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内蒙古淡水鱼低温贮藏中腐败菌群分析及特定腐败菌群体信号分子研究

摘要第2-4页
Abstract第4-5页
中英文缩略语表第10-11页
第一章 绪论第11-22页
    1.1 淡水鱼现状第11页
    1.2 淡水鱼的腐败及品质评价指标第11-14页
        1.2.1 淡水鱼的腐败第11-12页
        1.2.2 鱼类品质指标研究进展第12-14页
            1.2.2.1 感官评价第12页
            1.2.2.2 化学指标第12-13页
            1.2.2.3 物理指标第13页
            1.2.2.4 微生物指标第13-14页
    1.3 水产品特定腐败菌第14-16页
        1.3.1 特定腐败菌概念第14页
        1.3.2 水产品中SSO的种类第14页
        1.3.3 鱼类微生物菌群研究方法第14-16页
            1.3.3.1 稀释涂布平板法第14-15页
            1.3.3.2 高通量测序技术第15-16页
    1.4 细菌群体感应系统概述第16-19页
        1.4.1 群体感应的概念第16页
        1.4.2 群体感应的信号分子第16-17页
        1.4.3 AHLs常规检测方法第17-18页
            1.4.3.1 平板报告菌法第17页
            1.4.3.2 薄层层析法第17-18页
            1.4.3.3 高效液相色谱-质谱法第18页
            1.4.3.4 气相色谱-质谱法第18页
        1.4.4 群体感应在食品防腐保鲜方面的进展第18-19页
    1.5 细胞传感技术第19-20页
        1.5.1 细胞传感概述第19页
        1.5.2 细胞电化学传感技术第19-20页
        1.5.3 肥大细胞与传感器应用第20页
    1.6 研究目的和意义第20-21页
    1.7 主要研究内容第21-22页
第二章 内蒙古淡水鱼4℃冷藏期间品质及菌相变化第22-41页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 主要材料第22页
        2.1.2 主要试剂第22-23页
        2.1.3 主要仪器第23页
        2.1.4 主要试剂与培养基的配制第23页
    2.2 实验方法第23-27页
        2.2.1 样品的采集处理第23-24页
        2.2.2 淡水鱼腐败指标测定第24-25页
            2.2.2.1 电导率测定第24页
            2.2.2.2 pH值的测定第24页
            2.2.2.3 挥发性盐基氮的测定第24页
            2.2.2.4 菌落总数的测定第24页
            2.2.2.5 感官评价第24-25页
        2.2.3 三种淡水鱼各点总DNA的提取第25页
        2.2.4 淡水鱼微生物16S rDNAV3-4区扩增第25页
        2.2.5 均一化文库、上机测序第25-26页
        2.2.6 统计学处理第26页
            2.2.6.1 样本数据处理与序列数目统计第26页
            2.2.6.2 生物信息学分析第26页
        2.2.7 数据分析第26-27页
    2.3 结果与分析第27-40页
        2.3.1 淡水鱼冷藏过程中腐败指标变化第27-30页
            2.3.1.1 淡水鱼冷藏过程中电导率的变化第27页
            2.3.1.2 淡水鱼冷藏过程中pH值的变化第27-28页
            2.3.1.3 淡水鱼冷藏过程中TVB-N值的变化第28-29页
            2.3.1.4 淡水鱼冷藏过程中TAC值的变化第29页
            2.3.1.5 淡水鱼冷藏过程中感官评分的变化第29-30页
        2.3.2 淡水鱼菌群总DNA提取第30-32页
        2.3.3 淡水鱼样品高质量序列数目与长度分布第32页
        2.3.4 淡水鱼微生物物种操作分类单元第32-34页
        2.3.5 淡水鱼样品微生物物种稀释及丰度分布曲线第34-35页
            2.3.5.1 微生物物种稀释曲线第34-35页
            2.3.5.2 微生物物种丰度分布曲线第35页
        2.3.6 淡水鱼样品菌群Alpha多样性第35-36页
        2.3.7 淡水鱼样品菌群结构Beta多样性第36-37页
        2.3.8 淡水鱼样品菌群分类学组成第37-39页
        2.3.9 热点图分析第39-40页
    2.4 本章小结第40-41页
第三章 内蒙古地区淡水鱼中低温腐败菌的分离鉴定第41-53页
    3.1 材料、试剂与仪器第41-44页
        3.1.1 主要材料第41页
