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菜籽抗氧化肽的制备、抗氧化机理及其稳定性研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
中英文缩写对照表第12-13页
第一章 前言第13-20页
    1.1 菜籽肽第13-16页
        1.1.1 菜籽肽的制备第13-14页
        1.1.2 菜籽肽的分离纯化第14-16页
        1.1.3 菜籽肽的生物活性第16页
    1.2 抗氧化肽第16-17页
        1.2.1 天然抗氧化肽第16-17页
        1.2.2 植物源抗氧化肽第17页
        1.2.3 动物源抗氧化肽第17页
    1.3 多肽稳定性的研究第17-18页
    1.4 本研究的目的及意义第18页
    1.5 本研究的主要内容第18-20页
第二章 菜籽蛋白水解物(RPHs)的制备、分离纯化及抗氧化性分析第20-33页
    2.1 材料与方法第20-21页
        2.1.1 材料与试剂第20-21页
        2.1.2 仪器与设备第21页
    2.2 实验方法第21-23页
        2.2.1 菜籽蛋白水解物(RPHs)的制备第21-22页
        2.2.2 菜籽蛋白水解物(RPHs)的超滤膜分离第22页
        2.2.3 葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-15)分离纯化菜籽肽第22页
        2.2.4 半制备型RP-HPLC分离纯化菜籽肽第22页
        2.2.5 抗氧化能力指数(ORAC)的分析第22页
        2.2.6 细胞毒性实验(MTT)第22-23页
        2.2.7 细胞抗氧化活性实验(CAA)第23页
        2.2.8 数据统计分析第23页
    2.3 结果与讨论第23-31页
        2.3.1 菜籽蛋白水解物(RPHs)的超滤膜分离第23-26页
        2.3.2 菜籽蛋白水解物(RPHs)的凝胶色谱分离第26-28页
        2.3.3 半制备液相RP-HPLC分离菜籽抗氧化肽第28-31页
    2.4 本章小结第31-33页
第三章 菜籽抗氧化肽的氨基酸序列分析第33-42页
    3.1 材料与设备第33页
        3.1.1 材料与试剂第33页
        3.1.2 仪器与设备第33页
    3.2 实验方法第33-34页
        3.2.1 分析型液相RP-HPLC检测菜籽抗氧化肽纯度第33-34页
        3.2.2 MALDI-TOF/TOF-MS/MS分析多肽序列第34页
        3.2.3 ESI-MS/MS验证分析多肽序列第34页
        3.2.4 体外抗氧化活性分析第34页
    3.3 结果与讨论第34-40页
        3.3.1 分析型液相RP-HPLC检测菜籽抗氧化肽纯度第34-35页
        3.3.2 MALDI-TOF/TOF-MS/MS分析第35-38页
        3.3.3 ESI-MS/MS分析第38-40页
        3.3.4 多肽(YWDHNNPQIR和WDHHAPQLR)的体外抗氧化活性测定第40页
    3.4 本章小结第40-42页
第四章 菜籽抗氧化肽(RPH-P4-S3-R3)抗氧化机理初探第42-52页
    4.1 材料与设备第42-43页
        4.1.1 材料与试剂第42页
        4.1.2 仪器与设备第42-43页
    4.2 实验方法第43-44页
        4.2.1 细胞培养第43页
        4.2.2 MTT法测定细胞活力及细胞形态观察第43页
        4.2.3 H_2O_2诱导HUVEC氧化损伤模型的建立第43页
        4.2.4 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC细胞活力的影响第43页
        4.2.5 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC的保护作用第43-44页
        4.2.6 Western Blot检测第44页
    4.3 结果与讨论第44-50页
        4.3.1 H_2O_2诱导HUVEC氧化损伤模型的建立第44-46页
        4.3.2 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC细胞活力的影响第46-47页
        4.3.3 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC的保护作用第47-49页
        4.3.4 RPH-P4-S3-R3对氧化损伤HUVEC凋亡蛋白表达的影响第49-50页
    4.4 本章小结第50-52页
第五章 菜籽抗氧化肽的环境稳定性研究第52-60页
    5.1 材料与设备第52-53页
        5.1.1 材料与试剂第52页
        5.1.2 仪器与设备第52-53页
    5.2 实验方法第53-54页
        5.2.1 DPPH·自由基清除活性的测定第53页
        5.2.2 Fe~(2+)-螯合金属离子能力的测定第53页
        5.2.3 抗氧化肽活性保持率计算第53页
        5.2.4 温度对抗氧化肽稳定性的影响第53页
        5.2.5 pH对抗氧化肽稳定性的影响第53页
        5.2.6 食品配料成分对抗氧化肽稳定性的影响第53页
        5.2.7 金属离子对抗氧化肽稳定性的影响第53-54页
        5.2.8 防腐剂对抗氧化肽稳定性的影响第54页
        5.2.9 胃-肠道蛋白酶对抗氧化肽稳定性的影响第54页
    5.3 结果与讨论第54-59页
        5.3.1 温度对抗氧化肽稳定性的影响第54-55页
        5.3.2 pH对抗氧化肽稳定性的影响第55页
        5.3.3 食品配料成分对抗氧化肽稳定性的影响第55-56页
        5.3.4 金属离子对抗氧化肽稳定性的影响第56-57页
        5.3.5 防腐剂对抗氧化肽稳定性的影响第57-58页
        5.3.6 胃-肠道蛋白酶对菜籽抗氧化肽稳定性的影响第58-59页
    5.4 本章小结第59-60页
主要结论第60-62页
本研究工作的创新点第62-63页
参考文献第63-69页
致谢第69-70页
攻读硕士期间研究成果第70页

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