| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 Ⅱ型糖尿病及其及其治疗药物的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.1 Ⅱ型糖尿病简介 | 第13页 |
| 1.1.2 Ⅱ型糖尿病发病因素 | 第13-14页 |
| 1.1.3 治疗药物的研究进展 | 第14页 |
| 1.2 人胰高血糖素样肽-1（GLP-1）简介 | 第14-17页 |
| 1.2.1 GLP-1 的合成与分泌 | 第15-16页 |
| 1.2.2 GLP-1 的降糖作用机制 | 第16页 |
| 1.2.3 GLP-1 的优点及潜在风险 | 第16-17页 |
| 1.3 真核异源表达系统 | 第17-19页 |
| 1.3.1 解脂耶氏酵母表达系统 | 第17页 |
| 1.3.2 毕赤酵母表达系统 | 第17-18页 |
| 1.3.3 酿酒酵母表达系统 | 第18-19页 |
| 1.4 核糖体循环简介 | 第19-20页 |
| 1.4.1 真核生物核糖体超分子组织结构研究 | 第19页 |
| 1.4.2 真核生物的核糖体循环 | 第19-20页 |
| 1.5 本文主要研究内容及技术路线 | 第20-23页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第20-21页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第21-23页 |
| 第2章 酿酒酵母W303表达载体构建 | 第23-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌株 | 第23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23页 |
| 2.1.3 试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.4 仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-41页 |
| 2.2.1 构建质粒YCplac33-P_(GAL)-TIF3-T_(CYC1) | 第25-36页 |
| 2.2.2 构建质粒YEplac112-P_(CUP1)-GLP-1-RFP-T_(CYC1) | 第36-41页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第41-46页 |
| 2.3.1 YCplac33-P_(GAL)-TIF3-T_(CYC1)质粒的构建 | 第41-44页 |
| 2.3.2 YEplac112-P_(CUP1)-GLP-1-RFP-T_(CYC1)质粒的构建 | 第44-46页 |
| 2.4 本章小结 | 第46-47页 |
| 第3章 eIF4B上调表达对外源基因Glp-1 表达效率的影响 | 第47-61页 |
| 3.1 实验材料 | 第47-49页 |
| 3.1.1 菌株 | 第47页 |
| 3.1.2 培养基 | 第47-48页 |
| 3.1.3 试剂 | 第48-49页 |
| 3.1.4 仪器 | 第49页 |
| 3.2 实验方法 | 第49-54页 |
| 3.2.1 质粒提取 | 第49页 |
| 3.2.2 质粒YEplac112-P_(CUP1)-GLP-1-RFP-T_(CYC1)转化酿酒酵母W303菌株 | 第49-50页 |
| 3.2.3 酿酒酵母阳性重组子的鉴定 | 第50-51页 |
| 3.2.4 质粒YCplac33-P_(GAL)-TIF3-T_(CYC1)转化酿酒酵母W303菌株 | 第51页 |
| 3.2.5 酿酒酵母W303重组子的鉴定 | 第51-52页 |
| 3.2.6 YCplac33-P_(GAL)-TIF3-T_(CYC1)和YEplac112-P_(CUP1)-GLP-1-RFP-T_(CYC1)同时转化酿酒酵母W303菌株 | 第52页 |
| 3.2.7 酿酒酵母W303重组子的鉴定 | 第52-53页 |
| 3.2.8 酿酒酵母W303重组子的诱导表达 | 第53-54页 |
| 3.2.9 荧光显微镜检测 | 第54页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第54-59页 |
| 3.3.1 YCplac33-P_(GAL)-TIF3-T_(CYC1)和YEplac112-P_(CUP1)-GLP-1-RFP-T_(CYC1)转化酿酒酵母 | 第54-55页 |
| 3.3.2 酿酒酵母稳定重组子筛选 | 第55-56页 |
| 3.3.3 酿酒酵母阳性重组子鉴定 | 第56-58页 |
| 3.3.4 荧光显微镜检测 | 第58-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-61页 |
| 第4章 全文总结与展望 | 第61-65页 |
| 4.1 全文总结 | 第61-62页 |
| 4.2 展望 | 第62-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 在学期间主要的研究成果 | 第75页 |
