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青钱柳多糖的分子修饰及其生物活性研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略语表第14-16页
第1章 绪论第16-35页
    1.1 青钱柳多糖研究概述第16-20页
        1.1.1 青钱柳多糖提取、分离及其相关理化特性第16-17页
        1.1.2 青钱柳多糖生物活性第17-20页
    1.2 多糖的化学修饰第20-26页
        1.2.1 硫酸化修饰第21-24页
        1.2.2 乙酰化修饰第24页
        1.2.3 羧甲基化修饰第24-26页
        1.2.4 其他方法第26页
    1.3 多糖的结构分析第26-28页
        1.3.1 红外光谱分析第26-27页
        1.3.2 紫外扫描分析第27页
        1.3.3 NMR 分析第27-28页
        1.3.4 AFM 技术第28页
    1.4 化学修饰对多糖生物活性的影响第28-32页
        1.4.1 硫酸化分子修饰与多糖生物活性第28-30页
        1.4.2 乙酰化修饰与多糖的生物活性第30-31页
        1.4.3 羧甲基化分子修饰与多糖的生物活性第31-32页
    1.5 本文研究的目的意义、主要内容和创新之处第32-35页
        1.5.1 本研究目的意义第32-33页
        1.5.2 主要研究内容第33页
        1.5.3 主要创新之处第33-35页
第2章 青钱柳多糖的提取精制、含量及元素分析第35-50页
    2.1 引言第35页
    2.2 实验材料与仪器第35-36页
        2.2.1 实验材料与试剂第35-36页
        2.2.2 实验仪器与设备第36页
    2.3 实验方法第36-38页
        2.3.1 青钱柳粗多糖的提取与精制第36-37页
        2.3.2 青钱柳粗多糖的含量分析第37-38页
        2.3.3 青钱柳粗多糖的无机元素含量分析第38页
    2.4 结果与讨论第38-48页
        2.4.1 青钱柳多糖的提取与精制第38-39页
        2.4.2 多糖含量测定条件的优化第39-42页
        2.4.3 样品多糖含量分析第42-45页
        2.4.4 样品多糖元素分析第45-48页
    本章小结第48-50页
第3章 青钱柳硫酸化多糖的制备、理化性质及结构分析第50-69页
    3.1 引言第50页
    3.2 实验材料与仪器第50-51页
        3.2.1 实验材料与试剂第50-51页
        3.2.2 实验仪器与设备第51页
    3.3 实验方法第51-56页
        3.3.1 硫酸酯化多糖的制备第51-52页
        3.3.2 硫酸化青钱柳多糖取代度(degree of substitution,DS)的测定第52页
        3.3.3 多糖的基本理化性质分析第52-54页
        3.3.4 分子量的测定第54页
        3.3.5 单糖组成分析第54-55页
        3.3.6 紫外扫描分析第55页
        3.3.7 红外光谱分析第55页
        3.3.8 圆二色谱分析第55页
        3.3.9 数据处理第55-56页
    3.4 结果与讨论第56-67页
        3.4.1 青钱柳硫酸化多糖的制备第56页
        3.4.2 取代度第56-57页
        3.4.3 基本理化性质分析第57-60页
        3.4.4 多糖的分子量的测定第60页
        3.4.5 单糖组成第60-65页
        3.4.6 紫外扫描分析第65页
        3.4.7 红外光谱分析第65-67页
        3.4.8 圆二色谱分析第67页
    3.5 本章小结第67-69页
第4章 青钱柳乙酰化和羧甲基化多糖的制备、理化性质及结构分析第69-88页
    4.1 引言第69-70页
    4.2 实验材料与仪器第70页
        4.2.1 实验材料与试剂第70页
        4.2.2 实验仪器与设备第70页
    4.3 实验方法第70-73页
        4.3.1 乙酰化多糖的制备及取代度测定第70-71页
        4.3.2 羧甲基化多糖的制备及取代度测定第71-72页
