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质粒pMG36e电转化保加利亚乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和干酪乳杆菌的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 引言第10-18页
    1.1 乳酸菌第10-12页
        1.1.1 乳酸菌的定义及分类第10页
        1.1.2 乳酸菌的生理功能及应用第10-12页
    1.2 乳杆菌第12-15页
        1.2.1 乳杆菌的概述与分类第12页
        1.2.2 保加利亚乳杆菌第12-13页
        1.2.3 鼠李糖乳杆菌第13页
        1.2.4 干酪乳杆菌第13-14页
        1.2.5 乳杆菌分子生物学和基因工程研究进展第14-15页
    1.3 乳杆菌载体和宿主的研究进展第15页
    1.4 乳杆菌电转化技术第15-18页
        1.4.1 电转化技术的原理及研究进展第15-16页
        1.4.2 影响电转化效率的因素第16-17页
        1.4.3 电转化的技术难点第17-18页
2 材料与方法第18-28页
    2.1 试验菌种来源第18页
        2.1.1 菌株第18页
        2.1.2 质粒第18页
    2.2 培养基及缓冲液第18-19页
        2.2.1 培养基第18-19页
        2.2.2 缓冲液第19页
    2.3 主要实验试剂第19-20页
    2.4 主要仪器设备第20页
    2.5 试验试剂及药品的配制第20-21页
    2.6 试验研究方法第21-27页
        2.6.1 大肠杆菌 DH5α中质粒(pMG36e)的提取及定量检测第21-22页
        2.6.2 筛选转化子的红霉素浓度的确定第22页
        2.6.3 原生质体的制备与电转化第22-26页
        2.6.4 转化子的鉴定第26-27页
        2.6.5 电转化效率的计算第27页
    2.7 统计方法第27-28页
3 结果分析第28-45页
    3.1 生长曲线的测定第28-31页
        3.1.1 受体菌在 MRS 培养中生长曲线的测定第28页
        3.1.2 受体菌在含不同浓度甘氨酸的 SMRS 中生长曲线测定第28-31页
    3.2 菌株的生长状态与细胞前处理对电转化效率的影响第31-33页
    3.3 缓冲液对电转化效率的影响第33-34页
    3.4 溶菌酶浓度对电转化效率的影响第34-37页
    3.5 质粒浓度对电转化效率的影响第37-39页
    3.6 电转化参数对电转化效率的影响第39-41页
    3.7 再生培养基对电转化效率的影响第41页
    3.8 转化子的鉴定第41-45页
        3.8.1 保加利亚乳杆菌 MH 转化子的鉴定第41-42页
        3.8.2 鼠李糖乳杆菌 05-28 转化子的鉴定第42-44页
        3.8.3 干酪乳杆菌 05-20 转化子的鉴定第44-45页
4 讨论第45-48页
    4.1 乳杆菌细胞前处理对电转化效率的影响第45-46页
    4.2 质粒浓度对电转化效率的影响第46页
    4.3 电转化参数对电转化效率的影响第46-47页
    4.4 再生培养基对电转化效率的影响第47页
    4.5 其他因素对电转化效率的影响第47-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-52页
附录第52-53页
在校期间发表的学术论文第53-54页
作者简介第54-55页
致谢第55-56页

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