| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 生物合成靛蓝色素机制研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 食用蓝色素使用现状 | 第10页 |
| 1.1.2 靛蓝色素的生物合成 | 第10-12页 |
| 1.2 苯乙烯单加氧酶研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3 靛蓝色素生物合成操纵子的转录调控 | 第14-15页 |
| 1.4 辅酶因子NADH及其再生系统 | 第15-16页 |
| 1.5 主要研究内容和意义 | 第16页 |
| 1.6 课题来源 | 第16-17页 |
| 第二章 Pseudomonas putida B4中靛蓝色素合成关键酶基因的验证及其功能评价 | 第17-46页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.2.1 药品试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.2 仪器和设备 | 第18页 |
| 2.2.3 试验菌株和载体 | 第18页 |
| 2.2.4 试验方法 | 第18-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-45页 |
| 2.3.1 styAB、styC、styABC基因的克隆 | 第27-28页 |
| 2.3.2 基因过表达载体的构建 | 第28-30页 |
| 2.3.3 基因过表达菌株的构建及其在靛蓝色素发酵途径的表型 | 第30-35页 |
| 2.3.4 styAB、styC同源交换片段的克隆 | 第35-36页 |
| 2.3.5 基因突变株的构建和鉴定 | 第36-39页 |
| 2.3.6 基因突变回复菌株的构建 | 第39-40页 |
| 2.3.7 基因缺失对靛蓝色素合成作用解析 | 第40-45页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第45-46页 |
| 第三章 靛蓝色素合成关键酶基因的原核表达验证 | 第46-57页 |
| 3.1 引言 | 第46页 |
| 3.2 材料与方法 | 第46-48页 |
| 3.2.1 药品试剂 | 第46页 |
| 3.2.2 仪器与设备 | 第46页 |
| 3.2.3 试验菌体和载体 | 第46-47页 |
| 3.2.4 试验方法 | 第47-48页 |
| 3.3 结果与分析 | 第48-56页 |
| 3.3.1 重组质粒及原核表达基因工程菌的构建 | 第48页 |
| 3.3.2 原核表达基因工程菌靛蓝色素生物发酵产量 | 第48-49页 |
| 3.3.3 基因工程菌E.coli AB合成靛蓝色素发酵条件的优化 | 第49-56页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第56-57页 |
| 第四章 Pseudomonas putida B4靛蓝色素合成转录调控机制研究 | 第57-72页 |
| 4.1 引言 | 第57页 |
| 4.2 材料与方法 | 第57-62页 |
| 4.2.1 药品试剂 | 第57页 |
| 4.2.2 仪器与设备 | 第57页 |
| 4.2.3 试验菌株和载体 | 第57-58页 |
| 4.2.4 试验方法 | 第58-62页 |
| 4.3 结果与分析 | 第62-70页 |
| 4.3.1 styS和styR丛因的克隆和鉴定 | 第62-63页 |
| 4.3.2 基因突变株的构建和鉴定 | 第63-66页 |
| 4.3.3 底物诱导作用对P.putida B4靛蓝合成途径中产物水平的影响 | 第66-68页 |
| 4.3.4 苯乙烯单加氧酶酶活水平分析 | 第68页 |
| 4.3.5 基因表达水平的定量分析 | 第68-70页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第70-72页 |
| 第五章 辅酶因子NADH对靛蓝合成代谢的调节效应研究 | 第72-85页 |
| 5.1 引言 | 第72页 |
| 5.2 材料与方法 | 第72-77页 |
| 5.2.1 药品试剂 | 第72页 |
| 5.2.2 仪器和设备 | 第72-73页 |
| 5.2.3 试验菌株和载体 | 第73页 |
| 5.2.4 试验方法 | 第73-77页 |
| 5.3 结果与分析 | 第77-84页 |
| 5.3.1 maeB基因的克隆 | 第77-78页 |
| 5.3.2 maeB基因过表达载体的构建 | 第78-79页 |
| 5.3.3 maeB基因过表达菌株及NADH辅酶因子再生增强体系的构建 | 第79-84页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第84-85页 |
| 第六章 结论与展望 | 第85-87页 |
| 6.1 结论 | 第85页 |
| 6.2 本文创新点 | 第85-86页 |
| 6.3 展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 附录 | 第94-97页 |
| 作者简历 | 第97页 |
