| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 符号表 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| ·环糊精概述 | 第11-12页 |
| ·环糊精的结构 | 第11页 |
| ·环糊精的应用 | 第11-12页 |
| ·环糊精的生产 | 第12页 |
| ·CGT酶概述 | 第12-15页 |
| ·CGT酶的结构 | 第12-13页 |
| ·CGT酶的功能 | 第13-14页 |
| ·CGT酶的催化机理 | 第14页 |
| ·CGT酶的产物抑制 | 第14-15页 |
| ·CGT酶产物抑制的国内外研究现状 | 第15-16页 |
| ·立题背景及意义 | 第16页 |
| ·主要研究内容 | 第16-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-23页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-23页 |
| ·多重序列比对和分析 | 第18页 |
| ·CGT酶单突变体的构建 | 第18-19页 |
| ·CGT酶双突变体的构建与转化 | 第19页 |
| ·CGT酶多突变体的构建与转化 | 第19-20页 |
| ·重组CGT酶的生产与纯化 | 第20页 |
| ·DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
| ·SDS-PAGE凝胶电泳 | 第20页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第20页 |
| ·CGT酶环化活力的测定 | 第20页 |
| ·环化反应最适底物浓度范围的测定 | 第20-21页 |
| ·CGT酶的热稳定性分析 | 第21页 |
| ·CGT酶的产物抑制分析 | 第21页 |
| ·环糊精的酶法生产 | 第21-22页 |
| ·CGT酶空间结构模拟 | 第22页 |
| ·数据处理与分析 | 第22-23页 |
| 3 结果与讨论 | 第23-52页 |
| ·CGT酶的产物抑制类型分析 | 第23-31页 |
| ·酶动力学分析体系的确定 | 第23页 |
| ·两种类型CGT酶的动力学分析 | 第23-24页 |
| ·不同类型环糊精对CGT酶 α-环化活力的抑制规律 | 第24-26页 |
| ·不同类型环糊精对CGT酶 β-环化活力的抑制规律 | 第26-28页 |
| ·不同类型环糊精对CGT酶 γ-环化活力的抑制规律 | 第28-30页 |
| ·两种类型CGT酶产物抑制的差异分析 | 第30-31页 |
| ·单突变对CGT酶产物抑制的影响 | 第31-38页 |
| ·单突变位点的选择 | 第31-33页 |
| ·单突变CGT酶的表达与纯化 | 第33页 |
| ·单突变CGT酶的环化活力及动力学分析 | 第33-34页 |
| ·单突变CGT酶的热稳定性 | 第34-35页 |
| ·β-环糊精对单突变体 α-环化活力的抑制规律 | 第35页 |
| ·β-环糊精对单突变体 β-环化活力的抑制规律 | 第35-36页 |
| ·β-环糊精对单突变体 γ-环化活力的抑制规律 | 第36-37页 |
| ·机理分析 | 第37-38页 |
| ·双突变对CGT酶产物抑制的影响 | 第38-44页 |
| ·双突变位点的选择 | 第38-39页 |
| ·双突变CGT酶的表达与纯化 | 第39页 |
| ·双突变CGT酶的环化活力 | 第39-40页 |
| ·双突变CGT酶的热稳定性 | 第40页 |
| ·β-环糊精对双突变体 α-环化活力的抑制规律 | 第40-41页 |
| ·β-环糊精对双突变体 β-环化活力的抑制规律 | 第41-42页 |
| ·β-环糊精对双突变体 γ-环化活力的抑制规律 | 第42-43页 |
| ·机理分析 | 第43-44页 |
| ·多突变对CGT酶产物抑制的影响 | 第44-47页 |
| ·多突变位点的选择 | 第44页 |
| ·多突变CGT酶的表达与纯化 | 第44-45页 |
| ·多突变CGT酶的环化活力 | 第45页 |
| ·多突变CGT酶的热稳定性 | 第45-46页 |
| ·β-环糊精对多突变体环化活力的抑制规律 | 第46-47页 |
| ·机理分析 | 第47页 |
| ·CGT酶突变体在环糊精生产中的应用评价 | 第47-52页 |
| ·以可溶性淀粉为底物的环糊精酶法生产 | 第47-49页 |
| ·以玉米淀粉为底物的环糊精酶法生产 | 第49-52页 |
| 主要结论与展望 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60页 |
