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调控黄山黑鸡肌肉中多不饱和脂肪比率的关键基因鉴定及功能验证

致谢第7-8页
摘要第8-9页
abstract第9-10页
第一章 文献综述第16-25页
    1.1 鸡肉发展现状及营养成分和价值第16-18页
    1.2 黄山黑鸡的营养价值第18-19页
    1.3 脂肪酸对鸡肉品质的影响第19-20页
    1.4 转录组测序在畜禽重要经济性状鉴定中的应用第20-21页
    1.5 本研究的目的及技术路线第21-25页
        1.5.1 研究背景及目的意义第21-23页
        1.5.2 研究技术路线第23-24页
        1.5.3 研究内容第24-25页
第二章 黄山黑鸡肌肉组织转录组测序与生物信息学分析第25-47页
    2.1 引言第25-26页
    2.2 实验材料第26-27页
        2.2.1 主要试剂第26页
        2.2.2 主要仪器设备第26-27页
    2.3 实验方法第27-30页
        2.3.1 样品采集第27页
        2.3.2 脂肪酸的提取及甲酯化第27页
        2.3.3 脂肪酸的组成成分检测第27页
        2.3.4 测序文库的构建第27-28页
        2.3.5 质量控制第28页
        2.3.6 参考序列比对分析第28页
        2.3.7 基因表达水平分析第28页
        2.3.8 差异表达分析第28页
        2.3.9 差异基因GO富集分析和KEGG富集分析第28-29页
        2.3.10 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证第29-30页
    2.4 结果与分析第30-43页
        2.4.1 样品脂肪酸组成比较第30-31页
        2.4.2 RNA提取与质量检测第31-34页
        2.4.3 测序质量控制第34-36页
        2.4.4 参考序列比对分析第36-39页
        2.4.5 差异表达基因筛选第39-41页
        2.4.6 差异基因GO富集分析第41-42页
        2.4.7 差异基因KEGG富集分析第42页
        2.4.8 实时荧光定量PCR对不同差异基因的验证第42-43页
    2.5 讨论第43-45页
    2.6 本章小结第45-47页
第三章 FADS2基因的功能验证第47-63页
    3.1 引言第47-48页
    3.2 实验材料第48-49页
        3.2.1 主要试剂第48-49页
        3.2.2 主要仪器设备第49页
    3.3 实验方法第49-52页
        3.3.1 鸡前脂肪细胞的分离及培养第49-50页
        3.3.2 鸡FADS2基因的siRNA干扰序列的设计与合成第50页
        3.3.3 慢病毒载体构建和包装、扩增第50-51页
        3.3.4 慢病毒滴度的测定第51页
        3.3.5 慢病毒感染鸡前脂肪细胞最佳感染复数MOI的测定第51页
        3.3.6 实时荧光定量PCR检测FADS2基因的RNA干扰效率第51页
        3.3.7 FADS2siRNA侵染实验第51-52页
        3.3.8 脂肪细胞RNA的提取第52页
        3.3.9 实时荧光定量PCR检测FADS2基因的RNA干扰效率第52页
        3.3.10 基因表达检测第52页
    3.4 结果与分析第52-60页
        3.4.1 鸡前脂肪细胞的形态观察第52-53页
        3.4.2 鸡前脂肪细胞的生长曲线第53页
        3.4.3 慢病毒滴度结果第53-54页
        3.4.4 最佳感染复数MOI的探索第54-55页
        3.4.5 FADS2基因干扰效率检测第55-57页
        3.4.6 慢病毒侵染鸡前脂肪细胞结果第57页
        3.4.7 通过荧光定量检测慢病毒的干扰效率第57页
        3.4.8 FADS2siRNA对鸡脂肪细胞中ELOVL5等基因表达的影响第57-60页
    3.5 讨论第60-61页
    3.6 本章小结第61-63页
第四章 结论与展望第63-65页
    4.1 结论第63页
    4.2 论文的创新点第63-64页
    4.3 存在的问题及展望第64-65页
参考文献第65-72页
附录第72-75页
    附录1 TRIZOL法提取样品中总RNA及质量检测第72-73页
    附录2 转录组测序文库的构建第73页
    附录3 HIFI-MMLVCDNA第一链合成试剂盒反转录第73-74页
    附录4 鸡前脂肪细胞的分离第74-75页
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况第75-76页

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