摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第一章 前言 | 第11-26页 |
·益生菌概述 | 第11-13页 |
·益生菌概念 | 第11页 |
·适用于益生菌制品的菌株 | 第11-12页 |
·益生菌的保健功能 | 第12-13页 |
·益生菌的应用及发展趋势 | 第13-15页 |
·益生菌的应用 | 第13-14页 |
·益生菌工业开发存在的问题 | 第14-15页 |
·乳酸杆菌 | 第15-18页 |
·乳酸杆菌简介 | 第15-16页 |
·植物乳杆菌 | 第16-18页 |
·乳杆菌的应激研究 | 第18-21页 |
·热应激(Heat Stress Response) | 第18-20页 |
·酸应激(Acid Stress Response) | 第20-21页 |
·盐应激(Osmotc Stress Response) | 第21页 |
·逆转录荧光定量PCR(Real-time Reverse Transcription PCR) | 第21-26页 |
·实时荧光定量PCR 技术原理 | 第21-22页 |
·SYBR Green 法 | 第22-23页 |
·实时荧光定量PCR 的影响因素 | 第23-24页 |
·逆转录实时荧光定量PCR 应用 | 第24-26页 |
第二章 课题研究意义及实验方案 | 第26-28页 |
·课题研究意义 | 第26页 |
·实验方案 | 第26-28页 |
第三章 热应激方法的的建立 | 第28-36页 |
·仪器、材料与试剂 | 第28-29页 |
·实验仪器 | 第28页 |
·主要药品和试剂 | 第28-29页 |
·实验菌株 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-31页 |
·菌种保藏和复苏 | 第29页 |
·菌株纯化鉴定 | 第29-30页 |
·生长曲线绘制 | 第30页 |
·热适应条件和致死评价条件摸索 | 第30页 |
·两株植物乳杆菌平台期菌液热应激性能比较 | 第30-31页 |
·结果与讨论 | 第31-35页 |
·菌落形态观察和革兰氏染色 | 第31-32页 |
·生长曲线 | 第32页 |
·热适应温度与致死评价温度的选择 | 第32-35页 |
·植物乳杆菌Lp529 与LP-Onlly 平台期菌液耐热性比较 | 第35页 |
·小结 | 第35-36页 |
第四章 植物乳杆菌LP-Onlly 热应激研究 | 第36-47页 |
·仪器、材料与试剂 | 第36-37页 |
·实验仪器 | 第36页 |
·主要药品和试剂 | 第36页 |
·实验菌株 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-39页 |
·植物乳杆菌LP-Onlly 生长曲线测定 | 第37页 |
·不同生长时期的热适应及耐热性研究 | 第37页 |
·种子、对数中期、平台期热应激传代性研究 | 第37-38页 |
·在不同pH 条件下热适应后评价 | 第38-39页 |
·长期保存稳定性评价 | 第39页 |
·结果与讨论 | 第39-46页 |
·植物乳杆菌LP-Onlly 生长曲线 | 第39-40页 |
·植物乳杆菌LP-Onlly 对数中期和平台期的热应激性比较 | 第40-42页 |
·植物乳杆菌LP-Onlly 热应激的传代性 | 第42-43页 |
·pH 对植物乳杆菌LP-Onlly 热应激性能的影响 | 第43-45页 |
·热应激对长期保存稳定性的影响 | 第45-46页 |
·小结 | 第46-47页 |
第五章 HSPs 基因的鉴定 | 第47-55页 |
·仪器、材料与试剂 | 第47-49页 |
·实验仪器 | 第47页 |
·主要药品和试剂 | 第47-49页 |
·实验方法 | 第49-53页 |
·基因组DNA 提取及纯化 | 第49页 |
·潜在HSPs 基因片段的扩增 | 第49-50页 |
·凝胶电泳 | 第50-51页 |
·HSPs 基因片段克隆 | 第51页 |
·克隆子的筛选 | 第51-53页 |
·测序及序列分析 | 第53页 |
·结果与讨论 | 第53-54页 |
·HSPs 基因PCR 结果 | 第53页 |
·HSPs 基因阳性克隆检验 | 第53-54页 |
·植物乳杆菌Lp529 和LP-Onlly HSPs 基因同源性分析 | 第54页 |
·小结 | 第54-55页 |
第六章 热应激过程中HSPs 基因表达调控研究 | 第55-66页 |
·仪器、材料与试剂 | 第55-56页 |
·实验仪器 | 第55页 |
·主要药品和试剂 | 第55-56页 |
·实验方法 | 第56-59页 |
·RNA 提取及纯化 | 第56-57页 |
·RNA 逆转录 | 第57-58页 |
·Real-time RT-PCR 引物设计及条件优化 | 第58-59页 |
·Real-time RT-PCR 相对定量热应激过程中HSPs 基因的表达变化 | 第59页 |
·结果与讨论 | 第59-65页 |
·RNA 提取与纯化 | 第59页 |
·Real-time RT-PCR 程序 | 第59-60页 |
·引物设计 | 第60页 |
·Real-time RT-PCR 条件优化 | 第60-62页 |
·植物乳杆菌LP-Onlly 热应激HSPs 基因表达量变化 | 第62-65页 |
·小结 | 第65-66页 |
第七章 结论和创新点 | 第66-68页 |
·结论 | 第66-67页 |
·创新点 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-72页 |
致谢 | 第72-73页 |
附录 HSPs 基因测序结果 | 第73-75页 |
攻读学位期间发表或投稿的学术论文 | 第75页 |