| 摘要 | 第6-9页 |
| abstract | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第19-30页 |
| 1.1 萝卜叶 | 第19-20页 |
| 1.1.1 萝卜叶简介 | 第19页 |
| 1.1.2 萝卜叶生物活性 | 第19-20页 |
| 1.2 衰老 | 第20-23页 |
| 1.2.1 自由基学说 | 第20-21页 |
| 1.2.2 细胞衰老 | 第21-23页 |
| 1.2.3 细胞衰老表型 | 第23页 |
| 1.3 延缓衰老活性成分研究进展 | 第23-28页 |
| 1.3.1 衰老模型 | 第24-26页 |
| 1.3.2 延缓衰老活性成分 | 第26-28页 |
| 1.4 立题依据和意义 | 第28-29页 |
| 1.5 主要研究内容 | 第29-30页 |
| 第二章 亚临界水提取萝卜叶多酚的研究 | 第30-43页 |
| 引言 | 第30页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.1 实验材料与试剂 | 第30-31页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第31页 |
| 2.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 总酚含量(TPC)的测定 | 第31页 |
| 2.2.2 单因素试验 | 第31-32页 |
| 2.2.3 响应面分析试验 | 第32页 |
| 2.2.4 萝卜叶多酚提取方法比较 | 第32页 |
| 2.2.5 萝卜叶多酚的初步纯化 | 第32页 |
| 2.2.6 抗氧化活性测定 | 第32-33页 |
| 2.2.7 数据处理 | 第33-34页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第34-42页 |
| 2.3.1 单因素试验结果与分析 | 第34-36页 |
| 2.3.2 响应面实验结果和方差分析 | 第36-40页 |
| 2.3.3 预测模型的验证 | 第40页 |
| 2.3.4 亚临界水与传统热水提取的比较 | 第40页 |
| 2.3.5 萝卜叶多酚的体外抗氧化活性 | 第40-42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 萝卜叶延缓衰老活性部位的筛选及成分分析 | 第43-58页 |
| 引言 | 第43-44页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第44页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第44页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-49页 |
| 3.2.1 萝卜叶提取物制备 | 第44页 |
| 3.2.2 萝卜叶提取物萃取和分级 | 第44-46页 |
| 3.2.3 TPC的测定 | 第46页 |
| 3.2.4 总黄酮含量(TFC)的测定 | 第46页 |
| 3.2.5 抗氧化活性测定 | 第46页 |
| 3.2.6 H_2O_2诱导MRC-5早衰模型的建立 | 第46-47页 |
| 3.2.7 SA-β-Gal活性检测 | 第47-48页 |
| 3.2.8 液质分析 | 第48页 |
| 3.2.9 统计分析 | 第48-49页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第49-57页 |
| 3.3.1 不同极性部位的总酚和总黄酮含量 | 第49页 |
| 3.3.2 不同极性部位的抗氧化活性 | 第49-50页 |
| 3.3.3 H_2O_2诱导MRC-5细胞早衰作用 | 第50-52页 |
| 3.3.4 不同极性部位对H_2O_2诱导MRC-5早衰细胞的影响 | 第52-54页 |
| 3.3.5 EAF分级部位对H_2O_2诱导MRC-5早衰细胞的影响 | 第54-55页 |
| 3.3.6 活性部位F2的定性分析 | 第55-57页 |
| 3.3.7 F2中各组分的定量分析 | 第57页 |
| 3.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 F2对H_2O_2诱导MRC-5细胞早衰的预防作用及其机制研究 | 第58-81页 |
| 引言 | 第58页 |
| 4.1 仪器与材料 | 第58-59页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.2 仪器 | 第59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-63页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第59页 |
| 4.2.2 F2对MRC-5细胞的毒性实验 | 第59页 |
| 4.2.3 F2对H_2O_2诱导MRC-5细胞早衰的影响 | 第59页 |
| 4.2.4 AO/EB双染 | 第59-60页 |
| 4.2.5 Hoechst33258染色 | 第60页 |
| 4.2.6 SA-β-gal活性检测 | 第60页 |
| 4.2.7 细胞周期测定 | 第60页 |
| 4.2.8 细胞内抗氧化酶活性检测 | 第60-61页 |
| 4.2.9 细胞内MDA含量检测 | 第61页 |
| 4.2.10 细胞内ROS水平检测 | 第61页 |
| 4.2.11 线粒体膜电位(MMP)检测 | 第61页 |
