摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
缩略语表 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-29页 |
1 卵粘蛋白的结构特点 | 第17-18页 |
2 卵粘蛋白的分离纯化 | 第18-22页 |
2.1 等电点沉淀法 | 第18-20页 |
2.2 层析法 | 第20-21页 |
2.2.1 凝胶层析 | 第20-21页 |
2.2.2 离子交换层析 | 第21页 |
2.2.3 亲和层析 | 第21页 |
2.3 聚乙二醇沉淀法 | 第21-22页 |
3 卵粘蛋白糖链及其构效关系 | 第22-25页 |
3.1 糖链与抗菌活性 | 第22-23页 |
3.2 糖链与抗病毒侵染活性 | 第23-24页 |
3.3 糖链与抗肿瘤活性 | 第24页 |
3.4 其他生物活性 | 第24-25页 |
4 蛋白质抗菌机制的研究 | 第25-26页 |
5 本课题研究的目的和主要研究内容 | 第26-29页 |
5.1 研究的目的与意义 | 第26-27页 |
5.2 学术思路 | 第27页 |
5.3 主要研究内容 | 第27-29页 |
第二章 PEG法提取卵粘蛋白的研究 | 第29-42页 |
1 材料与方法 | 第29-33页 |
1.1 材料 | 第29-30页 |
1.1.1 原料 | 第29页 |
1.1.2 主要试剂 | 第29-30页 |
1.1.3 主要仪器与设备 | 第30页 |
1.2 方法 | 第30-33页 |
1.2.1 蛋清稀释比对卵粘蛋白提取的影响 | 第30-31页 |
1.2.2 PEG分子质量对卵粘蛋白提取的影响 | 第31页 |
1.2.3 PEG浓度对卵粘蛋白提取的影响 | 第31页 |
1.2.4 不同方法提取卵粘蛋白对粗卵粘蛋白组成的影响 | 第31页 |
1.2.5 凝胶过滤层析(GFC)对卵粘蛋白分离纯化 | 第31-32页 |
1.2.6 SDS-PAGE电泳分析鉴定 | 第32页 |
1.2.7 卵粘蛋白产量与得率的测定 | 第32-33页 |
1.2.8 数据统计分析 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-41页 |
2.1 蛋清稀释比对卵粘蛋白提取效果的影响 | 第33-35页 |
2.2 PEG分子量对卵粘蛋白提取效果的影响 | 第35-37页 |
2.3 PEG 8000 浓度对卵粘蛋白提取效果的影响 | 第37-38页 |
2.4 不同提取方法对粗卵粘蛋白组成的比较 | 第38-40页 |
2.5 凝胶过滤层析 | 第40-41页 |
3 小结 | 第41-42页 |
第三章 卵粘蛋白的抑菌活性研究 | 第42-60页 |
1 材料与方法 | 第43-48页 |
1.1 材料 | 第43-44页 |
1.1.1 实验菌株 | 第43页 |
1.1.2 主要试剂 | 第43-44页 |
1.1.3 主要仪器与设备 | 第44页 |
1.2 方法 | 第44-48页 |
1.2.1 卵粘蛋白的溶液的配制 | 第44页 |
1.2.2 溶液中卵粘蛋白含量的测定 | 第44-45页 |
1.2.3 菌种的活化与接种 | 第45-46页 |
1.2.4 菌悬液的制备 | 第46页 |
1.2.5 最小抑菌浓度的测定(MIC) | 第46页 |
1.2.6 抑菌活性的测定 | 第46页 |
1.2.7 不同温度下卵粘蛋白对金黄色葡萄球菌抑菌性的影响 | 第46-47页 |
1.2.8 不同pH下卵粘蛋白对金黄色葡萄球菌抑菌性的影响 | 第47页 |
1.2.9 不同金属离子对卵粘蛋白抑制金黄色葡萄球菌性能的影响 | 第47页 |
1.2.10 数据统计分析 | 第47-48页 |
2 结果与分析 | 第48-58页 |
2.1 MIC | 第48-49页 |
2.2 抑菌活性分析 | 第49-53页 |
2.2.1 卵粘蛋白对金黄色葡萄球菌的抑菌作用 | 第49-50页 |
2.2.2 卵粘蛋白对腐生葡萄球菌的抑菌作用 | 第50-51页 |
2.2.3 卵粘蛋白对变异链球菌的抑菌作用 | 第51-52页 |
2.2.4 卵粘蛋白对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌的抑菌作用 | 第52-53页 |
2.3 温度对卵粘蛋白抑菌性的影响 | 第53-56页 |
2.4 pH对卵粘蛋白抑菌性的影响 | 第56页 |
2.5 金属离子对卵粘蛋白抑菌性的影响 | 第56-58页 |
3 小结 | 第58-60页 |
