中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1.1 课题研究背景 | 第9-10页 |
1.2 盐酸克伦特罗(瘦肉精)概述 | 第10-16页 |
1.2.1 盐酸克伦特罗简介 | 第10-11页 |
1.2.2 盐酸克伦特罗的功效及作用 | 第11-12页 |
1.2.3 盐酸克伦特罗残留对人体的危害 | 第12页 |
1.2.4 相关限定标准 | 第12-13页 |
1.2.5 常用检测方法 | 第13-16页 |
1.2.5.1 高效液相色谱法(HPLC) | 第13-14页 |
1.2.5.2 气相色谱—质谱联用(GC-MS) | 第14-15页 |
1.2.5.3 酶联免疫吸附测定(ELISA)技术 | 第15页 |
1.2.5.4 胶体金免疫层析技术 | 第15-16页 |
1.3 金标检测技术的概述 | 第16-19页 |
1.3.1 胶体金的简介 | 第16-17页 |
1.3.2 胶体金免疫层析技术的发展史 | 第17页 |
1.3.3 金标检测技术在食品安全检测中的应用 | 第17-18页 |
1.3.3.1 食品中农兽药物残留的检测 | 第17-18页 |
1.3.3.2 食品中菌类的检测 | 第18页 |
1.3.3.3 食品中其他添加物和违禁物的检测 | 第18页 |
1.3.4 金标检测技术检测小分子物质的原理 | 第18-19页 |
1.3.5 金标检测卡的发展趋势 | 第19页 |
1.4 本课题研究目的意义、主要研究内容和创新之处 | 第19-22页 |
1.4.1 本课题研究的目的意义 | 第19-20页 |
1.4.2 本课题研究的主要内容 | 第20页 |
1.4.3 本课题创新之处 | 第20-21页 |
1.4.4 技术路线 | 第21-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-43页 |
2.1 实验仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 实验材料及试剂 | 第23-29页 |
2.2.1 实验动物 | 第23页 |
2.2.2 实验试剂及药品 | 第23-25页 |
2.2.3 实验耗材 | 第25-26页 |
2.2.4 实验所需试剂的配制 | 第26-29页 |
2.2.4.1 瘦肉精金标检测卡相关试剂配制 | 第26页 |
2.2.4.2 SDS-PAGE蛋白电泳相关试剂配制 | 第26-28页 |
2.2.4.3 间接ELISA法测定抗血清效价相关试剂配制 | 第28-29页 |
2.2.4.4 考马斯亮蓝法测蛋白浓度相关试剂配制 | 第29页 |
2.3 实验方法 | 第29-43页 |
2.3.1 瘦肉精金标检测卡的制备及工艺优化 | 第29-35页 |
2.3.1.1 胶体金的烧制 | 第29-30页 |
2.3.1.2 不同大小胶体金颗粒的烧制 | 第30页 |
2.3.1.3 瘦肉精金标检测卡的制备 | 第30-31页 |
2.3.1.4 最佳胶体金颗粒大小的选择 | 第31页 |
2.3.1.5 胶体金溶液中K_2CO_3最佳添加量的确定 | 第31页 |
2.3.1.6 金标抗体制备过程中最佳抗体添加量的确定 | 第31页 |
2.3.1.7 金标抗体制备过程中离心方式的选择 | 第31-32页 |
2.3.1.8 金标抗体复溶体积及喷金量的选择 | 第32-33页 |
2.3.1.9 T线包被浓度和C线包被浓度的选择 | 第33页 |
2.3.1.10 瘦肉精金标检测测卡灵敏度的测试 | 第33-34页 |
2.3.1.11 猪肉样品前处理方法的选择 | 第34-35页 |
2.3.2 盐酸克伦特罗抗原抗体的初步研究 | 第35-43页 |
2.3.2.1 完全抗原的合成 | 第35-37页 |
2.3.2.2 完全抗原的鉴定 | 第37-38页 |
2.3.2.3 CLB-BSA偶联比的计算 | 第38页 |
2.3.2.4 投料比与CLB-BSA偶联比的关系 | 第38页 |
2.3.2.5 免疫计划 | 第38-39页 |
2.3.2.6 免疫效价的测定 | 第39-40页 |
2.3.2.7 硫酸铵分级沉降法纯化抗血清制备多抗 | 第40-41页 |
2.3.2.8 纯化后多抗的浓度、纯度变化及半数抑制率 | 第41-42页 |
2.3.2.9 将自制抗原抗体用于制备检测卡的效果 | 第42-43页 |
第三章 结果与讨论 | 第43-66页 |
3.1 瘦肉精金标检测卡的制备及调试结果 | 第43-53页 |
3.1.1 不同柠檬酸三钠加入量与胶体金最大吸收波长的关系 | 第43页 |
3.1.2 最佳胶体金颗粒大小的选择 | 第43-45页 |
3.1.3 胶体金溶液中K_2CO_3最佳添加量的确定 | 第45-47页 |
3.1.4 金标抗体制备过程中最佳抗体添加量的确定 | 第47-48页 |
3.1.5 金标抗体制备过程中离心方式的选择 | 第48-49页 |
3.1.6 金标抗体复溶体积及喷金量的选择 | 第49-50页 |
3.1.7 T线包被浓度和C线包被浓度的选择 | 第50-51页 |
3.1.8 瘦肉精金标检测卡灵敏度的测试结果 | 第51页 |
3.1.9 猪肉样品前处理方法的选择 | 第51-53页 |
3.2 盐酸克伦特罗抗原抗体的初步研究 | 第53-66页 |
3.2.1 完全抗原的鉴定结果 | 第53-55页 |
3.2.1.1 CLB-BSA的SDS-PAGE电泳鉴定结果 | 第53-54页 |
3.2.1.2 紫外全波长扫描法鉴定完全抗原 | 第54-55页 |
3.2.2 投料比与CLB-BSA偶联比的关系 | 第55-56页 |
3.2.3 免疫效价的测定 | 第56-62页 |
3.2.3.1 包被抗原的工作浓度的确定 | 第56-57页 |
3.2.3.2 抗血清效价的测定 | 第57-62页 |
3.2.4 纯化后多抗的浓度、纯度变化及半数抑制率 | 第62-64页 |
3.2.4.1 多抗纯化后的蛋白浓度 | 第62-63页 |
3.2.4.2 多抗纯化后纯度的变化 | 第63页 |
3.2.4.3 纯化后多抗的半数抑制浓度的测定结果 | 第63-64页 |
3.2.5 自制抗原抗体用于制备检测卡的效果 | 第64-66页 |
主要结论与展望 | 第66-68页 |
结论 | 第66-67页 |
展望 | 第67-68页 |
参考文献 | 第68-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
个人简历 | 第74-75页 |
研究成果 | 第75页 |