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硬脂酰—辅酶A脱氢酶基因在食品级乳酸菌中的表达及Cop-odeA基因在转基因3T3细胞中过量表达不饱和脂肪酸

摘要第1-6页
Abstract第6-7页
缩略词(Abbreviations)第7-8页
目录第8-10页
第一章 文献综述第10-27页
 1 脂肪酸研究进展第10-27页
   ·脂肪酸概述第10-18页
   ·脂肪酸脱氢酶研究进展第18-21页
   ·主要脂肪酸脱氢酶基因研究进展第21-25页
   ·研究目的与意义第25-27页
第二章 硬脂酰-辅酶 A 脱氢酶基因在食品级乳酸菌中的表达第27-50页
   ·引言第27-29页
   ·实验材料第29-33页
     ·质粒和菌种第29页
     ·酶类及主要试剂第29-30页
     ·培养基第30页
     ·溶液和缓冲液第30-32页
     ·分析工具第32页
     ·主要仪器第32-33页
   ·实验方法第33-40页
     ·电击转化感受态细胞(NZ3900)的制备第33-34页
     ·克隆载体和目的基因的获得第34-37页
     ·目的基因与质粒载体的连接反应第37-38页
     ·阳性转化子的酶切鉴定和测序第38页
     ·重组质粒pNZ8149- scd1在乳酸乳中的诱导表达第38页
     ·SDS-PAGE检测硬脂酰CoA脱氢酶的表达情况第38-39页
     ·转基因乳酸菌的脂肪酸分析第39-40页
     ·重组菌生长曲线的测定和pH值的变化第40页
     ·统计分析第40页
   ·结果与分析第40-46页
     ·表达载体pNZ8149- scd1的鉴定第40-42页
     ·pNZ8149-scd1重组子的序列测定第42-43页
     ·SDS-PAGE分析硬脂酰CoA脱氢酶的表达情况第43-44页
     ·硬脂酰-辅酶A脱氢酶的诱导表达和转基因阳性株脂肪酸分析第44-45页
     ·重组菌的生长曲线和pH值测量第45-46页
   ·讨论第46-49页
   ·小结第49-50页
第三章 COP-ODEA基因在转基因3T3细胞中过量表达不饱和脂肪酸第50-78页
   ·前言第50-51页
   ·试验材料第51-54页
     ·质粒和菌种第51页
     ·主要试剂第51页
     ·溶液和缓冲液第51-53页
     ·主要软件第53-54页
     ·主要仪器第54页
   ·试验方法第54-64页
     ·质粒和细胞系第54页
     ·目的基因的鉴定第54-55页
     ·表达载体的构建第55-57页
     ·质粒DNA的转化第57页
     ·质粒DNA的双酶切鉴定和测序第57-58页
     ·质粒的大量提取第58-59页
     ·脂质体转染目的片段第59-60页
     ·细胞总RNA的提取第60-63页
     ·转基因3T3细胞的脂肪酸测定第63-64页
     ·统计分析第64页
   ·结果与分析第64-74页
     ·表达载体的构建及其鉴定第64-67页
     ·脂质体转染3T3细胞第67-68页
     ·转基因细胞的RT-PCR第68-69页
     ·转基因细胞脂肪酸分析第69-74页
   ·讨论第74-77页
   ·小结第77-78页
参考文献第78-86页
致谢第86-87页
作者简介第87-88页
导师简介第88页

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