| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-19页 |
| ·概述 | 第10-11页 |
| ·萜类化合物分类及应用 | 第10页 |
| ·萜类化合物的主要生产方法 | 第10-11页 |
| ·酿酒酵母生产萜类化合物的研究进展 | 第11-14页 |
| ·酿酒酵母的优势 | 第11页 |
| ·酿酒酵母合成萜类化合物的生物途径 | 第11-13页 |
| ·酿酒酵母萜类代谢途径上的关键酶 | 第13-14页 |
| ·代谢工程改造酿酒酵母合成萜类化合物的研究策略 | 第14-15页 |
| ·改造代谢途径上关键酶分子的空间组织结构 | 第14-15页 |
| ·调控 MVA 代谢途径增加前体物质的供给 | 第15页 |
| ·其他方法 | 第15页 |
| ·代谢工程改造酿酒酵母合成萜类化合物的研究进展 | 第15-16页 |
| ·代谢工程改造酿酒酵母合成萜类化合物的国内外研究现状 | 第15-16页 |
| ·2 代谢工程改造酿酒酵母生产单萜化合物面临的问题 | 第16页 |
| ·立题依据及意义 | 第16-17页 |
| ·通过酶空间靠近效应促进(S)-芳樟醇合成 | 第16-17页 |
| ·调控类异戊二烯合成途径促进(S)-芳樟醇生产 | 第17页 |
| ·本课题研究的意义 | 第17页 |
| ·本论文主要研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-29页 |
| ·菌株与质粒 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·试剂与仪器 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·培养方法 | 第20-21页 |
| ·分子生物学操作 | 第21-27页 |
| ·DNA 操作方法 | 第21页 |
| ·AaLS1 与 ApLS1 基因游离表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·ERG20 基因的定点突变及其表达载体的构建 | 第22-23页 |
| ·融合酶基因表达载体的构建 | 第23页 |
| ·IDI1 基因表达载体构建 | 第23-26页 |
| ·tHMG1 基因整合表达载体的构建 | 第26页 |
| ·重组菌株的构建 | 第26-27页 |
| ·测定与分析方法 | 第27-29页 |
| ·气相色谱与质谱(GC-MS)分析与检测 | 第27页 |
| ·麦角固醇的测定[47] | 第27-28页 |
| ·乙醇耐受性的测定 | 第28页 |
| ·其他参数的测定 | 第28-29页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第29-41页 |
| ·(S)-芳樟醇合成酶在酿酒酵母中的表达 | 第29-32页 |
| ·AaLS1 与 ApLS1 基因的扩增及其表达载体的构建 | 第29页 |
| ·ERG20 基因的定点突变及其表达载体的构建 | 第29-30页 |
| ·酿酒酵母工程菌株的构建 | 第30-31页 |
| ·(S)-芳樟醇产量分析 | 第31页 |
| ·讨论 | 第31-32页 |
| ·融合表达对(S)-芳樟醇产量的影响 | 第32-36页 |
| ·融合基因表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·表达融合酶对(S)-芳樟醇产量的影响 | 第33页 |
| ·表达融合酶对麦角固醇含量的影响 | 第33-35页 |
| ·表达融合酶对乙醇耐受性的影响 | 第35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| ·调控酿酒酵母类异戊二烯合成途径强化(S)-芳樟醇合成 | 第36-41页 |
| ·IDI1 基因表达载体的构建 | 第37页 |
| ·tHMG1 基因表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·酿酒酵母工程菌株的构建 | 第38页 |
| ·调控类异戊二烯合成途径对(S)-芳樟醇产量的影响 | 第38-39页 |
| ·调控类异戊二烯合成途径对麦角固醇含量的影响 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 主要结论与展望 | 第41-43页 |
| 主要结论 | 第41页 |
| 展望 | 第41-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 附录 | 第50页 |
