| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 苯并(α)芘概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 苯并(α)芘结构及性质 | 第12页 |
| 1.1.2 苯并(α)芘的来源及危害 | 第12-13页 |
| 1.2 细胞自噬 | 第13-15页 |
| 1.2.1 概念 | 第13-14页 |
| 1.2.2 研究现状 | 第14-15页 |
| 1.3 细胞焦亡 | 第15-16页 |
| 1.3.1 概念 | 第15-16页 |
| 1.3.2 研究现状 | 第16页 |
| 1.4 苯并(α)芘损伤机体细胞的作用机制 | 第16-20页 |
| 1.4.1 苯并(α)芘导致细胞DNA损伤 | 第16-17页 |
| 1.4.2 苯并(α)芘导致线粒体等细胞器损伤 | 第17-18页 |
| 1.4.3 苯并(α)芘导致细胞氧化应激 | 第18-19页 |
| 1.4.4 苯并(α)芘导致细胞自噬性损伤 | 第19-20页 |
| 1.4.5 苯并(α)芘导致细胞焦亡性损伤 | 第20页 |
| 1.5 本课题研究目的与内容 | 第20-22页 |
| 1.5.1 研究目的 | 第20-21页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第21-22页 |
| 第二章 苯并(α)芘对人肝细胞活力的影响 | 第22-34页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 试验材料、试剂和仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.1 试验细胞株 | 第22页 |
| 2.2.2 材料与试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 仪器与设备 | 第23页 |
| 2.3 试验方法 | 第23-26页 |
| 2.3.1 主要试剂配置方法 | 第23页 |
| 2.3.2 细胞培养及分组 | 第23-24页 |
| 2.3.3 MTT比色法测定细胞存活率(细胞活力检测) | 第24-25页 |
| 2.3.4 台盼蓝染色观察HL-7702肝细胞存活情况 | 第25页 |
| 2.3.5 流式细胞术检测细胞周期分布变化 | 第25页 |
| 2.3.6 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第25-26页 |
| 2.3.7 细胞内活性氧的测定 | 第26页 |
| 2.3.8 数据处理 | 第26页 |
| 2.4 结果与分析 | 第26-31页 |
| 2.4.1 细胞增殖率检测结果 | 第26页 |
| 2.4.2 台盼蓝染色观察HL-7702肝细胞存活结果 | 第26-28页 |
| 2.4.3 细胞周期分布结果 | 第28-29页 |
| 2.4.4 细胞凋亡率检测结果 | 第29-30页 |
| 2.4.5 细胞内活性氧检测结果 | 第30-31页 |
| 2.5 小结 | 第31-34页 |
| 第三章 苯并(α)芘对肝细胞自噬的影响 | 第34-46页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 试验材料、试剂和仪器 | 第34-35页 |
| 3.2.1 试验细胞株 | 第34页 |
| 3.2.2 材料与试剂 | 第34-35页 |
| 3.2.3 试验仪器 | 第35页 |
| 3.3 试验方法 | 第35-39页 |
| 3.3.1 主要试剂配置方法 | 第35-36页 |
| 3.3.2 试验分组 | 第36页 |
| 3.3.3 AO及MDC染色观察苯并(α)芘诱导肝细胞后的自噬效果 | 第36-37页 |
| 3.3.4 透射电子显微镜观察苯并(α)芘诱导肝细胞后细胞及细胞器变化 | 第37页 |
| 3.3.5 细胞内蛋白质表达量的测定 | 第37-39页 |
| 3.3.6 数据处理 | 第39页 |
| 3.4 结果与分析 | 第39-43页 |
| 3.4.1 AO及MDC染色观察苯并(α)芘诱导肝细胞后的自噬效果检测结果 | 第39-40页 |
| 3.4.2 透射电子显微镜观察苯并(α)芘诱导肝细胞后细胞自噬情况及细胞器变化结果 | 第40-41页 |
| 3.4.3 细胞内自噬特征指标蛋白质表达量的测定结果 | 第41-43页 |
| 3.5 本章小结 | 第43-46页 |
| 第四章 苯并(α)芘对肝细胞焦亡的影响 | 第46-56页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 试验材料、试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 4.2.1 试验细胞 | 第46页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第46-47页 |
| 4.2.3 试验仪器 | 第47页 |
| 4.3 试验方法 | 第47-49页 |
| 4.3.1 主要试剂配置方法 | 第47页 |
| 4.3.2 细胞培养及分组 | 第47页 |
| 4.3.3 相对电导率的测定 | 第47页 |
| 4.3.4 NO释放量的测定 | 第47-48页 |
| 4.3.5 LDH释放率的测定 | 第48页 |
| 4.3.6 细胞内焦亡相关蛋白质表达量的测定 | 第48页 |
| 4.3.7 数据处理 | 第48-49页 |
| 4.4 结果与分析 | 第49-53页 |
| 4.4.1 相对电导率检测结果 | 第49页 |
| 4.4.2 NO释放量检测结果 | 第49-50页 |
| 4.4.3 LDH释放率检测结果 | 第50-51页 |
| 4.4.4 细胞内焦亡相关蛋白质表达量的检测结果 | 第51-53页 |
| 4.5 小结 | 第53-56页 |
| 第五章 苯并(α)芘诱导的肝细胞自噬与焦亡之间的关系研究 | 第56-68页 |
| 5.1 引言 | 第56页 |
| 5.2 试验材料、试剂和仪器 | 第56-57页 |
| 5.2.1 试验细胞株 | 第56页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第56页 |
| 5.2.3 试验仪器 | 第56-57页 |
| 5.3 试验方法 | 第57-59页 |
| 5.3.1 主要试剂配置方法 | 第57页 |
| 5.3.2 细胞分组 | 第57页 |
| 5.3.3 自噬特异性抑制剂对相对电导率的影响 | 第57页 |
| 5.3.4 自噬特异性抑制剂对NO释放量的影响 | 第57-58页 |
| 5.3.5 自噬特异性抑制剂对LDH释放率的影响 | 第58页 |
| 5.3.6 自噬抑制剂对细胞内焦亡特征指标蛋白质表达量的影响 | 第58页 |
| 5.3.7 焦亡特异性抑制剂对细胞AO染色检测HL-7702细胞自噬情况的影响 | 第58-59页 |
| 5.3.8 焦亡特异性抑制剂对细胞内自噬特征指标蛋白质表达量的测定 | 第59页 |
| 5.3.9 数据处理 | 第59页 |
| 5.4 结果与分析 | 第59-65页 |
| 5.4.1 自噬特异性抑制剂对相对电导率影响的检测结果 | 第59-60页 |
| 5.4.2 自噬特异性抑制剂对NO释放量的影响检测结果 | 第60-61页 |
| 5.4.3 自噬特异性抑制剂对LDH释放率的影响检测结果 | 第61页 |
| 5.4.4 自噬特异性抑制剂对细胞内焦亡特征指标蛋白质表达量的影响检测结果 | 第61-63页 |
| 5.4.5 焦亡特异性抑制剂对细胞AO染色检测HL-7702细胞自噬情况影响检测结果 | 第63-64页 |
| 5.4.6 焦亡特异性抑制剂对细胞内自噬特征指标蛋白质表达量的影响检测结果 | 第64-65页 |
| 5.5 本章小结 | 第65-68页 |
| 第六章 结论与展望 | 第68-70页 |
| 6.1 结论 | 第68-69页 |
| 6.2 讨论与展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第82页 |
