| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-22页 |
| ·蛋白质组学研究历史和背景 | 第8-10页 |
| ·磷酸化蛋白质组学概述 | 第8页 |
| ·蛋白质组学特点与难点 | 第8-10页 |
| ·磷酸化蛋白鉴定 | 第10-11页 |
| ·生物体内蛋白质磷酸化修饰及其功能 | 第10页 |
| ·磷酸化蛋白质富集与分离 | 第10-11页 |
| ·磷酸化肽富集和分离 | 第11-16页 |
| ·化学修饰法 | 第12-14页 |
| ·液相色谱法 | 第14页 |
| ·固相金属亲和色谱 | 第14-15页 |
| ·金属氧化物亲和色谱 | 第15-16页 |
| ·磷酸肽识别 | 第16-19页 |
| ·MALDI-TOF-MS结合磷酸酶水解分析法 | 第16-17页 |
| ·PSD-MALDI-MS | 第17页 |
| ·MALDI-TOF的其他分析方法 | 第17-18页 |
| ·中性丢失扫描 | 第18-19页 |
| ·母离子扫描 | 第19页 |
| ·磷酸化位点确定 | 第19-20页 |
| ·蛋白质磷酸化的定量分析 | 第20-21页 |
| ·本论文研究意义与主要内容 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-27页 |
| ·实验材料和仪器 | 第22-24页 |
| ·实验试剂及材料 | 第22页 |
| ·实验仪器及设备 | 第22-23页 |
| ·材料的处理 | 第23页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| ·磷酸化肽的液相色谱-质谱联用条件 | 第24页 |
| ·3-氨丙基固定相硅胶的合成 | 第24页 |
| ·0.5G PAMAM-SiO_2的合成 | 第24页 |
| ·1.0G PAMAM-SiO_2的合成 | 第24-25页 |
| ·不同pH值条件下PAMAM-SiO_2对Ti~(4+)的吸附性能的测定 | 第25页 |
| ·不同时间下PAMAM-SiO_2对Ti~(4+)的吸附 | 第25页 |
| ·不同温度下PAMAM-SiO_2对Ti~(4+)吸附测定 | 第25页 |
| ·蛋白溶液酶解 | 第25-26页 |
| ·磷酸化肽富集和分离 | 第26页 |
| ·数据库检索 | 第26-27页 |
| 3 结果与讨论 | 第27-46页 |
| ·树枝状聚合物PAMAM-SiO_2材料的表征 | 第27页 |
| ·材料的验证 | 第27-29页 |
| ·PAMAM-SiO_2表面氨基含量测定 | 第27-28页 |
| ·pH值对Ti~(4+)的吸附性能的影响 | 第28页 |
| ·不同温度下PAMAM-SiO_2对Ti~(4+)的吸附 | 第28-29页 |
| ·不同时间下PAMAM-SiO_2对Ti~(4+)的吸附 | 第29页 |
| ·实验分析目标物的选择 | 第29-31页 |
| ·Ti~(4+)-PAMAM-SiO_2树枝状聚合物材料的富集效果 | 第31-32页 |
| ·富集条件的优化 | 第32-43页 |
| ·乙腈对富集磷酸肽效果的影响 | 第32-34页 |
| ·不同酸的种类对富集磷酸肽效果的影响 | 第34-36页 |
| ·Ti~(4+)-树枝状聚合物富集磷酸肽的检测限 | 第36-37页 |
| ·磷酸化肽段富集后材料清洗次数的影响 | 第37-38页 |
| ·洗脱溶液的选择 | 第38-40页 |
| ·Ti~(4+)-PAMAM-SiO_2树枝状聚合物材料富集磷酸肽的重现性 | 第40-41页 |
| ·Ti~(4+)-PAMAM-SiO_2树枝状聚合物材料富集磷酸肽的选择性 | 第41-43页 |
| ·液相色谱条件优化 | 第43-46页 |
| ·流动相优化 | 第43页 |
| ·梯度洗脱条件的确定 | 第43-44页 |
| ·Ti~(4+)-PAMAM-SiO_2树状聚合物富集牛奶中的磷酸化肽 | 第44-46页 |
| 4 结论 | 第46-47页 |
| 5 展望 | 第47-48页 |
| 6 参考文献 | 第48-56页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第56-57页 |
| 8 致谢 | 第57页 |
