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卵粘蛋白抑菌活性及其机制的研究

摘要第10-12页
Abstract第12-14页
缩略语表第15-16页
第一章 文献综述第16-29页
    1 卵粘蛋白的结构特点第17-18页
    2 卵粘蛋白的分离纯化第18-22页
        2.1 等电点沉淀法第18-20页
        2.2 层析法第20-21页
            2.2.1 凝胶层析第20-21页
            2.2.2 离子交换层析第21页
            2.2.3 亲和层析第21页
        2.3 聚乙二醇沉淀法第21-22页
    3 卵粘蛋白糖链及其构效关系第22-25页
        3.1 糖链与抗菌活性第22-23页
        3.2 糖链与抗病毒侵染活性第23-24页
        3.3 糖链与抗肿瘤活性第24页
        3.4 其他生物活性第24-25页
    4 蛋白质抗菌机制的研究第25-26页
    5 本课题研究的目的和主要研究内容第26-29页
        5.1 研究的目的与意义第26-27页
        5.2 学术思路第27页
        5.3 主要研究内容第27-29页
第二章 PEG法提取卵粘蛋白的研究第29-42页
    1 材料与方法第29-33页
        1.1 材料第29-30页
            1.1.1 原料第29页
            1.1.2 主要试剂第29-30页
            1.1.3 主要仪器与设备第30页
        1.2 方法第30-33页
            1.2.1 蛋清稀释比对卵粘蛋白提取的影响第30-31页
            1.2.2 PEG分子质量对卵粘蛋白提取的影响第31页
            1.2.3 PEG浓度对卵粘蛋白提取的影响第31页
            1.2.4 不同方法提取卵粘蛋白对粗卵粘蛋白组成的影响第31页
            1.2.5 凝胶过滤层析(GFC)对卵粘蛋白分离纯化第31-32页
            1.2.6 SDS-PAGE电泳分析鉴定第32页
            1.2.7 卵粘蛋白产量与得率的测定第32-33页
            1.2.8 数据统计分析第33页
    2 结果与分析第33-41页
        2.1 蛋清稀释比对卵粘蛋白提取效果的影响第33-35页
        2.2 PEG分子量对卵粘蛋白提取效果的影响第35-37页
        2.3 PEG 8000 浓度对卵粘蛋白提取效果的影响第37-38页
        2.4 不同提取方法对粗卵粘蛋白组成的比较第38-40页
        2.5 凝胶过滤层析第40-41页
    3 小结第41-42页
第三章 卵粘蛋白的抑菌活性研究第42-60页
    1 材料与方法第43-48页
        1.1 材料第43-44页
            1.1.1 实验菌株第43页
            1.1.2 主要试剂第43-44页
            1.1.3 主要仪器与设备第44页
        1.2 方法第44-48页
            1.2.1 卵粘蛋白的溶液的配制第44页
            1.2.2 溶液中卵粘蛋白含量的测定第44-45页
            1.2.3 菌种的活化与接种第45-46页
            1.2.4 菌悬液的制备第46页
            1.2.5 最小抑菌浓度的测定(MIC)第46页
            1.2.6 抑菌活性的测定第46页
            1.2.7 不同温度下卵粘蛋白对金黄色葡萄球菌抑菌性的影响第46-47页
            1.2.8 不同pH下卵粘蛋白对金黄色葡萄球菌抑菌性的影响第47页
            1.2.9 不同金属离子对卵粘蛋白抑制金黄色葡萄球菌性能的影响第47页
            1.2.10 数据统计分析第47-48页
    2 结果与分析第48-58页
        2.1 MIC第48-49页
        2.2 抑菌活性分析第49-53页
            2.2.1 卵粘蛋白对金黄色葡萄球菌的抑菌作用第49-50页
            2.2.2 卵粘蛋白对腐生葡萄球菌的抑菌作用第50-51页
            2.2.3 卵粘蛋白对变异链球菌的抑菌作用第51-52页
            2.2.4 卵粘蛋白对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌的抑菌作用第52-53页
        2.3 温度对卵粘蛋白抑菌性的影响第53-56页
        2.4 pH对卵粘蛋白抑菌性的影响第56页
        2.5 金属离子对卵粘蛋白抑菌性的影响第56-58页
    3 小结第58-60页
第四章 卵粘蛋白抑菌机制研究第60-71页
    1 材料与方法第61-65页
        1.1 材料第61-62页
