| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第1章 绪论 | 第16-32页 |
| 1.1 课题背景及目的和意义 | 第16-17页 |
| 1.2 耐冷菌及其危害 | 第17-18页 |
| 1.2.1 耐冷菌的定义 | 第17页 |
| 1.2.2 耐冷菌的危害 | 第17-18页 |
| 1.3 控制耐冷菌的方法 | 第18页 |
| 1.4 抗菌肽国内外研究进展 | 第18-30页 |
| 1.4.1 抗菌肽的筛选方法 | 第18-21页 |
| 1.4.2 抗菌肽分离纯化 | 第21-25页 |
| 1.4.3 抗菌肽结构测定与抑菌机理 | 第25-27页 |
| 1.4.4 抗菌肽的应用 | 第27-30页 |
| 1.5 主要研究内容及课题来源 | 第30-32页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第32-51页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第32-36页 |
| 2.1.1 主要实验仪器与设备 | 第32-33页 |
| 2.1.2 主要实验试剂 | 第33-35页 |
| 2.1.3 培养基 | 第35-36页 |
| 2.1.4 指示菌和乳酸菌及培养条件 | 第36页 |
| 2.2 筛选抑制耐冷菌的乳酸菌抗菌肽 | 第36-38页 |
| 2.2.1 乳酸菌发酵液的处理 | 第36-37页 |
| 2.2.2 微孔琼脂扩散法筛选抑制耐冷菌的乳酸菌 | 第37页 |
| 2.2.3 排除过氧化氢抑菌实验 | 第37页 |
| 2.2.4 蛋白类抑菌物的确定 | 第37页 |
| 2.2.5 肽类抑菌物质确定 | 第37-38页 |
| 2.3 产生抗菌肽的乳酸菌种属鉴定 | 第38页 |
| 2.3.1 16S rDNA鉴定乳酸菌 | 第38页 |
| 2.3.2 API生理生化鉴定 | 第38页 |
| 2.4 抗菌肽T1和Q7的理化性质 | 第38-40页 |
| 2.4.1 抗菌肽T1和Q7抑菌谱测定 | 第38页 |
| 2.4.2 抗菌肽T1和Q7热稳定性测定 | 第38-39页 |
| 2.4.3 抗菌肽T1和Q7酸碱稳定性测定 | 第39页 |
| 2.4.4 酶对抗菌肽 T1 和 Q7 抑菌活性的影响 | 第39页 |
| 2.4.5 化学试剂对抗菌肽T1和Q7稳定性的影响 | 第39-40页 |
| 2.5 抗菌肽T1和Q7纯化及组成测定 | 第40-43页 |
| 2.5.1 抑菌活力测定 | 第40-41页 |
| 2.5.2 分离纯化抗菌肽 | 第41-42页 |
| 2.5.3 抗菌肽的纯度测定 | 第42页 |
| 2.5.4 抗菌肽T1和Q7分子量、构成及部分序列的测定 | 第42-43页 |
| 2.6 抗菌肽抑菌机理的研究 | 第43-47页 |
| 2.6.1 种抗菌肽抑制单增李斯特菌的机理 | 第43-45页 |
| 2.6.2 抑制荧光假单胞菌的机理 | 第45-47页 |
| 2.7 抗菌肽在食品中的应用 | 第47-51页 |
| 2.7.1 指示菌培养 | 第47页 |
| 2.7.2 抗菌肽样品制备 | 第47页 |
| 2.7.3 抗菌肽的用量 | 第47页 |
| 2.7.4 抗菌肽在牛奶中的应用 | 第47-48页 |
| 2.7.5 抗菌肽在肉类保藏中应用 | 第48-49页 |
| 2.7.6 抗菌肽在带鱼中的应用 | 第49-51页 |
| 第3章 抑制耐冷菌的乳酸菌抗菌肽筛选及性质研究 | 第51-65页 |
| 3.1 引言 | 第51页 |
| 3.2 筛选抑制耐冷菌的乳酸菌 | 第51-52页 |
| 3.3 具有抗菌活性的发酵液排除过氧化氢 | 第52-53页 |
| 3.4 抗菌物质的蛋白酶验证 | 第53-54页 |
| 3.5 确定抑菌蛋白为肽类抑菌物质 | 第54-56页 |
| 3.5.1 浓缩发酵液抑菌效果 | 第54-55页 |
| 3.5.2 抑菌肽分子量范围 | 第55-56页 |
| 3.6 产抗菌肽乳酸菌菌株的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.6.1 16S rDNA鉴定 | 第56-57页 |
| 3.6.2 API生理生化鉴定 | 第57页 |
| 3.7 抗菌肽T1和Q7理化性质研究 | 第57-64页 |
| 3.7.1 抗菌肽T1和Q7抑菌谱 | 第57-58页 |
