摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词(Abbreviations) | 第7-8页 |
目录 | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-27页 |
1 脂肪酸研究进展 | 第10-27页 |
·脂肪酸概述 | 第10-18页 |
·脂肪酸脱氢酶研究进展 | 第18-21页 |
·主要脂肪酸脱氢酶基因研究进展 | 第21-25页 |
·研究目的与意义 | 第25-27页 |
第二章 硬脂酰-辅酶 A 脱氢酶基因在食品级乳酸菌中的表达 | 第27-50页 |
·引言 | 第27-29页 |
·实验材料 | 第29-33页 |
·质粒和菌种 | 第29页 |
·酶类及主要试剂 | 第29-30页 |
·培养基 | 第30页 |
·溶液和缓冲液 | 第30-32页 |
·分析工具 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-40页 |
·电击转化感受态细胞(NZ3900)的制备 | 第33-34页 |
·克隆载体和目的基因的获得 | 第34-37页 |
·目的基因与质粒载体的连接反应 | 第37-38页 |
·阳性转化子的酶切鉴定和测序 | 第38页 |
·重组质粒pNZ8149- scd1在乳酸乳中的诱导表达 | 第38页 |
·SDS-PAGE检测硬脂酰CoA脱氢酶的表达情况 | 第38-39页 |
·转基因乳酸菌的脂肪酸分析 | 第39-40页 |
·重组菌生长曲线的测定和pH值的变化 | 第40页 |
·统计分析 | 第40页 |
·结果与分析 | 第40-46页 |
·表达载体pNZ8149- scd1的鉴定 | 第40-42页 |
·pNZ8149-scd1重组子的序列测定 | 第42-43页 |
·SDS-PAGE分析硬脂酰CoA脱氢酶的表达情况 | 第43-44页 |
·硬脂酰-辅酶A脱氢酶的诱导表达和转基因阳性株脂肪酸分析 | 第44-45页 |
·重组菌的生长曲线和pH值测量 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
第三章 COP-ODEA基因在转基因3T3细胞中过量表达不饱和脂肪酸 | 第50-78页 |
·前言 | 第50-51页 |
·试验材料 | 第51-54页 |
·质粒和菌种 | 第51页 |
·主要试剂 | 第51页 |
·溶液和缓冲液 | 第51-53页 |
·主要软件 | 第53-54页 |
·主要仪器 | 第54页 |
·试验方法 | 第54-64页 |
·质粒和细胞系 | 第54页 |
·目的基因的鉴定 | 第54-55页 |
·表达载体的构建 | 第55-57页 |
·质粒DNA的转化 | 第57页 |
·质粒DNA的双酶切鉴定和测序 | 第57-58页 |
·质粒的大量提取 | 第58-59页 |
·脂质体转染目的片段 | 第59-60页 |
·细胞总RNA的提取 | 第60-63页 |
·转基因3T3细胞的脂肪酸测定 | 第63-64页 |
·统计分析 | 第64页 |
·结果与分析 | 第64-74页 |
·表达载体的构建及其鉴定 | 第64-67页 |
·脂质体转染3T3细胞 | 第67-68页 |
·转基因细胞的RT-PCR | 第68-69页 |
·转基因细胞脂肪酸分析 | 第69-74页 |
·讨论 | 第74-77页 |
·小结 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
作者简介 | 第87-88页 |
导师简介 | 第88页 |