摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略语表 | 第14-16页 |
第1章 绪论 | 第16-35页 |
1.1 青钱柳多糖研究概述 | 第16-20页 |
1.1.1 青钱柳多糖提取、分离及其相关理化特性 | 第16-17页 |
1.1.2 青钱柳多糖生物活性 | 第17-20页 |
1.2 多糖的化学修饰 | 第20-26页 |
1.2.1 硫酸化修饰 | 第21-24页 |
1.2.2 乙酰化修饰 | 第24页 |
1.2.3 羧甲基化修饰 | 第24-26页 |
1.2.4 其他方法 | 第26页 |
1.3 多糖的结构分析 | 第26-28页 |
1.3.1 红外光谱分析 | 第26-27页 |
1.3.2 紫外扫描分析 | 第27页 |
1.3.3 NMR 分析 | 第27-28页 |
1.3.4 AFM 技术 | 第28页 |
1.4 化学修饰对多糖生物活性的影响 | 第28-32页 |
1.4.1 硫酸化分子修饰与多糖生物活性 | 第28-30页 |
1.4.2 乙酰化修饰与多糖的生物活性 | 第30-31页 |
1.4.3 羧甲基化分子修饰与多糖的生物活性 | 第31-32页 |
1.5 本文研究的目的意义、主要内容和创新之处 | 第32-35页 |
1.5.1 本研究目的意义 | 第32-33页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第33页 |
1.5.3 主要创新之处 | 第33-35页 |
第2章 青钱柳多糖的提取精制、含量及元素分析 | 第35-50页 |
2.1 引言 | 第35页 |
2.2 实验材料与仪器 | 第35-36页 |
2.2.1 实验材料与试剂 | 第35-36页 |
2.2.2 实验仪器与设备 | 第36页 |
2.3 实验方法 | 第36-38页 |
2.3.1 青钱柳粗多糖的提取与精制 | 第36-37页 |
2.3.2 青钱柳粗多糖的含量分析 | 第37-38页 |
2.3.3 青钱柳粗多糖的无机元素含量分析 | 第38页 |
2.4 结果与讨论 | 第38-48页 |
2.4.1 青钱柳多糖的提取与精制 | 第38-39页 |
2.4.2 多糖含量测定条件的优化 | 第39-42页 |
2.4.3 样品多糖含量分析 | 第42-45页 |
2.4.4 样品多糖元素分析 | 第45-48页 |
本章小结 | 第48-50页 |
第3章 青钱柳硫酸化多糖的制备、理化性质及结构分析 | 第50-69页 |
3.1 引言 | 第50页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第50-51页 |
3.2.1 实验材料与试剂 | 第50-51页 |
3.2.2 实验仪器与设备 | 第51页 |
3.3 实验方法 | 第51-56页 |
3.3.1 硫酸酯化多糖的制备 | 第51-52页 |
3.3.2 硫酸化青钱柳多糖取代度(degree of substitution,DS)的测定 | 第52页 |
3.3.3 多糖的基本理化性质分析 | 第52-54页 |
3.3.4 分子量的测定 | 第54页 |
3.3.5 单糖组成分析 | 第54-55页 |
3.3.6 紫外扫描分析 | 第55页 |
3.3.7 红外光谱分析 | 第55页 |
3.3.8 圆二色谱分析 | 第55页 |
3.3.9 数据处理 | 第55-56页 |
3.4 结果与讨论 | 第56-67页 |
3.4.1 青钱柳硫酸化多糖的制备 | 第56页 |
3.4.2 取代度 | 第56-57页 |
3.4.3 基本理化性质分析 | 第57-60页 |
3.4.4 多糖的分子量的测定 | 第60页 |
3.4.5 单糖组成 | 第60-65页 |
3.4.6 紫外扫描分析 | 第65页 |
3.4.7 红外光谱分析 | 第65-67页 |
3.4.8 圆二色谱分析 | 第67页 |
3.5 本章小结 | 第67-69页 |
第4章 青钱柳乙酰化和羧甲基化多糖的制备、理化性质及结构分析 | 第69-88页 |
4.1 引言 | 第69-70页 |
4.2 实验材料与仪器 | 第70页 |
4.2.1 实验材料与试剂 | 第70页 |
4.2.2 实验仪器与设备 | 第70页 |
4.3 实验方法 | 第70-73页 |
4.3.1 乙酰化多糖的制备及取代度测定 | 第70-71页 |
4.3.2 羧甲基化多糖的制备及取代度测定 | 第71-72页 |