| 3.7.2 温度对抗菌肽T1和Q7抑菌活性的影响 | 第58-59页 |
| 3.7.3 不同pH对抗菌肽T1和Q7抑菌活性的影响 | 第59-60页 |
| 3.7.4 酶对抗菌肽T1和Q7抑菌活性的影响 | 第60页 |
| 3.7.5 化学试剂对两种抗菌肽抑菌活性的影响 | 第60-64页 |
| 3.8 本章小结 | 第64-65页 |
| 第4章 抗菌肽T1和Q7分离纯化及构成的研究 | 第65-81页 |
| 4.1 引言 | 第65页 |
| 4.2 测定蛋白标准曲线 | 第65-66页 |
| 4.3 抗菌肽T1和Q7的分离纯化 | 第66-71页 |
| 4.3.1 乳酸菌发酵液的抑菌活性指标 | 第66页 |
| 4.3.2 SP-Sepharose Fast Flow纯化抗菌肽 | 第66-68页 |
| 4.3.3 CM- Fast Flow纯化抗菌肽 | 第68-69页 |
| 4.3.4 Superdex Peptide 10/300 GL分离纯化抗菌肽 | 第69-71页 |
| 4.3.5 HPLC检测抗菌肽纯度 | 第71页 |
| 4.4 抗菌肽T1和Q7的分子量 | 第71-73页 |
| 4.5 氨基酸组成成分析 | 第73-74页 |
| 4.6 抗菌肽T1和Q7指纹图谱分析 | 第74-77页 |
| 4.7 抗菌肽T1和Q7的N-端分析 | 第77-79页 |
| 4.8 本章小结 | 第79-81页 |
| 第5章 抗菌肽T1和Q7抑菌机理的研究 | 第81-96页 |
| 5.1 引言 | 第81页 |
| 5.2 抗菌肽抑菌单增李斯特菌的机理 | 第81-87页 |
| 5.2.1 抗菌肽抑制单增李斯特菌的活力 | 第82页 |
| 5.2.2 抗菌肽破坏单增李斯特菌的细胞膜完整性 | 第82-83页 |
| 5.2.3 抗菌肽对细胞膜流动性的破坏 | 第83-85页 |
| 5.2.4 抗菌肽对单增李斯特菌的质子动力的影响 | 第85-86页 |
| 5.2.5 钾离子和磷酸盐离子的泄露 | 第86-87页 |
| 5.3 抗菌肽抑制荧光假单胞菌的机理 | 第87-95页 |
| 5.3.1 抗菌肽抑制荧光假单胞菌的活力 | 第87-88页 |
| 5.3.2 抗菌肽破坏荧光假单胞菌的细胞膜完整性 | 第88-89页 |
| 5.3.3 抗菌肽对荧光假单胞菌外膜（脂多糖层）的破坏 | 第89-90页 |
| 5.3.4 抗菌肽与脂多糖的作用模式 | 第90-91页 |
| 5.3.5 抗菌肽对细胞膜破坏作用 | 第91-93页 |
| 5.3.6 抗菌肽对荧光假单胞菌质子动力的影响 | 第93-94页 |
| 5.3.7 抗菌肽对荧光假单胞菌胞外K+和磷酸盐离子浓度的影响 | 第94-95页 |
| 5.4 本章小结 | 第95-96页 |
| 第6章 抗菌肽T1和Q7在食品中的应用 | 第96-106页 |
| 6.1 引言 | 第96页 |
| 6.2 抗菌肽在牛奶中的应用 | 第96-99页 |
| 6.2.1 感官评价 | 第96-97页 |
| 6.2.2 保藏期间牛奶样品中荧光假单胞菌菌落数的变化 | 第97-98页 |
| 6.2.3 牛奶样品保藏期间pH的变化 | 第98-99页 |
| 6.3 抗菌肽在猪肉保鲜中的应用 | 第99-101页 |
| 6.3.1 感官评价 | 第99页 |
| 6.3.2 猪肉保藏期间荧光假单胞菌菌落数变化 | 第99-100页 |
| 6.3.3 猪肉中TVB-N的变化 | 第100-101页 |
| 6.4 抗菌肽对带鱼保鲜的结果 | 第101-105页 |
| 6.4.1 感官评价 | 第101-102页 |
| 6.4.2 菌落总数变化 | 第102-103页 |
| 6.4.3 带鱼中TVB-N的变化 | 第103-105页 |
| 6.5 本章小结 | 第105-106页 |
| 结论 | 第106-107页 |
| 创新点 | 第107页 |
| 展望 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-126页 |
| 附录 1 | 第126-127页 |
| 附录 2 | 第127-128页 |
| 附录 3 | 第128-129页 |
| 附录 4 | 第129-130页 |
| 附录 5 | 第130-131页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第131-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 个人简历 | 第134页 |
