| 摘要 | 第9-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-22页 |
| 1.1 蜜蜂上颚腺的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 10-HDA概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 10-HDA简介 | 第13页 |
| 1.2.2 10-HDA的生理活性和生物学功能 | 第13-14页 |
| 1.2.3 10-HDA的生产方法 | 第14-15页 |
| 1.3 工蜂10-HDA合成相关途径 | 第15-17页 |
| 1.3.1 10-HDA合成起点的确定 | 第15-16页 |
| 1.3.2 羟基化和β-氧化顺序的确定 | 第16页 |
| 1.3.3 羟基修饰的反应方式 | 第16页 |
| 1.3.4 物质之间的相互转化 | 第16-17页 |
| 1.4 电子转移黄素蛋白β与3-酮酯酰CoA硫解酶 | 第17页 |
| 1.5 半定量RT-PCR技术 | 第17-18页 |
| 1.5.1 半定量RT-PCR简介 | 第17页 |
| 1.5.2 半定量RT-PCR技术的应用 | 第17-18页 |
| 1.6 RNA干扰技术概况 | 第18-20页 |
| 1.6.1 RNA干扰的发现 | 第18页 |
| 1.6.2 RNA干扰的作用机制 | 第18-19页 |
| 1.6.3 RNA干扰技术在功能基因组学研究中的应用 | 第19页 |
| 1.6.4 RNA干扰技术在蜂学领域的应用 | 第19-20页 |
| 1.7 本课题的立题背景及研究内容 | 第20-22页 |
| 1.7.1 立题背景 | 第20页 |
| 1.7.2 研究内容 | 第20-22页 |
| 第2章 ETF-β和KAT基因表达模式的研究 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 实验原料 | 第22页 |
| 2.1.2 引物 | 第22-23页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第23页 |
| 2.1.5 器具的处理及试剂配制 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 工蜂的标记与采集 | 第24页 |
| 2.2.2 工蜂上颚腺的获取 | 第24页 |
| 2.2.3 RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.4 cDNA的合成 | 第25页 |
| 2.2.5 扩增目的基因 | 第25-26页 |
| 2.2.6 半定量RT-PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第27-30页 |
| 2.3.1 工蜂上颚腺 | 第27页 |
| 2.3.2 蜜蜂总RNA的提取 | 第27页 |
| 2.3.3 目的基因片段的获取 | 第27-28页 |
| 2.3.4 ETF-β和KAT基因在不同组织中的表达模式 | 第28-29页 |
| 2.3.5 ETF-β和KAT基因在不同日龄工蜂上颚腺中的表达模式 | 第29-30页 |
| 2.4 本章小结 | 第30-32页 |
| 第3章 饲喂中长链脂肪酸对工蜂合成10-HDA的影响 | 第32-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.1.1 实验蜂群 | 第33页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第33页 |
| 3.1.3 仪器及设备 | 第33页 |
| 3.2 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.2.1 实验流程 | 第33-34页 |
| 3.2.2 花粉饲料的配制 | 第34页 |
| 3.2.3 工蜂的标记与采集 | 第34页 |
| 3.2.4 工蜂表征变化统计 | 第34页 |
| 3.2.5 标记蜂的处理 | 第34页 |
| 3.2.6 液相色谱条件 | 第34-35页 |
| 3.2.7 10-HDA标准溶液的配制 | 第35-36页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第36-44页 |
| 3.3.1 饲喂中长链脂肪酸对工蜂表征的影响 | 第36页 |
| 3.3.2 高效液相色谱法检测10-HDA | 第36-37页 |
| 3.3.3 花粉饲料添加前后工蜂合成10-HDA的比较 | 第37-38页 |
| 3.3.4 饲喂硬脂酸对工蜂合成10-HDA的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.5 饲喂癸酸对工蜂合成10-HDA的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.6 饲喂10-羟基癸酸对工蜂合成10-HDA的影响 | 第40页 |
| 3.3.7 中长链脂肪酸对工蜂ETF-β和KAT基因表达水平的影响 | 第40-42页 |
| 3.3.8 工蜂上颚腺10-HDA可能合成途径 | 第42-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 第4章 RNA干扰对工蜂合成10-HDA的影响 | 第46-56页 |
| 4.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.1.1 实验原料 | 第46-47页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第47页 |
| 4.1.3 仪器与设备 | 第47页 |
| 4.1.4 溶液的配制 | 第47页 |
| 4.2 实验方法 | 第47-50页 |
| 4.2.1 PCR扩增目的基因 | 第47页 |
| 4.2.2 PCR扩增产物的纯化 | 第47-48页 |
| 4.2.3 dsRNA的制备 | 第48页 |
| 4.2.4 dsRNA的纯化 | 第48-49页 |
| 4.2.5 dsRNA注射剂量的确定 | 第49页 |
| 4.2.6 RNA提取及cDNA合成 | 第49页 |
| 4.2.7 半定量RT-PCR检测 | 第49页 |
| 4.2.8 RNA干扰对工蜂合成10-HDA的影响 | 第49页 |
| 4.2.9 RNA干扰对工蜂上颚腺显微特征的影响 | 第49-50页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第50-54页 |
| 4.3.1 PCR扩增获取目的基因 | 第50-51页 |
| 4.3.2 dsRNA的制备 | 第51页 |
| 4.3.3 dsRNA注射剂量的确定 | 第51-52页 |
| 4.3.4 RNA干扰对ETF-β和KAT基因表达的影响 | 第52-53页 |
| 4.3.5 RNA干扰对工蜂合成 10-HDA的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.6 RNA干扰对工蜂上颚腺显微特征的影响 | 第54页 |
| 4.4 本章小结 | 第54-56页 |
| 第5章 总结与展望 | 第56-60页 |
| 5.1 总结 | 第56-57页 |
| 5.2 展望 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 硕士期间主要科研成果 | 第68页 |