            1.1.1 实验菌株第61页
            1.1.2 主要试剂第61页
            1.1.3 主要仪器与设备第61-62页
        1.2 方法第62-65页
            1.2.1 卵粘蛋白溶液的制备第62页
            1.2.2 菌种的活化与接种第62页
            1.2.3 菌悬液的制备第62页
            1.2.4 卵粘蛋白抑菌动力曲线的测定第62-63页
            1.2.5 细菌的荧光染色第63页
            1.2.6 流式细胞仪分析检测第63-64页
            1.2.7 扫描电镜分析第64页
            1.2.8 数据统计分析第64-65页
    2 结果与分析第65-70页
        2.1 卵粘蛋白对菌体生长动力曲线的影响第65-66页
        2.2 细菌活性状态分析第66-69页
        2.3 扫描电镜分析第69-70页
    3 小结第70-71页
第五章 卵粘蛋白酶解产物抑菌活性的研究第71-83页
    1 材料与方法第72-76页
        1.1 材料第72-73页
            1.1.1 实验菌株第72页
            1.1.2 主要试剂第72-73页
            1.1.3 主要仪器与设备第73页
        1.2 方法第73-76页
            1.2.1 菌种的活化与接种第73页
            1.2.2 菌悬液的制备第73页
            1.2.3 不同蛋白酶酶解产物的制备第73-74页
            1.2.4 酶解产物抑菌活性的测定第74页
            1.2.5 酶解物的分子量分布分析第74页
            1.2.6 酶解液的紫外光谱分析第74页
            1.2.7 蛋白酶酶解卵粘蛋白酶解条件的优化第74-75页
            1.2.8 酶解产物的分离纯化第75页
            1.2.9 酶解产物的抑菌动力曲线第75-76页
            1.2.10 数据统计分析第76页
    2 结果与分析第76-82页
        2.1 不同蛋白酶酶解产物的抑菌性第76-77页
        2.2 酶解产物的紫外光谱第77-78页
        2.3 胰蛋白酶酶解卵粘蛋白的最佳条件第78-80页
            2.3.1 酶用量第78页
            2.3.2 酶解时间第78-79页
            2.3.3 酶解温度第79-80页
        2.4 酶解产物分子量分布第80-81页
        2.5 酶解产物的抑菌动力曲线第81-82页
    3 小结第82-83页
第六章 卵粘蛋白结构与抑菌活性关系的初探第83-97页
    1 材料与方法第83-89页
        1.1 材料第83-85页
            1.1.1 实验菌株第83页
            1.1.2 主要试剂第83-84页
            1.1.3 主要仪器与设备第84-85页
        1.2 方法第85-89页
            1.2.1 ɑ-、β-亚基的制备第85页
            1.2.2 ɑ-、β-亚基的分离纯化第85页
            1.2.3 亚基的SDS-PAGE鉴定第85-86页
            1.2.4 亚基的质谱鉴定第86-87页
            1.2.5 卵粘蛋白O-糖链的释放第87页
            1.2.6 糖链释放效果分析第87页
            1.2.7 糖链释放前后紫外扫描分析第87页
            1.2.8 O-糖链的分离纯化第87-88页
            1.2.9 亚基、O-糖链的抑菌活性测定第88页
            1.2.10 O-糖链对菌体的抑菌动力曲线第88页
            1.2.11 数据统计分析第88-89页
    2 结果与分析第89-95页
        2.1 卵粘蛋白亚基的分离纯化及鉴定第89-92页
            2.1.1 亚基的层析分离纯化第89页
            2.1.2 亚基的SDS-PAGE染色第89-91页
            2.1.3 亚基的质谱鉴定第91-92页
        2.2 糖链的释放效果第92-93页
        2.3 糖链释放前后的紫外扫描分析第93-94页
        2.4 亚基、糖链的抑菌活性分析第94-95页
    3 小结第95-97页
第七章 结论与展望第97-100页
    1 结论第97-98页
    2 创新第98-99页
    3 本研究存在的问题及展望第99-100页
参考文献第100-111页
致谢第111-112页
附录研究生期间科研情况第112页

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