第四章 卵粘蛋白抑菌机制研究 | 第60-71页 |
1 材料与方法 | 第61-65页 |
1.1 材料 | 第61-62页 |
1.1.1 实验菌株 | 第61页 |
1.1.2 主要试剂 | 第61页 |
1.1.3 主要仪器与设备 | 第61-62页 |
1.2 方法 | 第62-65页 |
1.2.1 卵粘蛋白溶液的制备 | 第62页 |
1.2.2 菌种的活化与接种 | 第62页 |
1.2.3 菌悬液的制备 | 第62页 |
1.2.4 卵粘蛋白抑菌动力曲线的测定 | 第62-63页 |
1.2.5 细菌的荧光染色 | 第63页 |
1.2.6 流式细胞仪分析检测 | 第63-64页 |
1.2.7 扫描电镜分析 | 第64页 |
1.2.8 数据统计分析 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-70页 |
2.1 卵粘蛋白对菌体生长动力曲线的影响 | 第65-66页 |
2.2 细菌活性状态分析 | 第66-69页 |
2.3 扫描电镜分析 | 第69-70页 |
3 小结 | 第70-71页 |
第五章 卵粘蛋白酶解产物抑菌活性的研究 | 第71-83页 |
1 材料与方法 | 第72-76页 |
1.1 材料 | 第72-73页 |
1.1.1 实验菌株 | 第72页 |
1.1.2 主要试剂 | 第72-73页 |
1.1.3 主要仪器与设备 | 第73页 |
1.2 方法 | 第73-76页 |
1.2.1 菌种的活化与接种 | 第73页 |
1.2.2 菌悬液的制备 | 第73页 |
1.2.3 不同蛋白酶酶解产物的制备 | 第73-74页 |
1.2.4 酶解产物抑菌活性的测定 | 第74页 |
1.2.5 酶解物的分子量分布分析 | 第74页 |
1.2.6 酶解液的紫外光谱分析 | 第74页 |
1.2.7 蛋白酶酶解卵粘蛋白酶解条件的优化 | 第74-75页 |
1.2.8 酶解产物的分离纯化 | 第75页 |
1.2.9 酶解产物的抑菌动力曲线 | 第75-76页 |
1.2.10 数据统计分析 | 第76页 |
2 结果与分析 | 第76-82页 |
2.1 不同蛋白酶酶解产物的抑菌性 | 第76-77页 |
2.2 酶解产物的紫外光谱 | 第77-78页 |
2.3 胰蛋白酶酶解卵粘蛋白的最佳条件 | 第78-80页 |
2.3.1 酶用量 | 第78页 |
2.3.2 酶解时间 | 第78-79页 |
2.3.3 酶解温度 | 第79-80页 |
2.4 酶解产物分子量分布 | 第80-81页 |
2.5 酶解产物的抑菌动力曲线 | 第81-82页 |
3 小结 | 第82-83页 |
第六章 卵粘蛋白结构与抑菌活性关系的初探 | 第83-97页 |
1 材料与方法 | 第83-89页 |
1.1 材料 | 第83-85页 |
1.1.1 实验菌株 | 第83页 |
1.1.2 主要试剂 | 第83-84页 |
1.1.3 主要仪器与设备 | 第84-85页 |
1.2 方法 | 第85-89页 |
1.2.1 ɑ-、β-亚基的制备 | 第85页 |
1.2.2 ɑ-、β-亚基的分离纯化 | 第85页 |
1.2.3 亚基的SDS-PAGE鉴定 | 第85-86页 |
1.2.4 亚基的质谱鉴定 | 第86-87页 |
1.2.5 卵粘蛋白O-糖链的释放 | 第87页 |
1.2.6 糖链释放效果分析 | 第87页 |
1.2.7 糖链释放前后紫外扫描分析 | 第87页 |
1.2.8 O-糖链的分离纯化 | 第87-88页 |
1.2.9 亚基、O-糖链的抑菌活性测定 | 第88页 |
1.2.10 O-糖链对菌体的抑菌动力曲线 | 第88页 |
1.2.11 数据统计分析 | 第88-89页 |
2 结果与分析 | 第89-95页 |
2.1 卵粘蛋白亚基的分离纯化及鉴定 | 第89-92页 |
2.1.1 亚基的层析分离纯化 | 第89页 |
2.1.2 亚基的SDS-PAGE染色 | 第89-91页 |
2.1.3 亚基的质谱鉴定 | 第91-92页 |
2.2 糖链的释放效果 | 第92-93页 |
2.3 糖链释放前后的紫外扫描分析 | 第93-94页 |
2.4 亚基、糖链的抑菌活性分析 | 第94-95页 |
3 小结 | 第95-97页 |
第七章 结论与展望 | 第97-100页 |
1 结论 | 第97-98页 |
2 创新 | 第98-99页 |
3 本研究存在的问题及展望 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
附录研究生期间科研情况 | 第112页 |