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酿酒酵母氮代谢阻遏机制解析和低产尿素黄酒发酵菌株选育

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第10-20页
    1.1 概述第10-11页
    1.2 酿酒酵母氮代谢调控机制第11-14页
        1.2.1 酿酒酵母氮代谢阻遏调控机制第11-13页
        1.2.2 酿酒酵母氨基酸氮源的利用和合成机制第13-14页
    1.3 黄酒发酵过程中氨基甲酸乙酯形成机制及消除策略第14-17页
        1.3.1 氨基甲酸乙酯的危害第14页
        1.3.2 氨基甲酸乙酯的生成第14页
        1.3.3 氨基甲酸乙酯的消除第14-17页
    1.4 本论文主要研究内容第17-20页
        1.4.1 立题依据及研究意义第17-18页
        1.4.2 本文主要研究内容第18-20页
第二章 酿酒酵母氮代谢阻遏调控因子对尿素代谢的影响第20-31页
    2.1 前言第20页
    2.2 材料与方法第20-25页
        2.2.1 菌株和质粒第20页
        2.2.2 试剂和仪器第20-22页
        2.2.3 培养基第22页
        2.2.4 分子生物学操作第22-24页
        2.2.5 荧光定量PCR第24页
        2.2.6 分析检测方法第24-25页
    2.3 结果与讨论第25-29页
        2.3.1 酿酒酵母GATA转录因子基因敲除对尿素代谢的影响第25-26页
        2.3.2 过量表达四种GATA转录因子基因对尿素代谢的影响第26-28页
        2.3.3 过量表达截断的GLN3和GAT1基因对尿素代谢的影响第28-29页
    2.4 本章小结第29-31页
第三章 酿酒酵母精氨酸转运蛋白对精氨酸及尿素代谢的影响第31-47页
    3.1 前言第31-32页
    3.2 材料与方法第32-36页
        3.2.1 菌株和质粒第32页
        3.2.2 试剂和仪器第32-33页
        3.2.3 培养基第33页
        3.2.4 分子生物学操作第33-35页
        3.2.5 荧光定量PCR第35页
        3.2.6 分析检测方法第35-36页
        3.2.7 Spotting assay分析第36页
    3.3 结果第36-46页
        3.3.1 酿酒酵母精氨酸转运蛋白对精氨酸代谢的影响第36-41页
        3.3.2 酿酒酵母精氨酸转运蛋白对尿素代谢的影响第41-46页
    3.4 本章小结第46-47页
第四章 酿酒酵母尿素转运蛋白Dur3p泛素化水平对尿素代谢的影响第47-56页
    4.1 前言第47页
    4.2 材料与方法第47-50页
        4.2.1 菌株和质粒第47页
        4.2.2 试剂和仪器第47页
        4.2.3 培养基第47-48页
        4.2.4 分子生物学操作第48-49页
        4.2.5 Dur3p泛素化水平分析第49-50页
        4.2.6 分析检测方法第50页
    4.3 结果与讨论第50-54页
        4.3.1 Dur3p泛素化位点预测及突变构建第50页
        4.3.2 Dur3p泛素化位点的膜定位分析第50-51页
        4.3.3 Dur3p在不同氮源条件下的泛素化水平检测第51-53页
        4.3.4 Dur3p泛素化位点突变对细胞生长及尿素利用的影响第53-54页
        4.3.5 Dur3p泛素化位点突变对尿素生成的影响第54页
    4.4 本章小结第54-56页
第五章 酿酒酵母核小体排布对氮代谢阻遏相关基因表达的影响第56-69页
    5.1 前言第56-57页
    5.2 材料与方法第57-60页
        5.2.1 菌株和质粒第57页
        5.2.2 试剂和仪器第57页
        5.2.3 培养基第57页
        5.2.4 核小体DNA测序第57-58页
        5.2.5 荧光定量PCR第58-60页
    5.3 结果与讨论第60-68页
        5.3.1 不同氮源条件下的核小体排布第60-61页
        5.3.2 不同氮源条件下TATA-containing和TATA-less基因的核小体排布第61-63页
        5.3.3 核小体的排布对不同基因类型的分布第63-65页
        5.3.4 不同氮源条件下核小体排布对氮代谢相关基因的表达的影响第65-67页
        5.3.5 NCR相关基因核小体排布与其基因表达的关联第67-68页
    5.4 本章小结第68-69页
第六章 适应性进化筛选低产尿素黄酒酵母第69-81页
    6.1 前言第69页
    6.2 材料与方法第69-74页
        6.2.1 菌株和质粒第69-70页
        6.2.2 试剂和仪器第70页
        6.2.3 培养基第70页
        6.2.4 分子生物学操作第70-71页
        6.2.5 分析检测方法第71页
        6.2.6 酿酒酵母N85进化菌株全基因组测序及比较基因组学分析第71-74页
    6.3 结果与讨论第74-80页
        6.3.1 酿酒酵母适应性进化筛选优化第74-75页
        6.3.2 酿酒酵母适应性进化菌株的初筛第75页
        6.3.3 酿酒酵母适应性进化菌株的复筛第75-76页
        6.3.4 低产尿素菌株的黄酒模拟发酵体系验证第76-77页
        6.3.5 野生型菌株和低产尿素菌株的比较基因组学分析第77-78页
        6.3.6 低产尿素相关基因的鉴定第78-80页
    6.4 本章小结第80-81页
主要结论与展望第81-83页
    主要结论第81-82页
    展望第82-83页
论文创新点第83-84页
致谢第84-85页
参考文献第85-93页
附录:作者在攻读博士期间发表的论文第93页

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