4.3.3 多糖的基本理化性质分析 | 第72页 |
4.3.4 分子量的测定 | 第72页 |
4.3.5 单糖组成分析 | 第72页 |
4.3.6 紫外扫描分析 | 第72页 |
4.3.7 红外光谱分析 | 第72-73页 |
4.3.8 圆二色谱分析 | 第73页 |
4.3.9 数据处理 | 第73页 |
4.4 结果与讨论 | 第73-87页 |
4.4.1 青钱柳乙酰化多糖的制备、理化性质及结构分析 | 第73-80页 |
4.4.2 青钱柳羧甲基化多糖的制备、理化性质及结构分析 | 第80-87页 |
4.5 本章小结 | 第87-88页 |
第5章 青钱柳修饰多糖的抗氧化活性 | 第88-107页 |
5.1 引言 | 第88-89页 |
5.2 实验材料与仪器 | 第89-90页 |
5.2.1 实验材料与试剂 | 第89页 |
5.2.2 实验仪器与设备 | 第89-90页 |
5.3 实验方法 | 第90-92页 |
5.3.1 青钱柳多糖各组分的制备 | 第90页 |
5.3.2 DPPH·的清除能力 | 第90页 |
5.3.3 超氧阴离子自由基的清除实验 | 第90-91页 |
5.3.4 ·OH自由基的清除实验 | 第91页 |
5.3.5 胡萝卜素/亚油酸体系 | 第91-92页 |
5.3.6 铁离子还原能力的检测 | 第92页 |
5.4 结果与讨论 | 第92-105页 |
5.4.1 青钱柳硫酸化多糖的抗氧化活性 | 第92-97页 |
5.4.2 青钱柳乙酰化多糖的抗氧化活性 | 第97-101页 |
5.4.3 青钱柳羧甲基化多糖的抗氧化能力 | 第101-104页 |
5.4.4 青钱柳多糖分子修饰与其抗氧化活性 | 第104-105页 |
5.5 本章小结 | 第105-107页 |
第6章 青钱柳各分子修饰多糖对 RAW264.7 小鼠巨噬细胞免疫调节作用 | 第107-131页 |
6.1 引言 | 第107-108页 |
6.2 实验材料与仪器 | 第108-109页 |
6.2.1 实验材料与试剂 | 第108页 |
6.2.2 实验仪器与设备 | 第108-109页 |
6.3 实验方法 | 第109-115页 |
6.3.1 细胞日常培养 | 第109-110页 |
6.3.2 凝胶法鲎试剂检测青钱柳多糖及各修饰多糖组分内毒素 | 第110页 |
6.3.3 细胞计数试剂盒(Cell counting kit-8, CCK8)检测细胞增殖效应 | 第110-111页 |
6.3.4 中性红法检测青钱柳多糖及各修饰多糖组分的吞噬效应 | 第111-112页 |
6.3.5 多糖对 RAW264.7 细胞释放一氧化氮(NO)的影响 | 第112页 |
6.3.6 多糖对小鼠巨噬细胞分泌细胞因子的影响 | 第112页 |
6.3.7 PCR 检测细胞表达 iNOS、TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA | 第112-115页 |
6.3.8 多糖对 HeLa 细胞活力及基因表达的影响 | 第115页 |
6.3.9 数据处理 | 第115页 |
6.4 结果与讨论 | 第115-129页 |
6.4.1 凝胶法鲎试剂检测青钱柳多糖及其修饰后多糖中内毒素 | 第115-116页 |
6.4.2 青钱柳多糖及其修饰后多糖对 RAW264.7 细胞的增殖效应 | 第116-119页 |
6.4.3 中性红法检测青钱柳多糖及其修饰后多糖对 RAW264.7 细胞的吞噬效应 | 第119-120页 |
6.4.4 多糖对 RAW264.7 细胞释放 NO 的影响 | 第120-122页 |
6.4.5 ELISA 法检测细胞分泌 TNF-α,IL-1β,IL-6 | 第122-126页 |
6.4.6 RAW264.7 细胞 TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOSmRNA 的表达量检测 | 第126-127页 |
6.4.7 多糖对 HeLa 细胞活力的影响 | 第127-129页 |
6.5 本章小结 | 第129-131页 |
第7章 结论与展望 | 第131-134页 |
7.1 本研究主要结论 | 第131-132页 |
7.2 进一步的研究方向 | 第132-134页 |
致谢 | 第134-135页 |
参考文献 | 第135-151页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第151页 |