| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| 1 鸡蛋蛋白的摄入与体内胆固醇的关系 | 第14-15页 |
| 2 鸡蛋蛋白质调控Caco-2 细胞吸收胆固醇 | 第15-17页 |
| 2.1 Caco-2 单层细胞 | 第15-16页 |
| 2.2 胆固醇吸收中调控Caco-2 细胞实验 | 第16-17页 |
| 3 胆固醇吸收的动物实验 | 第17-19页 |
| 4 鸡蛋蛋白质对胆固醇代谢的调控 | 第19-24页 |
| 4.1 胆固醇在人和动物体内的代谢概况 | 第19页 |
| 4.2 胆固醇代谢中几种重要的蛋白质因子 | 第19-23页 |
| 4.2.1 NPC1L1 | 第19-20页 |
| 4.2.2 ABCG5/G8 | 第20-21页 |
| 4.2.3 ACAT | 第21-22页 |
| 4.2.4 MTP | 第22页 |
| 4.2.5 ABCA1 | 第22页 |
| 4.2.6 SREBP | 第22-23页 |
| 4.3 鸡蛋蛋白质调控胆固醇机制 | 第23-24页 |
| 5 研究目的意义和主要研究内容 | 第24-26页 |
| 5.1 研究目的意义 | 第24页 |
| 5.2 主要学术思路 | 第24-25页 |
| 5.3 主要研究内容 | 第25-26页 |
| 5.3.1 Caco-2 单细胞层快速培养法及其评价 | 第25页 |
| 5.3.2 鸡蛋主要蛋白调控胆固醇吸收转运及机理的研究 | 第25页 |
| 5.3.3 氨基酸Cys与Ser对胆固醇吸收的影响及机理的研究 | 第25-26页 |
| 第二章 Caco-2细胞模型快速培养法的建立及其评价 | 第26-42页 |
| 1 材料与方法 | 第26-34页 |
| 1.1 材料 | 第26-29页 |
| 1.1.1 原料 | 第26-27页 |
| 1.1.2 主要试剂与耗材 | 第27页 |
| 1.1.3 主要仪器与设备 | 第27-28页 |
| 1.1.4 溶液的配制 | 第28-29页 |
| 1.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 1.2.1 细胞的培养 | 第29-30页 |
| 1.2.2 抗坏血酸对Caco-2 细胞的活性试验 | 第30-31页 |
| 1.2.3 Caco-2 细胞生长曲线的绘制 | 第31页 |
| 1.2.4 Caco-2 单层细胞模型的建立与评价 | 第31-33页 |
| 1.2.5 数据分析 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-40页 |
| 2.1 抗坏血酸对Caco-2 细胞的活性试验 | 第34页 |
| 2.2 Caco-2 细胞生长曲线 | 第34-35页 |
| 2.3 Caco-2 细胞在不同时间的TEER值 | 第35-36页 |
| 2.4 不同培养方法Caco-2 细胞碱性磷酸酶的活性 | 第36-37页 |
| 2.5 不同培养方法Caco-2 细胞B端荧光黄的浓度 | 第37-38页 |
| 2.6 Caco-2 细胞单层模型的形态学观察 | 第38-39页 |
| 2.7 关键蛋白基因P-gp与MRP2 的RNA表达 | 第39-40页 |
| 3 结论与讨论 | 第40-42页 |
| 3.1 结论 | 第40-41页 |
| 3.2 讨论 | 第41-42页 |
| 第三章 三种鸡蛋蛋白质调控Caco-2 细胞胆固醇吸收与转运 | 第42-58页 |
| 1 材料与方法 | 第42-49页 |
| 1.1 材料 | 第42-45页 |
| 1.1.1 原料 | 第42页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第42-44页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第44-45页 |
| 1.2 实验方法 | 第45-49页 |
| 1.2.1 Caco-2 细胞单层模型的建立 | 第45页 |
| 1.2.2 三种鸡蛋蛋白质的提取 | 第45-46页 |
| 1.2.3 鸡蛋蛋白质的体外胃肠模拟消化与理化特性 | 第46页 |
| 1.2.4 蛋白质对Caco-2 细胞的毒性试验 | 第46-47页 |
| 1.2.5 胆固醇微胶束溶液的制备及对Caco-2 细胞生长的影响 | 第47页 |
| 1.2.6 蛋白质影响Caco-2 细胞胆固醇吸收实验 | 第47-48页 |
| 1.2.7 鸡蛋蛋白质影响Caco-2 细胞胆固醇转运实验 | 第48-49页 |
| 1.2.8 数据处理 | 第49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-56页 |
