| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-27页 |
| ·前言 | 第12页 |
| ·鸡蛋过敏 | 第12-19页 |
| ·鸡蛋过敏的免疫机制 | 第13-14页 |
| ·鸡蛋中的主要过敏原 | 第14-15页 |
| ·加工对鸡蛋过敏原结构与过敏原性的影响 | 第15-19页 |
| ·蛋清中的卵转铁蛋白 | 第19-24页 |
| ·卵转铁蛋白的结构特征 | 第19-20页 |
| ·卵转铁蛋白的功能特性 | 第20-22页 |
| ·卵转铁蛋白结合铁的机制 | 第22-23页 |
| ·卵转铁蛋白的免疫学性质 | 第23-24页 |
| ·金属离子对过敏原蛋白过敏原性的影响 | 第24页 |
| ·立题背景与研究内容 | 第24-27页 |
| ·立题背景 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25-27页 |
| 第2章 无铁卵转铁蛋白及卵转铁蛋白铁螯合物的制备 | 第27-41页 |
| ·引言 | 第27页 |
| ·材料与设备 | 第27-29页 |
| ·试剂与材料 | 第27页 |
| ·设备 | 第27-28页 |
| ·溶液配制 | 第28-29页 |
| ·试验方法 | 第29-33页 |
| ·鸡蛋预处理 | 第29页 |
| ·卵转铁蛋白的分离纯化 | 第29-30页 |
| ·SDS-PAGE电泳鉴定蛋白质的纯度 | 第30-31页 |
| ·质谱鉴定 | 第31-32页 |
| ·影响铁螯合卵转铁蛋白的溶液条件分析 | 第32页 |
| ·制备无铁卵转铁蛋白(Apo-OVT) | 第32-33页 |
| ·制备卵转铁蛋白铁螯合物(Holo-OVT) | 第33页 |
| ·Urea-PAGE电泳鉴定卵转铁蛋白螯合铁离子的能力 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-38页 |
| ·层析法分离纯化卵转铁蛋白 | 第33-34页 |
| ·质谱鉴定结果 | 第34-36页 |
| ·不同溶液环境对卵转铁蛋白结合铁离子能力的影响 | 第36-38页 |
| ·Apo-OVT和Holo-OVT的纯度鉴定 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| ·层析分离方法的选择 | 第38-39页 |
| ·溶液条件对卵转铁蛋白结合铁离子能力的影响 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第3章 无铁卵转铁蛋白及其铁螯合物多克隆抗体的制备 | 第41-50页 |
| ·引言 | 第41页 |
| ·材料与设备 | 第41-43页 |
| ·试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器与设备 | 第41-42页 |
| ·溶液的配制 | 第42-43页 |
| ·实验动物 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·抗原的制备 | 第43页 |
| ·免疫方案 | 第43页 |
| ·分离血清 | 第43-44页 |
| ·最佳抗原包被浓度和酶标二抗稀释度的确定 | 第44页 |
| ·间接ELISA测抗体效价 | 第44-45页 |
| ·蛋白免疫印迹 | 第45页 |
| ·结果与分析 | 第45-48页 |
| ·抗原包被浓度和最佳二抗稀释度的确定 | 第45-47页 |
| ·免疫过程中抗体效价监测 | 第47页 |
| ·免疫印迹鉴定蛋白与多克隆抗体的免疫反应性 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第48-49页 |
| ·Apo-OVT和Holo-OVT的抗原性分析 | 第49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第4章 铁离子螯合卵转铁蛋白后的构象及过敏原性变化 | 第50-65页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·材料与设备 | 第50-51页 |
| ·试剂与材料 | 第50-51页 |
| ·主要仪器与设备 | 第51页 |
| ·溶液的配置 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-54页 |
| ·紫外吸收光谱分析 | 第51-52页 |
| ·内源荧光光谱分析 | 第52页 |
| ·远紫外圆二色光谱分析 | 第52页 |
| ·与IgG结合能力的检测 | 第52-53页 |
| ·与IgE结合能力的检测 | 第53-54页 |
| ·结果与分析 | 第54-62页 |
| ·pH值对Holo-OVT蛋白构象的影响 | 第54-56页 |
| ·Fe~(3+)浓度对Apo-OVT蛋白构象的影响 | 第56-58页 |
| ·Holo-OVT和Apo-OVT潜在过敏原性的比较 | 第58-60页 |
| ·pH值对Holo-OVT蛋白过敏原性的影响 | 第60-61页 |
| ·Fe~(3+)浓度对Apo-OVT蛋白过敏原性的影响 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·卵转铁蛋白结合和释放Fe~(3+)过程的构象表征 | 第62-63页 |
| ·卵转铁蛋白结合和释放Fe~(3+)过程的过敏原性分析 | 第63-64页 |
| ·卵转铁蛋白的构象与潜在过敏原性的关系 | 第64页 |
| ·小结 | 第64-65页 |
| 第5章 无铁卵转铁蛋白及其铁螯合物的消化稳定性 | 第65-76页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·材料与设备 | 第65-66页 |
| ·试剂与材料 | 第65页 |
| ·主要仪器与设备 | 第65-66页 |
| ·溶液的配置 | 第66页 |
| ·实验方法 | 第66-68页 |
| ·蛋白的制备 | 第66页 |
| ·体外模拟胃消化 | 第66-67页 |
| ·体外模拟肠消化 | 第67页 |
| ·非还原SDS-PAGE | 第67页 |
| ·ELISA实验 | 第67-68页 |
| ·结果与分析 | 第68-73页 |
| ·卵转铁蛋白的模拟胃液消化 | 第68-70页 |
| ·卵转铁蛋白的模拟肠液消化 | 第70页 |
| ·SGF消化产物与IgG的结合能力 | 第70-71页 |
| ·SIF消化产物与IgG的结合能力 | 第71-73页 |
| ·讨论 | 第73-74页 |
| ·无铁卵转铁蛋白及其铁螯合物的模拟胃、肠液消化 | 第73-74页 |
| ·卵转铁蛋白的消化产物与IgG结合能力的分析 | 第74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第6章 结论与展望 | 第76-78页 |
| ·结论 | 第76页 |
| ·本研究创新点 | 第76-77页 |
| ·展望 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-84页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第84页 |
