| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| 1.1 超氧化物歧化酶 | 第14-18页 |
| 1.1.1 超氧化物歧化酶的介绍 | 第14页 |
| 1.1.2 超氧化物歧化酶的性质及应用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 超氧化物歧化酶的种类与来源 | 第15-17页 |
| 1.1.4 超氧化物歧化酶酶活的测定方法 | 第17-18页 |
| 1.2 类弹性蛋白 | 第18-22页 |
| 1.2.1 类弹性蛋白介绍 | 第18页 |
| 1.2.2 类弹性蛋白的由来 | 第18-19页 |
| 1.2.3 类弹性蛋白的性质 | 第19页 |
| 1.2.4 类弹性蛋白的应用 | 第19-22页 |
| 1.3 内含肽 | 第22-24页 |
| 1.3.1 内含肽简介 | 第22页 |
| 1.3.2 内含肽的特征及构成 | 第22-23页 |
| 1.3.3 内含肽的应用 | 第23-24页 |
| 1.4 本课题研究意义及主要内容 | 第24-26页 |
| 第二章 锰离子敏感型类弹性蛋白对Mn-SOD纯化的研究 | 第26-58页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-30页 |
| 2.2.1 菌株及质粒 | 第27页 |
| 2.2.2 培养基与溶液的配制 | 第27-28页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2.4 工具酶及试剂 | 第29页 |
| 2.2.5 仪器 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-45页 |
| 2.3.1 结合Mn~(2+)的ELP二倍体(简称MELP2)载体构建 | 第30-35页 |
| 2.3.2 结合Mn~(2+)类弹性蛋白多倍体载体的构建 | 第35-39页 |
| 2.3.3 表达载体pET-28a-MELP2的构建 | 第39-40页 |
| 2.3.4 MELP十倍体预表达 | 第40-41页 |
| 2.3.5 MELP十倍体的纯化 | 第41-42页 |
| 2.3.6 SOD-MELP融合基因的构建 | 第42-44页 |
| 2.3.7 SOD-MELP融合基因的预表达 | 第44页 |
| 2.3.8 SOD-MELP融合蛋白的纯化 | 第44页 |
| 2.3.9 SOD-MELP10融合蛋白酶活的测定 | 第44-45页 |
| 2.3.10 圆二色谱分析MELP10-SOD的结构 | 第45页 |
| 2.4 结果分析 | 第45-55页 |
| 2.4.1 pUC57-MELPn构建及鉴定 | 第45-48页 |
| 2.4.2 pET28a-MELPn载体的构建 | 第48-49页 |
| 2.4.3 pET28a-SOD-MELP10载体的构建 | 第49页 |
| 2.4.4 表达 | 第49-50页 |
| 2.4.5 MELP10、MELP10-SOD纯化 | 第50-53页 |
| 2.4.6 MELP10-SOD酶活测定 | 第53-54页 |
| 2.4.7 圆二色谱 | 第54-55页 |
| 2.5 本章小结 | 第55-58页 |
| 第三章 内含肽体内剪接 | 第58-72页 |
| 3.1 引言 | 第58页 |
| 3.2 材料与方法 | 第58-65页 |
| 3.2.1 质粒与序列 | 第58页 |
| 3.2.2 pet-duet-CAT-IN-SOD-IC的构建 | 第58-63页 |
| 3.2.3 SOD-CAT的表达 | 第63-65页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第65-70页 |
| 3.3.1 SOD和InteinC的扩增 | 第65-66页 |
| 3.3.2 Inteinc和SOD的融合 | 第66页 |
| 3.3.3 pet-duet-CAT-IN-SOD-IC的鉴定 | 第66-67页 |
| 3.3.4 Sod-cat预表达 | 第67-68页 |
| 3.3.5 Sod-cat纯化 | 第68页 |
| 3.3.6 酶活测定结果 | 第68-70页 |
| 3.4 本章小结 | 第70-72页 |
| 第四章 SOD与CAT体外剪接 | 第72-80页 |
| 4.1 引言 | 第72页 |
| 4.2 实验试剂与方法 | 第72-76页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第72页 |
| 4.2.2 pet-duet-SOD-IC的构建 | 第72-75页 |
| 4.2.3 转化BL21(DE3) | 第75页 |
| 4.2.4 预表达 | 第75页 |
| 4.2.5 纯化SOD-IC与CAT-IN | 第75页 |
| 4.2.6 透析 | 第75页 |
| 4.2.7 浓度测定 | 第75-76页 |
| 4.2.8 体外剪接 | 第76页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第76-79页 |
| 4.3.1 线性载体与sod-inteinc片段的获得 | 第76-77页 |
| 4.3.2 pet-duet-SOD-IC阳性克隆鉴定 | 第77页 |
| 4.3.3 Sod-inteinc预表达 | 第77-78页 |
| 4.3.4 Sod-inteinc与cat-inteinn的纯化 | 第78页 |
| 4.3.5 体外剪接 | 第78-79页 |
| 4.4 本章小结 | 第79-80页 |
| 第五章 结论与展望 | 第80-82页 |
| 5.1 结论 | 第80-81页 |
| 5.2 展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第90-92页 |
| 作者及导师简介 | 第92-93页 |
| 附件 | 第93-94页 |
