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沙门氏菌富集及ELISA检测方法的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩略语表第7-14页
第一章 前言第14-26页
   ·沙门氏菌概述第14-16页
     ·沙门氏菌生物学性状第14-15页
     ·沙门氏菌的抗原结构第15-16页
     ·沙门氏菌的危害及现状第16页
   ·沙门氏菌检测方法研究进展第16-22页
     ·传统检测方法第16-17页
     ·免疫学方法第17-18页
     ·分子生物学方法第18-19页
     ·基因芯片第19-20页
     ·核酸探针第20页
     ·环介导等温扩增LAMP第20-21页
     ·电阻抗法第21页
     ·传感器第21-22页
   ·免疫磁珠富集分离技术第22-25页
     ·免疫磁珠分离技术第22页
     ·免疫磁珠结构第22-23页
     ·免疫磁珠分离技术的基本原理第23页
     ·免疫磁珠在食品微生物检测中的应用第23-25页
   ·展望第25-26页
第二章 抗沙门氏菌多克隆抗体的制备第26-47页
   ·材料与仪器第26-32页
     ·试剂与材料第27-30页
     ·实验仪器第30页
     ·相关试剂和培养基配制第30-32页
   ·实验方法第32-37页
     ·免疫原制备第32-33页
     ·抗沙门氏菌多克隆抗体的制备第33-34页
     ·兔抗血清效价的测定第34-35页
     ·斑点杂交检测多抗交叉反应第35页
     ·抗血清纯化第35-36页
     ·纯化抗体SDS-PADE鉴定分析第36-37页
     ·考马斯亮蓝法测定抗体浓度第37页
   ·结果与讨论第37-44页
     ·多克隆抗体的效价第37-38页
     ·SDS-PAGE电泳分析纯化多克隆抗体第38-40页
     ·杂菌抗原反向吸附法纯化多克隆抗体分析第40-42页
     ·斑点杂交验证抗原反向吸附法纯化抗体特异性结果分析第42-44页
   ·讨论第44-46页
     ·多克隆抗体的制备第44-45页
     ·杂菌抗原反向吸附法分析第45-46页
   ·小结第46-47页
第三章 免疫磁珠富集分离沙门氏菌方法的建立第47-67页
   ·材料与仪器第48-49页
     ·实验菌株第48页
     ·实验材料第48页
     ·主要仪器和设备第48-49页
     ·主要溶液配制第49页
   ·实验方法第49-55页
     ·免疫磁珠的表征第49页
     ·兔抗沙门氏菌免疫磁珠的制备第49-51页
     ·抗体不同添加量的确定第51页
     ·免疫磁珠捕获效率计算第51页
     ·不同封闭剂的比较第51-52页
     ·免疫磁珠工作浓度的确定第52页
     ·免疫磁珠与菌液最佳反应时间的确定第52页
     ·磁分离时间的确定第52-53页
     ·不同磁强度的比较第53页
     ·不同粒径大小磁珠富集效果的比较第53页
     ·免疫磁珠捕获不同菌浓度的比较第53-54页
     ·免疫磁珠在杂菌体系中捕获效率的比较第54页
     ·模拟免疫磁珠在实际样品中富集:牛奶和鸡蛋第54页
     ·不同菌属捕获效率比较第54-55页
   ·结果与讨论第55-64页
     ·透射电镜表征分析第55-56页
     ·磁珠在偶联前后及偶联过程中的粒径分布图第56页
     ·偶联抗体不同添加量结果分析第56-57页
     ·不同封闭剂比较第57-58页
     ·不同偶联工艺比较第58页
     ·免疫磁珠工作浓度的确定第58-59页
     ·免疫磁珠与菌液最佳反应时间结果分析第59-60页
     ·磁分离最佳时间确定结果分析第60-61页
     ·不同磁强度比较第61页
     ·不同粒径大小磁珠富集效果结果分析第61-62页
     ·免疫磁珠捕获不同菌浓度结果分析第62-63页
     ·特异性实验结果分析第63页
     ·食品基质结果分析第63-64页
     ·对不同菌属捕获效率结果分析第64页
   ·讨论第64-66页
     ·免疫磁珠的制备第65页
     ·富集分离过程分析第65-66页
     ·最佳工艺和条件分析第66页
   ·小结第66-67页
第四章 双抗夹心ELISA方法的初步建立第67-77页
   ·试验材料与仪器第67-69页
     ·试剂与材料第68页
     ·实验设备第68页
     ·主要试剂第68-69页
   ·实验方法第69-71页
     ·多克隆抗体和单克隆抗体配对试验第69页
     ·棋盘滴定法确定多克隆抗体和单克隆抗体工作浓度第69-70页
     ·双抗夹心ELISA方法特异性的判断第70页
     ·双抗夹心ELISA方法灵敏度的确定第70-71页
     ·双抗夹心ELISA方法与免疫磁珠富集分离法结合应用第71页
   ·结果第71-75页
     ·抗体配对实验结果第71页
     ·最佳工作浓度分析第71-72页
     ·同属特异性分析第72-73页
     ·不同属特异性分析第73-74页
     ·灵敏度分析第74页
     ·食物样品中分析第74-75页
   ·讨论第75-76页
     ·实验操作细节对ELISA检测结果的影响第75页
     ·配对抗体的选择第75页
     ·双抗夹心ELISA方法的特异性和灵敏性分析第75-76页
   ·小结第76-77页
第五章 结论与展望第77-80页
   ·结论第77-78页
     ·抗沙门氏菌多克隆抗体的制备第77页
     ·免疫磁珠富集分离目的菌方法的建立第77页
     ·双抗夹心ELISA方法检测沙门氏菌的初步建立第77-78页
   ·展望第78-80页
     ·沙门氏菌单克隆抗体的制备第78页
     ·进一步优化免疫磁珠富集分离方法第78页
     ·免疫磁珠富集分离方法和快速检测方法相结合检测目的菌第78-80页
致谢第80-81页
参考文献第81-87页
个人介绍第87页
攻读学位期间的研究成果第87页

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