摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩略语表 | 第7-14页 |
第一章 前言 | 第14-26页 |
·沙门氏菌概述 | 第14-16页 |
·沙门氏菌生物学性状 | 第14-15页 |
·沙门氏菌的抗原结构 | 第15-16页 |
·沙门氏菌的危害及现状 | 第16页 |
·沙门氏菌检测方法研究进展 | 第16-22页 |
·传统检测方法 | 第16-17页 |
·免疫学方法 | 第17-18页 |
·分子生物学方法 | 第18-19页 |
·基因芯片 | 第19-20页 |
·核酸探针 | 第20页 |
·环介导等温扩增LAMP | 第20-21页 |
·电阻抗法 | 第21页 |
·传感器 | 第21-22页 |
·免疫磁珠富集分离技术 | 第22-25页 |
·免疫磁珠分离技术 | 第22页 |
·免疫磁珠结构 | 第22-23页 |
·免疫磁珠分离技术的基本原理 | 第23页 |
·免疫磁珠在食品微生物检测中的应用 | 第23-25页 |
·展望 | 第25-26页 |
第二章 抗沙门氏菌多克隆抗体的制备 | 第26-47页 |
·材料与仪器 | 第26-32页 |
·试剂与材料 | 第27-30页 |
·实验仪器 | 第30页 |
·相关试剂和培养基配制 | 第30-32页 |
·实验方法 | 第32-37页 |
·免疫原制备 | 第32-33页 |
·抗沙门氏菌多克隆抗体的制备 | 第33-34页 |
·兔抗血清效价的测定 | 第34-35页 |
·斑点杂交检测多抗交叉反应 | 第35页 |
·抗血清纯化 | 第35-36页 |
·纯化抗体SDS-PADE鉴定分析 | 第36-37页 |
·考马斯亮蓝法测定抗体浓度 | 第37页 |
·结果与讨论 | 第37-44页 |
·多克隆抗体的效价 | 第37-38页 |
·SDS-PAGE电泳分析纯化多克隆抗体 | 第38-40页 |
·杂菌抗原反向吸附法纯化多克隆抗体分析 | 第40-42页 |
·斑点杂交验证抗原反向吸附法纯化抗体特异性结果分析 | 第42-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
·多克隆抗体的制备 | 第44-45页 |
·杂菌抗原反向吸附法分析 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第三章 免疫磁珠富集分离沙门氏菌方法的建立 | 第47-67页 |
·材料与仪器 | 第48-49页 |
·实验菌株 | 第48页 |
·实验材料 | 第48页 |
·主要仪器和设备 | 第48-49页 |
·主要溶液配制 | 第49页 |
·实验方法 | 第49-55页 |
·免疫磁珠的表征 | 第49页 |
·兔抗沙门氏菌免疫磁珠的制备 | 第49-51页 |
·抗体不同添加量的确定 | 第51页 |
·免疫磁珠捕获效率计算 | 第51页 |
·不同封闭剂的比较 | 第51-52页 |
·免疫磁珠工作浓度的确定 | 第52页 |
·免疫磁珠与菌液最佳反应时间的确定 | 第52页 |
·磁分离时间的确定 | 第52-53页 |
·不同磁强度的比较 | 第53页 |
·不同粒径大小磁珠富集效果的比较 | 第53页 |
·免疫磁珠捕获不同菌浓度的比较 | 第53-54页 |
·免疫磁珠在杂菌体系中捕获效率的比较 | 第54页 |
·模拟免疫磁珠在实际样品中富集:牛奶和鸡蛋 | 第54页 |
·不同菌属捕获效率比较 | 第54-55页 |
·结果与讨论 | 第55-64页 |
·透射电镜表征分析 | 第55-56页 |
·磁珠在偶联前后及偶联过程中的粒径分布图 | 第56页 |
·偶联抗体不同添加量结果分析 | 第56-57页 |
·不同封闭剂比较 | 第57-58页 |
·不同偶联工艺比较 | 第58页 |
·免疫磁珠工作浓度的确定 | 第58-59页 |
·免疫磁珠与菌液最佳反应时间结果分析 | 第59-60页 |
·磁分离最佳时间确定结果分析 | 第60-61页 |
·不同磁强度比较 | 第61页 |
·不同粒径大小磁珠富集效果结果分析 | 第61-62页 |
·免疫磁珠捕获不同菌浓度结果分析 | 第62-63页 |
·特异性实验结果分析 | 第63页 |
·食品基质结果分析 | 第63-64页 |
·对不同菌属捕获效率结果分析 | 第64页 |
·讨论 | 第64-66页 |
·免疫磁珠的制备 | 第65页 |
·富集分离过程分析 | 第65-66页 |
·最佳工艺和条件分析 | 第66页 |
·小结 | 第66-67页 |
第四章 双抗夹心ELISA方法的初步建立 | 第67-77页 |
·试验材料与仪器 | 第67-69页 |
·试剂与材料 | 第68页 |
·实验设备 | 第68页 |
·主要试剂 | 第68-69页 |
·实验方法 | 第69-71页 |
·多克隆抗体和单克隆抗体配对试验 | 第69页 |
·棋盘滴定法确定多克隆抗体和单克隆抗体工作浓度 | 第69-70页 |
·双抗夹心ELISA方法特异性的判断 | 第70页 |
·双抗夹心ELISA方法灵敏度的确定 | 第70-71页 |
·双抗夹心ELISA方法与免疫磁珠富集分离法结合应用 | 第71页 |
·结果 | 第71-75页 |
·抗体配对实验结果 | 第71页 |
·最佳工作浓度分析 | 第71-72页 |
·同属特异性分析 | 第72-73页 |
·不同属特异性分析 | 第73-74页 |
·灵敏度分析 | 第74页 |
·食物样品中分析 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
·实验操作细节对ELISA检测结果的影响 | 第75页 |
·配对抗体的选择 | 第75页 |
·双抗夹心ELISA方法的特异性和灵敏性分析 | 第75-76页 |
·小结 | 第76-77页 |
第五章 结论与展望 | 第77-80页 |
·结论 | 第77-78页 |
·抗沙门氏菌多克隆抗体的制备 | 第77页 |
·免疫磁珠富集分离目的菌方法的建立 | 第77页 |
·双抗夹心ELISA方法检测沙门氏菌的初步建立 | 第77-78页 |
·展望 | 第78-80页 |
·沙门氏菌单克隆抗体的制备 | 第78页 |
·进一步优化免疫磁珠富集分离方法 | 第78页 |
·免疫磁珠富集分离方法和快速检测方法相结合检测目的菌 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-87页 |
个人介绍 | 第87页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第87页 |