| 2.1 Caco-2 细胞单层模型的验证 | 第49-50页 |
| 2.2 三种鸡蛋蛋白质的理化特性分析 | 第50-52页 |
| 2.3 三种鸡蛋蛋白质对Caco-2 细胞活性的影响 | 第52-53页 |
| 2.4 胆固醇微胶束对Caco-2 细胞的毒性试验 | 第53-54页 |
| 2.5 鸡蛋蛋白质影响Caco-2 细胞胆固醇吸收 | 第54-55页 |
| 2.6 鸡蛋蛋白质影响Caco-2 细胞胆固醇转运 | 第55-56页 |
| 3 结论与讨论 | 第56-58页 |
| 3.1 结论 | 第56-57页 |
| 3.2 讨论 | 第57-58页 |
| 第四章 鸡蛋蛋白质调控Caco-2 细胞吸收转运胆固醇的分子机理研究 | 第58-74页 |
| 1 实验材料 | 第58-66页 |
| 1.1 材料 | 第58-61页 |
| 1.1.1 原料 | 第58页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第58-60页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第60-61页 |
| 1.2 实验方法 | 第61-66页 |
| 1.2.1 实验设计 | 第61页 |
| 1.2.2 细胞培养操作程序 | 第61-62页 |
| 1.2.3 三种蛋白对胆固醇在微胶束中溶解度的影响 | 第62页 |
| 1.2.4 Western-blot实验 | 第62-64页 |
| 1.2.5 Caco-2 细胞总RNA提取与RT-PCR反应 | 第64-66页 |
| 1.2.6 数据处理 | 第66页 |
| 2 结果与分析 | 第66-72页 |
| 2.1 蛋白质对胆固醇在微胶束中溶解度的影响 | 第66-68页 |
| 2.2 不同蛋白质对胆固醇关键转运蛋白NPC1L1 翻译水平的影响 | 第68-69页 |
| 2.3 不同蛋白质对Caco-2 细胞中ABCG5 与ABCG8 表达量的影响 | 第69-70页 |
| 2.4 不同蛋白质对Caco-2 细胞中ACAT2 与MTP表达量的影响 | 第70-71页 |
| 2.5 不同蛋白质对Caco-2 细胞中ABCA1 表达量的影响 | 第71页 |
| 2.6 不同蛋白质对Caco-2 细胞中SREBP1 与SREBP2 表达量的影响 | 第71-72页 |
| 3 结论与讨论 | 第72-74页 |
| 3.1 结论 | 第72-73页 |
| 3.2 讨论 | 第73-74页 |
| 第五章 鸡蛋中特殊氨基酸对Caco-2 细胞胆固醇吸收与转运的影响 | 第74-85页 |
| 1 材料与方法 | 第74-79页 |
| 1.1 材料 | 第74-77页 |
| 1.1.1 原料 | 第74页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第74-75页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第75-77页 |
| 1.2 实验方法 | 第77-79页 |
| 1.2.1 Caco-2 细胞的培养 | 第77页 |
| 1.2.2 Cys与Ser对Caco-2 细胞生长活性的影响 | 第77页 |
| 1.2.3 Cys与Ser对胆固醇在微胶束中溶解度的影响 | 第77页 |
| 1.2.4 Cys与Ser对胆固醇吸收影响 | 第77-78页 |
| 1.2.5 qRT-PCR检测Caco-2 细胞中mRNA表达水平 | 第78页 |
| 1.2.6 数据处理 | 第78-79页 |
| 2 结果与分析 | 第79-83页 |
| 2.1 Cys与Ser对Caco-2 细胞生长活性的影响 | 第79页 |
| 2.2 Cys与Ser对胆固醇在微胶束中溶解度的影响 | 第79-80页 |
| 2.3 Cys与Ser在Caco-2 细胞模型上对胆固醇吸收影响 | 第80-81页 |
| 2.4 Cys与Ser对Caco-2 细胞中ABCG5 与ABCG8 表达量的影响 | 第81-82页 |
| 2.5 Cys与Ser对Caco-2 细胞中ACAT2 与MTP表达量的影响 | 第82页 |
| 2.6 Cys与Ser对Caco-2 细胞中ABCA1 表达量的影响 | 第82-83页 |
| 3 结论与讨论 | 第83-85页 |
| 3.1 结论 | 第83-84页 |
| 3.2 讨论 | 第84-85页 |
| 结论与展望 | 第85-86页 |
| 创新性 | 第86-87页 |
| 延续研究计划 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 附录 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100页 |