        4.3.3 多糖的基本理化性质分析第72页
        4.3.4 分子量的测定第72页
        4.3.5 单糖组成分析第72页
        4.3.6 紫外扫描分析第72页
        4.3.7 红外光谱分析第72-73页
        4.3.8 圆二色谱分析第73页
        4.3.9 数据处理第73页
    4.4 结果与讨论第73-87页
        4.4.1 青钱柳乙酰化多糖的制备、理化性质及结构分析第73-80页
        4.4.2 青钱柳羧甲基化多糖的制备、理化性质及结构分析第80-87页
    4.5 本章小结第87-88页
第5章 青钱柳修饰多糖的抗氧化活性第88-107页
    5.1 引言第88-89页
    5.2 实验材料与仪器第89-90页
        5.2.1 实验材料与试剂第89页
        5.2.2 实验仪器与设备第89-90页
    5.3 实验方法第90-92页
        5.3.1 青钱柳多糖各组分的制备第90页
        5.3.2 DPPH·的清除能力第90页
        5.3.3 超氧阴离子自由基的清除实验第90-91页
        5.3.4 ·OH自由基的清除实验第91页
        5.3.5 胡萝卜素/亚油酸体系第91-92页
        5.3.6 铁离子还原能力的检测第92页
    5.4 结果与讨论第92-105页
        5.4.1 青钱柳硫酸化多糖的抗氧化活性第92-97页
        5.4.2 青钱柳乙酰化多糖的抗氧化活性第97-101页
        5.4.3 青钱柳羧甲基化多糖的抗氧化能力第101-104页
        5.4.4 青钱柳多糖分子修饰与其抗氧化活性第104-105页
    5.5 本章小结第105-107页
第6章 青钱柳各分子修饰多糖对 RAW264.7 小鼠巨噬细胞免疫调节作用第107-131页
    6.1 引言第107-108页
    6.2 实验材料与仪器第108-109页
        6.2.1 实验材料与试剂第108页
        6.2.2 实验仪器与设备第108-109页
    6.3 实验方法第109-115页
        6.3.1 细胞日常培养第109-110页
        6.3.2 凝胶法鲎试剂检测青钱柳多糖及各修饰多糖组分内毒素第110页
        6.3.3 细胞计数试剂盒(Cell counting kit-8, CCK8)检测细胞增殖效应第110-111页
        6.3.4 中性红法检测青钱柳多糖及各修饰多糖组分的吞噬效应第111-112页
        6.3.5 多糖对 RAW264.7 细胞释放一氧化氮(NO)的影响第112页
        6.3.6 多糖对小鼠巨噬细胞分泌细胞因子的影响第112页
        6.3.7 PCR 检测细胞表达 iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA第112-115页
        6.3.8 多糖对 HeLa 细胞活力及基因表达的影响第115页
        6.3.9 数据处理第115页
    6.4 结果与讨论第115-129页
        6.4.1 凝胶法鲎试剂检测青钱柳多糖及其修饰后多糖中内毒素第115-116页
        6.4.2 青钱柳多糖及其修饰后多糖对 RAW264.7 细胞的增殖效应第116-119页
        6.4.3 中性红法检测青钱柳多糖及其修饰后多糖对 RAW264.7 细胞的吞噬效应第119-120页
        6.4.4 多糖对 RAW264.7 细胞释放 NO 的影响第120-122页
        6.4.5 ELISA 法检测细胞分泌 TNF-α,IL-1β,IL-6第122-126页
        6.4.6 RAW264.7 细胞 TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOSmRNA 的表达量检测第126-127页
        6.4.7 多糖对 HeLa 细胞活力的影响第127-129页
    6.5 本章小结第129-131页
第7章 结论与展望第131-134页
    7.1 本研究主要结论第131-132页
    7.2 进一步的研究方向第132-134页
致谢第134-135页
参考文献第135-151页
攻读学位期间的研究成果第151页

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