摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 绪论 | 第11-21页 |
1.1 西藏牦牛乳和曲拉 | 第11-12页 |
1.2 酵母菌及其鉴定方法 | 第12-16页 |
1.2.1 酵母菌概述 | 第12-13页 |
1.2.2 酵母菌的鉴定方法 | 第13-16页 |
1.2.2.1 传统方法 | 第13-14页 |
1.2.2.2 快速鉴定系统 | 第14页 |
1.2.2.3 分子生物学鉴定技术 | 第14-16页 |
1.2.2.3.1 核糖体DNA大亚基26S D1/D2序列分析 | 第14-15页 |
1.2.2.3.2 RFLP分析 | 第15页 |
1.2.2.3.3 随机扩增多态性分析RAPD | 第15页 |
1.2.2.3.4 AFLP技术 | 第15-16页 |
1.3 乳制品中的酵母菌及其对乳制品特性的影响 | 第16-19页 |
1.3.1 乳制品中常见的酵母菌 | 第16-17页 |
1.3.2 酵母菌对乳制品特性的影响 | 第17-19页 |
1.3.2.1 发酵乳制品中的酵母菌的作用 | 第17页 |
1.3.2.2 增强乳制品的风味 | 第17-18页 |
1.3.2.3 对杂菌的抑制 | 第18页 |
1.3.2.4 益生功能 | 第18-19页 |
1.4 课题研究的目的和意义 | 第19页 |
1.5 技术路线 | 第19-21页 |
第二章 实验材料与方法 | 第21-36页 |
2.1 主要材料与试剂 | 第21-27页 |
2.1.1 实验菌株 | 第21页 |
2.1.2 实验样品 | 第21页 |
2.1.3 培养基 | 第21-23页 |
2.1.3.1 马铃薯葡萄糖琼脂培养基 | 第21页 |
2.1.3.2 马铃薯葡萄肉汤培养基 | 第21页 |
3.1.3.3 YPD培养基 | 第21-22页 |
2.1.3.4 酵母菌分类学基础培养基 | 第22页 |
3.1.3.5 子囊孢子琼脂培养基 | 第22-23页 |
2.1.3.6 糖发酵基础培养基 | 第23页 |
2.1.3.7 尿素分解琼脂培养基 | 第23页 |
2.1.3.8 放线菌酮抗性培养基 | 第23页 |
2.1.3.9 MRS培养基 | 第23页 |
2.1.4 试剂 | 第23-24页 |
2.1.5 酵母菌DNA提取试剂 | 第24-25页 |
2.1.6 SDS-PAGE凝胶电泳试剂 | 第25页 |
2.1.7 邻苯二甲醛试剂 | 第25-26页 |
2.1.8 主要仪器设备 | 第26页 |
2.1.9 实验中使用的引物 | 第26-27页 |
2.2 方法 | 第27-36页 |
2.2.1 曲拉样品的采集 | 第27页 |
2.2.2 曲拉样品中酵母菌的计数和分离 | 第27页 |
2.2.3 微生物活菌数测定方法 | 第27页 |
2.2.4 酵母菌生理生化鉴定 | 第27-29页 |
2.2.4.1 细胞形态学观察 | 第28页 |
2.2.4.2 子囊孢子观察 | 第28页 |
2.2.4.3 假菌丝观察 | 第28页 |
2.2.4.4 糖发酵试验 | 第28页 |
2.2.4.5 酵母菌的尿素水解 | 第28页 |
2.2.4.6 碳源同化试验 | 第28-29页 |
2.2.4.7 氮源同化试验 | 第29页 |
2.2.4.8 酵母菌的维生素生长需要实验 | 第29页 |
2.2.4.9 酵母菌的放线菌酮抗性实验 | 第29页 |
2.2.4.10 4 DBB显色反应 | 第29页 |
2.2.5 API 20C AUX试剂盒鉴定 | 第29-30页 |
2.2.6 分子生物学鉴定 | 第30-31页 |
2.2.6.1 酵母菌分离株DNA提取方法 | 第30页 |
2.2.6.2 酵母菌大亚基D1/D2的扩增、检测及测序 | 第30-31页 |
2.2.6.3 扩增条件 | 第31页 |
2.2.6.4 酵母菌同源性分析与系统发育树的构建 | 第31页 |
2.2.7 酵母菌对发酵乳特性的影响 | 第31-36页 |
2.2.7.1 酵母菌生长曲线 | 第31页 |
2.2.7.2 pH的测定 | 第31页 |
2.2.7.3 酵母菌与乳酸菌生长的相互作用 | 第31-32页 |
2.2.7.4 发酵乳的制作 | 第32页 |
2.2.7.5 质构测定 | 第32页 |
2.2.7.6 酵母菌对发酵乳蛋白的影响 | 第32-34页 |
2.2.7.6.1 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第32-33页 |
2.2.7.6.2 氨基氮含量的测定 | 第33页 |
2.2.7.6.3 反相色谱法检测pH4.6可溶部分多肽的变化 | 第33页 |
2.2.7.6.4 游离氨基酸含量的测定 | 第33-34页 |
2.2.7.7 数据处理与分析 | 第34-36页 |
第三章 酵母菌的分离、计数及其鉴定结果 | 第36-49页 |
3.1 曲拉中酵母菌的计数和分离 | 第36-37页 |
3.2 酵母菌菌落形态及细胞形态的观察结果 | 第37页 |
3.3 生理生化鉴定 | 第37-41页 |
3.4 API 20C AUX鉴定结果 | 第41-43页 |
3.5 酵母菌分子生物学鉴定结果 | 第43-46页 |
3.6 样品中优势菌种分析 | 第46页 |
3.7 西藏曲拉中酵母菌多样性分析 | 第46-47页 |
3.8 本章结论 | 第47-49页 |
第四章 酵母菌对发酵乳特性的影响 | 第49-59页 |
4.1 酵母菌生长曲线 | 第49-50页 |
4.2 酵母菌发酵脱脂奶后pH的变化 | 第50-51页 |
4.3 发酵过程中pH的变化 | 第51-52页 |
4.4 酵母菌和乳酸菌的相互作用 | 第52-54页 |
4.5 酵母菌对发酵乳质构的影响 | 第54-55页 |
4.6 酵母对发酵乳蛋白的影响 | 第55-58页 |
4.6.1 酪蛋白和乳清蛋白水解的变化 | 第55-56页 |
4.6.2 多肽的变化 | 第56页 |
4.6.3 氨基氮含量的变化 | 第56-57页 |
4.6.4 游离氨基酸含量的变化 | 第57-58页 |
4.7 本章结论 | 第58-59页 |
第五章 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
附录A 显微镜下分离到的部分酵母菌照片(1000 x) | 第65-66页 |
附图B 部分酵母菌的26S rDNA D1/D2基因序列测定结果 | 第66-67页 |
图c 酸学L质构分析图 | 第67-68页 |