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植物乳杆菌热应激研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 前言第11-26页
   ·益生菌概述第11-13页
     ·益生菌概念第11页
     ·适用于益生菌制品的菌株第11-12页
     ·益生菌的保健功能第12-13页
   ·益生菌的应用及发展趋势第13-15页
     ·益生菌的应用第13-14页
     ·益生菌工业开发存在的问题第14-15页
   ·乳酸杆菌第15-18页
     ·乳酸杆菌简介第15-16页
     ·植物乳杆菌第16-18页
   ·乳杆菌的应激研究第18-21页
     ·热应激(Heat Stress Response)第18-20页
     ·酸应激(Acid Stress Response)第20-21页
     ·盐应激(Osmotc Stress Response)第21页
   ·逆转录荧光定量PCR(Real-time Reverse Transcription PCR)第21-26页
     ·实时荧光定量PCR 技术原理第21-22页
     ·SYBR Green 法第22-23页
     ·实时荧光定量PCR 的影响因素第23-24页
     ·逆转录实时荧光定量PCR 应用第24-26页
第二章 课题研究意义及实验方案第26-28页
   ·课题研究意义第26页
   ·实验方案第26-28页
第三章 热应激方法的的建立第28-36页
   ·仪器、材料与试剂第28-29页
     ·实验仪器第28页
     ·主要药品和试剂第28-29页
     ·实验菌株第29页
   ·实验方法第29-31页
     ·菌种保藏和复苏第29页
     ·菌株纯化鉴定第29-30页
     ·生长曲线绘制第30页
     ·热适应条件和致死评价条件摸索第30页
     ·两株植物乳杆菌平台期菌液热应激性能比较第30-31页
   ·结果与讨论第31-35页
     ·菌落形态观察和革兰氏染色第31-32页
     ·生长曲线第32页
     ·热适应温度与致死评价温度的选择第32-35页
     ·植物乳杆菌Lp529 与LP-Onlly 平台期菌液耐热性比较第35页
   ·小结第35-36页
第四章 植物乳杆菌LP-Onlly 热应激研究第36-47页
   ·仪器、材料与试剂第36-37页
     ·实验仪器第36页
     ·主要药品和试剂第36页
     ·实验菌株第36-37页
   ·实验方法第37-39页
     ·植物乳杆菌LP-Onlly 生长曲线测定第37页
     ·不同生长时期的热适应及耐热性研究第37页
     ·种子、对数中期、平台期热应激传代性研究第37-38页
     ·在不同pH 条件下热适应后评价第38-39页
     ·长期保存稳定性评价第39页
   ·结果与讨论第39-46页
     ·植物乳杆菌LP-Onlly 生长曲线第39-40页
     ·植物乳杆菌LP-Onlly 对数中期和平台期的热应激性比较第40-42页
     ·植物乳杆菌LP-Onlly 热应激的传代性第42-43页
     ·pH 对植物乳杆菌LP-Onlly 热应激性能的影响第43-45页
     ·热应激对长期保存稳定性的影响第45-46页
   ·小结第46-47页
第五章 HSPs 基因的鉴定第47-55页
   ·仪器、材料与试剂第47-49页
     ·实验仪器第47页
     ·主要药品和试剂第47-49页
   ·实验方法第49-53页
     ·基因组DNA 提取及纯化第49页
     ·潜在HSPs 基因片段的扩增第49-50页
     ·凝胶电泳第50-51页
     ·HSPs 基因片段克隆第51页
     ·克隆子的筛选第51-53页
     ·测序及序列分析第53页
   ·结果与讨论第53-54页
     ·HSPs 基因PCR 结果第53页
     ·HSPs 基因阳性克隆检验第53-54页
     ·植物乳杆菌Lp529 和LP-Onlly HSPs 基因同源性分析第54页
   ·小结第54-55页
第六章 热应激过程中HSPs 基因表达调控研究第55-66页
   ·仪器、材料与试剂第55-56页
     ·实验仪器第55页
     ·主要药品和试剂第55-56页
   ·实验方法第56-59页
     ·RNA 提取及纯化第56-57页
     ·RNA 逆转录第57-58页
     ·Real-time RT-PCR 引物设计及条件优化第58-59页
     ·Real-time RT-PCR 相对定量热应激过程中HSPs 基因的表达变化第59页
   ·结果与讨论第59-65页
     ·RNA 提取与纯化第59页
     ·Real-time RT-PCR 程序第59-60页
     ·引物设计第60页
     ·Real-time RT-PCR 条件优化第60-62页
     ·植物乳杆菌LP-Onlly 热应激HSPs 基因表达量变化第62-65页
   ·小结第65-66页
第七章 结论和创新点第66-68页
   ·结论第66-67页
   ·创新点第67-68页
参考文献第68-72页
致谢第72-73页
附录 HSPs 基因测序结果第73-75页
攻读学位期间发表或投稿的学术论文第75页

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