        3.1.2 主要试剂第41-42页
        3.1.3 主要仪器第42页
        3.1.4 试剂与培养基第42-44页
            3.1.4.1 培养基第42-43页
            3.1.4.2 生理生化实验试剂第43页
            3.1.4.3 分子鉴定实验相关试剂第43-44页
    3.2 实验方法第44-47页
        3.2.1 样品处理及细菌筛选第44页
        3.2.2 革兰氏染色第44页
        3.2.3 菌落形态观察第44页
        3.2.4 生理生化实验第44-45页
        3.2.5 细菌基因组DNA提取第45-46页
        3.2.6 16S rDNA扩增及测序鉴定第46-47页
    3.3 结果与分析第47-52页
        3.3.1 耐冷菌候选株菌落形态第47-48页
        3.3.2 生理生化实验结果第48-49页
        3.3.3 16S rDNA扩增及测序鉴定第49-50页
        3.3.4 16S rDNA测序鉴定结果第50-52页
    3.4 本章小结第52-53页
第四章 肥大细胞电化学传感器构建第53-66页
    4.1 材料、试剂与仪器第53-54页
        4.1.1 主要材料第53页
        4.1.2 主要试剂第53-54页
        4.1.3 主要仪器第54页
    4.2 实验方法第54-57页
        4.2.1 SPCE的修饰与表征第54页
            4.2.1.1 多壁碳纳米管(MWNTs)透射电镜观察第54页
            4.2.1.2 SPCE表面修饰第54页
            4.2.1.3 电极修饰的扫描电镜观察第54页
        4.2.2 氧化石墨烯(GO)制备第54-55页
        4.2.3 凝胶制备及GO浓度优化第55页
        4.2.4 凝胶扫描电镜观察第55页
        4.2.5 电极材料红外光谱检测第55-56页
        4.2.6 电极材料多晶体X射线衍射检测第56页
        4.2.7 肥大细胞的培养第56页
        4.2.8 细胞传感器构建第56-57页
            4.2.8.1 细胞固定第56-57页
            4.2.8.2 细胞传感器细胞浓度优化与电化学表征第57页
    4.3 结果分析第57-65页
        4.3.1 MWNTs表征第57-58页
        4.3.2 MWNTs修饰SPCE浓度优化第58-59页
        4.3.3 MWNTs修饰SPCE表征第59-60页
        4.3.4 GO的制备与表征第60页
        4.3.5 凝胶中GO浓度的优化第60-61页
        4.3.6 凝胶结构表征第61-63页
        4.3.7 细胞的固定第63-64页
        4.3.8 细胞传感器电化学表征第64-65页
    4.4 本章小结第65-66页
第五章 鱼汁模型中SSO腐败能力与AHLs研究第66-82页
    5.1 材料第66-67页
        5.1.1 主要试剂第66-67页
        5.1.2 主要仪器第67页
    5.2 实验方法第67-71页
        5.2.1 肥大细胞的培养第67页
        5.2.2 CCK-8检测细胞活力第67页
        5.2.3 Ca~(2+)探针检测细胞凋亡第67-68页
        5.2.4 细胞凋亡的流式细胞检测第68页
        5.2.5 细胞凋亡的TEM观察第68-69页
        5.2.6 细胞凋亡的SEM观察第69页
        5.2.7 传感器检测AHLs标准品第69页
        5.2.8 构建鱼汁腐败模型第69-70页
        5.2.9 鱼汁模拟腐败及指标测定第70页
            5.2.9.1 生长曲线测定第70页
            5.2.9.2 TVB-N测定第70页
            5.2.9.3 蛋白质含量测定第70页
            5.2.9.4 腐败菌腐败能力分析第70页
        5.2.10 鱼汁中AHLs提取与检测第70-71页
    5.3 结果与分析第71-81页
        5.3.1 CCK-8检测细胞活力第71页
        5.3.2 Ca~(2+)探针检测细胞凋亡第71-73页
        5.3.3 流式细胞术检测细胞凋亡第73-74页
        5.3.4 细胞凋亡透射电镜图第74-75页
        5.3.5 细胞凋亡扫描电镜图第75-76页
        5.3.6 传感器检测AHLs标准品第76-77页
        5.3.7 鱼汁模型常规指标测定第77-79页
        5.3.8 腐败菌AHLs评价及其对腐败能力影响第79-81页
    5.4 本章小结第81-82页
全文结论第82-84页
附录第84-86页
参考文献第86-93页
致谢第93-94页

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