| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第9-13页 |
| 1 文献综述与立题依据 | 第13-26页 |
| 1.1 立题依据 | 第13页 |
| 1.2 半胱氨酸蛋白酶抑制因子概述 | 第13-16页 |
| 1.2.1 Cystatins超家族的分类 | 第14-16页 |
| 1.3 Stefins的研究现状 | 第16-21页 |
| 1.3.1 Stefin B的结构特征 | 第17-18页 |
| 1.3.2 Stefin B的抑制机制 | 第18-19页 |
| 1.3.3 鱼类Stefins的研究现状 | 第19-21页 |
| 1.4 Stefins的生理活性及功能 | 第21-23页 |
| 1.4.1 Stefins在免疫调节方面的作用 | 第21页 |
| 1.4.2 Stefins与肿瘤的关系 | 第21-22页 |
| 1.4.3 Stefins与细胞凋亡的关系 | 第22-23页 |
| 1.5 Stefins在食品领域的应用前景 | 第23-25页 |
| 1.5.1 利用Stefins抑制鱼糜凝胶软化 | 第23-24页 |
| 1.5.2 Stefins在改善鱼肉品质中的作用 | 第24页 |
| 1.5.3 Stefins作为影响肉质的候选因子 | 第24-25页 |
| 1.5.4 Stefins的抑菌作用 | 第25页 |
| 1.6 研究目的意义及主要研究内容 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-45页 |
| 2.1 材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.1.3 主要实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2 方法 | 第29-45页 |
| 2.2.1 CPI抑制活性测定 | 第29-31页 |
| 2.2.2 蛋白浓度测定 | 第31页 |
| 2.2.3 鲢鱼卵CPIs粗提取条件的筛选 | 第31-32页 |
| 2.2.4 鲢鱼卵小分子CPIs浓缩粗提液的制备 | 第32-33页 |
| 2.2.5 鲢鱼卵小分子CPIs的层析及电洗脱纯化 | 第33-35页 |
| 2.2.6 鲢鱼卵小分子CPIs的电泳鉴定 | 第35-38页 |
| 2.2.7 反相高效液相法鉴定小分子CPIs纯度及疏水性 | 第38-39页 |
| 2.2.8 类Stefin-Ⅰ抑制活性类型鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2.9 鲢鱼卵类Stefin-Ⅰ热稳定性、pH稳定性及抑制常数Ki的测定 | 第40-41页 |
| 2.2.10 鲢鱼卵类Stefin-Ⅰ对冷藏鲢鱼肉片品质的影响 | 第41-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-63页 |
| 3.1 鲢鱼卵CPIs匀浆缓冲液条件的筛选 | 第45-46页 |
| 3.2 鲢鱼卵CPIs粗提取条件的筛选 | 第46-47页 |
| 3.3 鲢鱼卵小分子CPIs浓缩粗提液的制备 | 第47-48页 |
| 3.4 鲢鱼卵小分子CPIs的层析纯化 | 第48-50页 |
| 3.4.1 SP Sepharose Fast Flow阳离子交换层析 | 第48页 |
| 3.4.2 Octyl-Sepharose 4 Fast Flow疏水层析 | 第48-49页 |
| 3.4.3 Sephadex G-50葡聚糖凝胶层析 | 第49-50页 |
| 3.4.4 鲢鱼卵类Stefin-Ⅰ纯化表 | 第50页 |
| 3.4.5 电洗脱纯化 | 第50页 |
| 3.5 鲢鱼卵小分子CPIs的电泳鉴定 | 第50-54页 |
| 3.5.1 鲢鱼卵小分子CPIs粗提取过程的SDS-PAGE分析 | 第50-51页 |
| 3.5.2 鲢鱼卵小分子CPIs阳离子交换层析的SDS-PAGE分析 | 第51-52页 |
| 3.5.3 鲢鱼卵小分子CPIs疏水层析的Tricine-SDS-PAGE分析 | 第52-53页 |
| 3.5.4 类Stefin-Ⅰ及疏水层析峰Ⅲ抑制条带的电泳分析 | 第53-54页 |
| 3.6 类Stefin-Ⅰ和类Stefin-Ⅱ纯度和疏水性的RP-HPLC鉴定 | 第54-56页 |
| 3.6.1 鲢鱼卵类Stefin-Ⅰ的RP-HPLC鉴定 | 第54-55页 |
| 3.6.2 鲢鱼卵类Stefin-Ⅱ的RP-HPLC鉴定 | 第55-56页 |
| 3.7 鲢鱼卵类Stefin-Ⅰ生物学活性特征鉴定 | 第56-58页 |
| 3.7.1 鲢鱼卵类Stefin-Ⅰ抑制活性类型鉴定 | 第56页 |
| 3.7.2 鲢鱼卵小分子类Stefin-Ⅰ pH稳定性的测定 | 第56-57页 |
| 3.7.3 鲢鱼卵小分子类Stefin-Ⅰ热稳定性的测定 | 第57页 |
| 3.7.4 鲢鱼卵小分子类Stefin-Ⅰ的抑制常数Ki | 第57-58页 |
| 3.8 纯化类Stefin-Ⅰ对冷藏鲢鱼鱼肉片保鲜的影响 | 第58-63页 |
| 3.8.1 pH值的测定结果 | 第58-59页 |
| 3.8.2 TVB-N的测定结果 | 第59-60页 |
| 3.8.3 剪切力的测定结果 | 第60页 |
| 3.8.4 鲢鱼冷藏肉片的Cathepsin B和Cathepsin L活性结果 | 第60-61页 |
| 3.8.5 鲢鱼冷藏肉片的电镜结果 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-68页 |
| 4.1 关于鲢鱼卵粗提条件筛选的讨论 | 第63页 |
| 4.2 关于鲢鱼卵小分子Stefin的纯化及性质鉴定 | 第63-65页 |
| 4.3 关于鲢鱼类Stefin-Ⅰ影响冷藏鱼肉片品质的讨论 | 第65-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第80页 |
