摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
1 绪论 | 第10-19页 |
1.1 浑浊红球菌PD630脂质调控的研究概况 | 第10-12页 |
1.1.1 浑浊红球菌PD630简介 | 第10页 |
1.1.2 浑浊红球菌PD630脂质合成的特性 | 第10-11页 |
1.1.3 基因工程调控浑浊红球菌PD630脂质合成的研究进展 | 第11-12页 |
1.2 硫酯酶的研究进展 | 第12-17页 |
1.2.1 硫酯酶的作用和分类 | 第12-15页 |
1.2.2 真核生物ACP硫酯酶的应用 | 第15-16页 |
1.2.3 原核生物ACP硫酯酶的应用 | 第16-17页 |
1.3 立题依据及意义 | 第17-18页 |
1.4 主要研究内容 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-28页 |
2.1 实验材料与仪器 | 第19-21页 |
2.1.1 质粒与菌株 | 第19-20页 |
2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
2.1.3 常用溶液的配制 | 第20-21页 |
2.1.4 培养基配方 | 第21页 |
2.1.5 主要仪器与设备 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-28页 |
2.2.1 引物设计与目的片段的扩增 | 第21-23页 |
2.2.2 分子克隆相关实验 | 第23-24页 |
2.2.3 重组菌株的摇瓶培养 | 第24-25页 |
2.2.4 菌体的收集和处理 | 第25页 |
2.2.5 重组菌株RT-qPCR分析方法 | 第25-26页 |
2.2.6 蛋白质表达分析方法 | 第26-27页 |
2.2.7 培养液中葡萄糖和氮源测定 | 第27页 |
2.2.8 脂肪酸提取与分析 | 第27页 |
2.2.9 统计数据分析方法 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-44页 |
3.1 浑浊红球菌PD630生长和产脂特性分析 | 第28-29页 |
3.2 浑浊红球菌PD630硫酯酶基因表达水平分析 | 第29-30页 |
3.3 浑浊红球菌PD630硫酯酶基因在大肠杆菌中的异源表达 | 第30-35页 |
3.3.1 表达载体构建 | 第30-32页 |
3.3.2 硫酯酶过表达菌株的构建 | 第32页 |
3.3.3 重组菌株蛋白质表达的SDS-PAGE分析 | 第32-33页 |
3.3.4 重组大肠杆菌产脂特征分析 | 第33-35页 |
3.4 浑浊红球菌PD630硫酯酶的同源表达 | 第35-44页 |
3.4.1 浑浊红球菌PD630重组菌株的构建 | 第35-39页 |
3.4.2 过表达硫酯酶对浑浊红球菌PD630脂肪酸合成的影响 | 第39-44页 |
主要结论与展望 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |