| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10页 |
| 第1章 绪论 | 第11-19页 |
| 1.1 引言 | 第11-12页 |
| 1.2 甜味蛋白monellin的研究概述 | 第12-14页 |
| 1.2.1 甜味蛋白monellin的发现及蛋白结构 | 第12-13页 |
| 1.2.2 甜味蛋白 monellin 的生化性质 | 第13-14页 |
| 1.2.3 甜味蛋白monellin的应用前景 | 第14页 |
| 1.3 甜味蛋白monellin的基因工程 | 第14-15页 |
| 1.3.1 甜味蛋白monellin在原核生物中的表达 | 第14-15页 |
| 1.3.2 甜味蛋白monellin在真菌中的表达 | 第15页 |
| 1.3.3 甜味蛋白monellin在植物中的表达 | 第15页 |
| 1.4 甜味蛋白monellin甜味及稳定性等性质影响因素的研究 | 第15-16页 |
| 1.4.1 甜味蛋白monellin甜度的影响因素 | 第15-16页 |
| 1.4.2 甜味蛋白monellin稳定性的影响因素 | 第16页 |
| 1.4.3 其他影响甜味蛋白monellin性质的情况 | 第16页 |
| 1.5 研究意义及内容 | 第16-17页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第16页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 1.6 研究技术路线 | 第17-19页 |
| 1.6.1 甜味蛋白monellin重组质粒构建技术路线 | 第17-18页 |
| 1.6.2 甜味蛋白monellin突变体构建技术路线 | 第18页 |
| 1.6.3 甜味蛋白monellin及突变体蛋白性质的研究路线 | 第18-19页 |
| 第2章 甜味蛋白monellin基因表达载体的构建及在大肠杆菌中的克隆、表达和分离纯化 | 第19-35页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 材料 | 第19-24页 |
| 2.2.1 菌株、质粒、酶 | 第19页 |
| 2.2.2 试剂及药品 | 第19-20页 |
| 2.2.3 试剂配制方法 | 第20-22页 |
| 2.2.4 培养基的配制 | 第22-23页 |
| 2.2.5 感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| 2.3 仪器和设备 | 第24页 |
| 2.4 方法 | 第24-30页 |
| 2.4.1 甜味蛋白monellin的克隆 | 第24-27页 |
| 2.4.2 甜味蛋白monellin的表达 | 第27-28页 |
| 2.4.3 甜味蛋白monellin的分离纯化 | 第28页 |
| 2.4.4 甜味蛋白monellin的凝血酶酶切验证 | 第28-29页 |
| 2.4.5 甜味蛋白monellin的分子筛纯化 | 第29-30页 |
| 2.5 结果与分析 | 第30-33页 |
| 2.5.1 甜味蛋白monellin的克隆 | 第30页 |
| 2.5.2 蛋白进行SDS凝胶电泳分析 | 第30-31页 |
| 2.5.3 凝血酶酶切甜味蛋白monellin的结果分析 | 第31-32页 |
| 2.5.4 蛋白进行分子筛层析纯化结果 | 第32-33页 |
| 2.6 本章小结 | 第33-35页 |
| 第3章 甜味蛋白monellin甜味阈值及热稳定性的研究 | 第35-45页 |
| 3.1 引言 | 第35页 |
| 3.2 材料及试剂 | 第35-36页 |
| 3.3 仪器和设备 | 第36页 |
| 3.4 方法 | 第36-38页 |
| 3.4.1 甜味蛋白monellin的透析 | 第36-37页 |
| 3.4.2 甜味蛋白monellin浓度的测定 | 第37页 |
| 3.4.3 甜味蛋白monellin甜味阈值的测定 | 第37-38页 |
| 3.4.4 甜味蛋白monellin热稳定性的测定 | 第38页 |
| 3.5 结果与分析 | 第38-42页 |
| 3.5.1 甜味蛋白monellin透析结果 | 第38页 |
| 3.5.2 甜味蛋白质monellin浓度测定结果 | 第38-39页 |
| 3.5.3 甜味蛋白monellin及酶切后的蛋白甜味阈值鉴定结果 | 第39页 |
| 3.5.4 甜味蛋白monellin热稳定性测定结果 | 第39-41页 |
| 3.5.5 凝血酶酶切后的甜味蛋白monellin热稳定性测定结果 | 第41-42页 |
| 3.6 本章小结 | 第42-45页 |
| 第4章 甜味蛋白monellin基因突变的研究 | 第45-67页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 材料 | 第45-49页 |
| 4.2.1 菌株、质粒、酶 | 第45页 |
| 4.2.2 化学试剂及药品 | 第45-46页 |
| 4.2.3 试剂配制方法 | 第46-48页 |
| 4.2.4 培养基的配制 | 第48-49页 |
| 4.2.5 感受态细胞的制备 | 第49页 |
| 4.3 仪器和设备 | 第49-50页 |
| 4.4 方法 | 第50-55页 |
| 4.4.1 甜味蛋白monellin突变体的克隆 | 第50-54页 |
| 4.4.2 甜味蛋白monellin突变体基因的表达 | 第54-55页 |
| 4.4.3 甜味蛋白monellin突变体蛋白的分离纯化 | 第55页 |
| 4.4.4 甜味蛋白monellin突变体蛋白甜味阈值及热稳定性的研究 | 第55页 |
| 4.5 结果与分析 | 第55-65页 |
| 4.5.1 甜味蛋白monellin突变体的克隆 | 第55-56页 |
| 4.5.2 甜味蛋白monellin突变体蛋白进行SDS-PAGE凝胶电泳分析 | 第56-59页 |
| 4.5.3 甜味蛋白monellin突变体蛋白甜味阈值及热稳定性的研究 | 第59-63页 |
| 4.5.4 甜味蛋白monellin结构和功能关系的分析 | 第63-65页 |
| 4.6 本章小结 | 第65-67页 |
| 第5章 总结与展望 | 第67-69页 |
| 5.1 总结 | 第67-68页 |
| 5.2 展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 在校期间主要科研成果 | 第77页 |