| 4.2.12 单细胞电泳 | 第61-62页 |
| 4.2.13 F2对MRC-5细胞蛋白表达水平的影响 | 第62页 |
| 4.2.14 数据分析 | 第62-63页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第63-80页 |
| 4.3.1 F2对MRC-5细胞的毒性 | 第63页 |
| 4.3.2 F2对H_2O_2诱导MRC-5早衰细胞的存活率的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.3 F2对细胞衰老表型的影响 | 第64-69页 |
| 4.3.3.1 F2对细胞膜的影响 | 第64-65页 |
| 4.3.3.2 F2对细胞异染色质聚集的影响 | 第65-66页 |
| 4.3.3.3 F2对细胞SA-β-gal活性的影响 | 第66-67页 |
| 4.3.3.4 F2对细胞周期的影响 | 第67-69页 |
| 4.3.4 F2对细胞内氧化还原体系的影响 | 第69-75页 |
| 4.3.4.1 F2对细胞内ROS水平的影响 | 第69-70页 |
| 4.3.4.2 F2对细胞抗氧化酶活力及MDA含量的影响 | 第70-71页 |
| 4.3.4.3 F2对细胞线粒体膜电位(MMP)的影响 | 第71-73页 |
| 4.3.4.4 F2对细胞内DNA损伤的影响 | 第73-75页 |
| 4.3.5 F2预防H_2O_2诱导的MRC-5细胞早衰的分子机制 | 第75-78页 |
| 4.3.6 LY294002对F2预防MRC-5细胞早衰的影响 | 第78-80页 |
| 4.4 本章小结 | 第80-81页 |
| 第五章 萝卜叶体外模拟消化过程中活性成分的变化规律研究 | 第81-95页 |
| 引言 | 第81-82页 |
| 5.1 材料与试剂 | 第82-83页 |
| 5.1.1 实验材料与试剂 | 第82页 |
| 5.1.2 主要仪器与设备 | 第82-83页 |
| 5.2 实验方法 | 第83-86页 |
| 5.2.1 萝卜叶总多酚和总黄酮提取 | 第83页 |
| 5.2.2 萝卜叶体外模拟消化过程 | 第83-85页 |
| 5.2.3 TPC的测定 | 第85页 |
| 5.2.4 TFC的测定 | 第85页 |
| 5.2.5 抗氧化活性测定 | 第85页 |
| 5.2.6 回收和生物可接受指数 | 第85-86页 |
| 5.2.7 多酚成分的定量分析 | 第86页 |
| 5.2.8 活性部位的萃取 | 第86页 |
| 5.2.9 INF2和GIDF2对H_2O_2诱导的MRC-5细胞早衰的预防作用 | 第86页 |
| 5.2.10 统计分析 | 第86页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第86-94页 |
| 5.3.1 萝卜叶总酚和总黄酮含量 | 第86-87页 |
| 5.3.2 体外模拟消化对萝卜叶多酚回收的影响 | 第87-88页 |
| 5.3.3 体外模拟消化对萝卜叶黄酮回收的影响 | 第88-90页 |
| 5.3.4 萝卜叶多酚和黄酮的生物利用率 | 第90页 |
| 5.3.5 体外模拟消化过程中消化液自由基清除能力的变化 | 第90-92页 |
| 5.3.6 体外消化对萝卜叶活性部位多酚成分的影响 | 第92-93页 |
| 5.3.7 INF2和GIDF2对H_2O_2诱导MRC-5细胞早衰的保护作用 | 第93-94页 |
| 5.4 本章小结 | 第94-95页 |
| 第六章 GIDF2及山奈苷的跨膜转运研究 | 第95-112页 |
| 引言 | 第95-96页 |
| 6.1 试剂与仪器 | 第96页 |
| 6.1.1 实验试剂 | 第96页 |
| 6.1.2 仪器与设备 | 第96页 |
| 6.2 试验方法 | 第96-100页 |
| 6.2.1 GIDF2制备 | 第96-97页 |
| 6.2.2 细胞培养 | 第97页 |
| 6.2.3 GIDF2及山奈苷的毒性评价 | 第97页 |
| 6.2.4 GIDF2及山奈苷稳定性评价 | 第97页 |
| 6.2.5 Caco-2细胞模型建立 | 第97页 |
| 6.2.6 Caco-2细胞单层膜模型验证 | 第97-98页 |
| 6.2.7 转运实验 | 第98-99页 |
| 6.2.8 温度对转运的影响 | 第99页 |
| 6.2.9 维拉帕米对转运的影响 | 第99页 |
| 6.2.10 HPLC定量分析 | 第99-100页 |
| 6.2.11 数据处理 | 第100页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第100-111页 |
| 6.3.1 Caco-2细胞模型的评价 | 第100-102页 |
| 6.3.2 GIDF2和山奈苷对Caco-2细胞的毒性 | 第102-103页 |
| 6.3.3 GIDF2在HBSS缓冲液中分析方法建立 | 第103页 |
| 6.3.4 GIDF2和山奈苷的稳定性 | 第103-104页 |
| 6.3.5 山奈苷在Caco-2细胞模型中的吸收特征 | 第104-108页 |
| 6.3.6 GIDF2在Caco-2细胞模型中的吸收特征 | 第108-111页 |
| 6.4 本章小结 | 第111-112页 |
| 第七章 结论与展望 | 第112-114页 |
| 7.1 主要结论 | 第112页 |
| 7.2 主要创新点 | 第112-113页 |
| 7.3 展望 | 第113-114页 |
| 参考文献 | 第114-138页 |
| 致谢 | 第138-139页 |
| 攻读博士学位期间科研成果情况 | 第139-140页 |
