 ESI-MS的测定 | 第39页 |
2.6 氨基酸组成测定 | 第39页 |
2.7 动物实验 | 第39-42页 |
2.7.1 高脂模型的建立及分组 | 第39页 |
2.7.2 血脂指标的测定 | 第39-40页 |
2.7.3 血脂指标的测定 | 第40页 |
2.7.4 肝脏病理形态观察 | 第40页 |
2.7.5 粪便及肝脏胆汁酸含量的测定 | 第40页 |
2.7.6 脂质代谢关键酶活性的测定 | 第40页 |
2.7.7 肝脏脂质代谢相关基因表达水平的测定 | 第40-42页 |
2.8 数据统计及图形分析 | 第42-43页 |
第3章 红松松仁降脂肽的酶解工艺参数优化 | 第43-55页 |
3.1 松仁降脂肽酶解蛋白酶的筛选 | 第43-46页 |
3.1.1 不同酶解物对胆固醇胶束溶液溶解度抑制率的影响 | 第44页 |
3.1.2 不同酶解物对胆酸盐结合力的影响 | 第44-46页 |
3.2 松仁降脂肽酶解单因素条件的确定 | 第46-49页 |
3.2.1 底物浓度对酶解反应的影响 | 第46-47页 |
3.2.2 pH值对酶解反应的影响 | 第47页 |
3.2.3 加酶量对酶解反应的影响 | 第47-48页 |
3.2.4 温度对酶解反应的影响 | 第48-49页 |
3.3 松仁降脂肽酶解工艺的响应面分析 | 第49-54页 |
3.3.1 因素水平表设计 | 第49-51页 |
3.3.2 回归方程模型的构建及显著性检验 | 第51-52页 |
3.3.3 响应面分析与优化 | 第52-54页 |
3.4 本章小结 | 第54-55页 |
第4章 红松松仁降脂肽的分离及氨基酸组成分析 | 第55-69页 |
4.1 不同酶解时间松仁降脂肽的体外活性分析 | 第55-57页 |
4.1.1 抑制胆固醇胶束溶解度能力的比较 | 第55-56页 |
4.1.2 结合胆酸盐能力的比较 | 第56-57页 |
4.2 松仁降脂肽的相对分子质量分布 | 第57-58页 |
4.3 松仁降脂肽的大孔树脂分离 | 第58-61页 |
4.3.1 固相介质筛选 | 第58-59页 |
4.3.2 DA201-C 的静态吸附及解吸性能分析 | 第59-60页 |
4.3.3 流态相介质梯度洗脱分离组分的降脂活性比较 | 第60-61页 |
4.4 松仁降脂肽的DEAE-52离子交换层析分离 | 第61-63页 |
4.4.1 DEAE-52离子交换层析分离 | 第61-62页 |
4.4.2 DEAE-52分离组分的降脂活性分析 | 第62-63页 |
4.5 松仁降脂肽的SephadexG-25凝胶层析分离 | 第63-65页 |
4.5.1 SephadexG-25凝胶层析分离 | 第63-64页 |
4.5.2 SephadexG-25分离组分的降脂活性分析 | 第64-65页 |
4.6 P75-B-b的氨基酸组成分析 | 第65-66页 |
4.7 P75-B-b的质谱分析 | 第66-67页 |
4.8 本章小结 | 第67-69页 |
第5章 松仁降脂肽对脂质代谢的影响 | 第69-90页 |
5.1 松仁降脂肽对小鼠成长发育及体重的影响 | 第69-71页 |
5.2 松仁降脂肽对小鼠脏器指数的影响 | 第71页 |
5.3 松仁降脂肽对小鼠血脂指标的影响 | 第71-75页 |
5.3.1 松仁降脂肽对总胆固醇(TC)的影响 | 第72页 |
5.3.2 松仁降脂肽对甘油三酯(TG)的影响 | 第72-73页 |
5.3.3 松仁降脂肽对低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响 | 第73-74页 |
5.3.4 松仁降脂肽对高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的影响 | 第74-75页 |
5.4 松仁降脂肽对小鼠肝脏组织形态的影响 | 第75-76页 |
5.5 松仁降脂肽对小鼠粪便胆汁酸含量的影响 | 第76-77页 |
5.6 松仁降脂肽对脂质代谢相关酶活性的影响 | 第77-80页 |
5.6.1 松仁降脂肽对HMG-CoAR酶活性的影响 | 第77-78页 |
5.6.2 松仁降脂肽对CYP7A1酶活性的影响 | 第78-79页 |
5.6.3 松仁降脂肽对LCAT酶活性的影响 | 第79-80页 |
5.6.4 松仁降脂肽对ACAT2酶活性的影响 | 第80页 |
5.7 松仁降脂肽对脂质代谢相关基因表达的影响 | 第80-88页 |
5.7.1 RNA纯度及完整性分析 | 第81页 |
5.7.2 引物特异性分析 | 第81-83页 |
5.7.3 脂质代谢相关基因表达水平分析 | 第83-88页 |
5.8 本章小结 | 第88-90页 |
结论 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-104页 |
攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第104-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
附录 | 第107页 |