| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 中英文缩写对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 菜籽肽 | 第13-16页 |
| 1.1.1 菜籽肽的制备 | 第13-14页 |
| 1.1.2 菜籽肽的分离纯化 | 第14-16页 |
| 1.1.3 菜籽肽的生物活性 | 第16页 |
| 1.2 抗氧化肽 | 第16-17页 |
| 1.2.1 天然抗氧化肽 | 第16-17页 |
| 1.2.2 植物源抗氧化肽 | 第17页 |
| 1.2.3 动物源抗氧化肽 | 第17页 |
| 1.3 多肽稳定性的研究 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第18页 |
| 1.5 本研究的主要内容 | 第18-20页 |
| 第二章 菜籽蛋白水解物(RPHs)的制备、分离纯化及抗氧化性分析 | 第20-33页 |
| 2.1 材料与方法 | 第20-21页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 菜籽蛋白水解物(RPHs)的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.2 菜籽蛋白水解物(RPHs)的超滤膜分离 | 第22页 |
| 2.2.3 葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-15)分离纯化菜籽肽 | 第22页 |
| 2.2.4 半制备型RP-HPLC分离纯化菜籽肽 | 第22页 |
| 2.2.5 抗氧化能力指数(ORAC)的分析 | 第22页 |
| 2.2.6 细胞毒性实验(MTT) | 第22-23页 |
| 2.2.7 细胞抗氧化活性实验(CAA) | 第23页 |
| 2.2.8 数据统计分析 | 第23页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第23-31页 |
| 2.3.1 菜籽蛋白水解物(RPHs)的超滤膜分离 | 第23-26页 |
| 2.3.2 菜籽蛋白水解物(RPHs)的凝胶色谱分离 | 第26-28页 |
| 2.3.3 半制备液相RP-HPLC分离菜籽抗氧化肽 | 第28-31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-33页 |
| 第三章 菜籽抗氧化肽的氨基酸序列分析 | 第33-42页 |
| 3.1 材料与设备 | 第33页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第33页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-34页 |
| 3.2.1 分析型液相RP-HPLC检测菜籽抗氧化肽纯度 | 第33-34页 |
| 3.2.2 MALDI-TOF/TOF-MS/MS分析多肽序列 | 第34页 |
| 3.2.3 ESI-MS/MS验证分析多肽序列 | 第34页 |
| 3.2.4 体外抗氧化活性分析 | 第34页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第34-40页 |
| 3.3.1 分析型液相RP-HPLC检测菜籽抗氧化肽纯度 | 第34-35页 |
| 3.3.2 MALDI-TOF/TOF-MS/MS分析 | 第35-38页 |
| 3.3.3 ESI-MS/MS分析 | 第38-40页 |
| 3.3.4 多肽(YWDHNNPQIR和WDHHAPQLR)的体外抗氧化活性测定 | 第40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-42页 |
| 第四章 菜籽抗氧化肽(RPH-P4-S3-R3)抗氧化机理初探 | 第42-52页 |
| 4.1 材料与设备 | 第42-43页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第42页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第42-43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-44页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第43页 |
| 4.2.2 MTT法测定细胞活力及细胞形态观察 | 第43页 |
| 4.2.3 H_2O_2诱导HUVEC氧化损伤模型的建立 | 第43页 |
| 4.2.4 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC细胞活力的影响 | 第43页 |
| 4.2.5 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC的保护作用 | 第43-44页 |
| 4.2.6 Western Blot检测 | 第44页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第44-50页 |
| 4.3.1 H_2O_2诱导HUVEC氧化损伤模型的建立 | 第44-46页 |
| 4.3.2 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC细胞活力的影响 | 第46-47页 |
| 4.3.3 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC的保护作用 | 第47-49页 |
| 4.3.4 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC凋亡蛋白表达的影响 | 第49-50页 |
| 4.4 本章小结 | 第50-52页 |
| 第五章 菜籽抗氧化肽的环境稳定性研究 | 第52-60页 |
| 5.1 材料与设备 | 第52-53页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第52页 |
| 5.1.2 仪器与设备 | 第52-53页 |
| 5.2 实验方法 | 第53-54页 |
| 5.2.1 DPPH·自由基清除活性的测定 | 第53页 |
| 5.2.2 Fe~(2+)-螯合金属离子能力的测定 | 第53页 |
| 5.2.3 抗氧化肽活性保持率计算 | 第53页 |
| 5.2.4 温度对抗氧化肽稳定性的影响 | 第53页 |
| 5.2.5 pH对抗氧化肽稳定性的影响 | 第53页 |
| 5.2.6 食品配料成分对抗氧化肽稳定性的影响 | 第53页 |
| 5.2.7 金属离子对抗氧化肽稳定性的影响 | 第53-54页 |
| 5.2.8 防腐剂对抗氧化肽稳定性的影响 | 第54页 |
| 5.2.9 胃-肠道蛋白酶对抗氧化肽稳定性的影响 | 第54页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第54-59页 |
| 5.3.1 温度对抗氧化肽稳定性的影响 | 第54-55页 |
| 5.3.2 pH对抗氧化肽稳定性的影响 | 第55页 |
| 5.3.3 食品配料成分对抗氧化肽稳定性的影响 | 第55-56页 |
| 5.3.4 金属离子对抗氧化肽稳定性的影响 | 第56-57页 |
| 5.3.5 防腐剂对抗氧化肽稳定性的影响 | 第57-58页 |
| 5.3.6 胃-肠道蛋白酶对菜籽抗氧化肽稳定性的影响 | 第58-59页 |
| 5.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 主要结论 | 第60-62页 |
| 本研究工作的创新点 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读硕士期间研究成果 | 第70页 |