摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-20页 |
1.1 概述 | 第10-11页 |
1.2 酿酒酵母氮代谢调控机制 | 第11-14页 |
1.2.1 酿酒酵母氮代谢阻遏调控机制 | 第11-13页 |
1.2.2 酿酒酵母氨基酸氮源的利用和合成机制 | 第13-14页 |
1.3 黄酒发酵过程中氨基甲酸乙酯形成机制及消除策略 | 第14-17页 |
1.3.1 氨基甲酸乙酯的危害 | 第14页 |
1.3.2 氨基甲酸乙酯的生成 | 第14页 |
1.3.3 氨基甲酸乙酯的消除 | 第14-17页 |
1.4 本论文主要研究内容 | 第17-20页 |
1.4.1 立题依据及研究意义 | 第17-18页 |
1.4.2 本文主要研究内容 | 第18-20页 |
第二章 酿酒酵母氮代谢阻遏调控因子对尿素代谢的影响 | 第20-31页 |
2.1 前言 | 第20页 |
2.2 材料与方法 | 第20-25页 |
2.2.1 菌株和质粒 | 第20页 |
2.2.2 试剂和仪器 | 第20-22页 |
2.2.3 培养基 | 第22页 |
2.2.4 分子生物学操作 | 第22-24页 |
2.2.5 荧光定量PCR | 第24页 |
2.2.6 分析检测方法 | 第24-25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-29页 |
2.3.1 酿酒酵母GATA转录因子基因敲除对尿素代谢的影响 | 第25-26页 |
2.3.2 过量表达四种GATA转录因子基因对尿素代谢的影响 | 第26-28页 |
2.3.3 过量表达截断的GLN3和GAT1基因对尿素代谢的影响 | 第28-29页 |
2.4 本章小结 | 第29-31页 |
第三章 酿酒酵母精氨酸转运蛋白对精氨酸及尿素代谢的影响 | 第31-47页 |
3.1 前言 | 第31-32页 |
3.2 材料与方法 | 第32-36页 |
3.2.1 菌株和质粒 | 第32页 |
3.2.2 试剂和仪器 | 第32-33页 |
3.2.3 培养基 | 第33页 |
3.2.4 分子生物学操作 | 第33-35页 |
3.2.5 荧光定量PCR | 第35页 |
3.2.6 分析检测方法 | 第35-36页 |
3.2.7 Spotting assay分析 | 第36页 |
3.3 结果 | 第36-46页 |
3.3.1 酿酒酵母精氨酸转运蛋白对精氨酸代谢的影响 | 第36-41页 |
3.3.2 酿酒酵母精氨酸转运蛋白对尿素代谢的影响 | 第41-46页 |
3.4 本章小结 | 第46-47页 |
第四章 酿酒酵母尿素转运蛋白Dur3p泛素化水平对尿素代谢的影响 | 第47-56页 |
4.1 前言 | 第47页 |
4.2 材料与方法 | 第47-50页 |
4.2.1 菌株和质粒 | 第47页 |
4.2.2 试剂和仪器 | 第47页 |
4.2.3 培养基 | 第47-48页 |
4.2.4 分子生物学操作 | 第48-49页 |
4.2.5 Dur3p泛素化水平分析 | 第49-50页 |
4.2.6 分析检测方法 | 第50页 |
4.3 结果与讨论 | 第50-54页 |
4.3.1 Dur3p泛素化位点预测及突变构建 | 第50页 |
4.3.2 Dur3p泛素化位点的膜定位分析 | 第50-51页 |
4.3.3 Dur3p在不同氮源条件下的泛素化水平检测 | 第51-53页 |
4.3.4 Dur3p泛素化位点突变对细胞生长及尿素利用的影响 | 第53-54页 |
4.3.5 Dur3p泛素化位点突变对尿素生成的影响 | 第54页 |
4.4 本章小结 | 第54-56页 |
第五章 酿酒酵母核小体排布对氮代谢阻遏相关基因表达的影响 | 第56-69页 |
5.1 前言 | 第56-57页 |
5.2 材料与方法 | 第57-60页 |
5.2.1 菌株和质粒 | 第57页 |
5.2.2 试剂和仪器 | 第57页 |
5.2.3 培养基 | 第57页 |
5.2.4 核小体DNA测序 | 第57-58页 |
5.2.5 荧光定量PCR | 第58-60页 |
5.3 结果与讨论 | 第60-68页 |
5.3.1 不同氮源条件下的核小体排布 | 第60-61页 |
5.3.2 不同氮源条件下TATA-containing和TATA-less基因的核小体排布 | 第61-63页 |
5.3.3 核小体的排布对不同基因类型的分布 | 第63-65页 |
5.3.4 不同氮源条件下核小体排布对氮代谢相关基因的表达的影响 | 第65-67页 |
5.3.5 NCR相关基因核小体排布与其基因表达的关联 | 第67-68页 |
5.4 本章小结 | 第68-69页 |
第六章 适应性进化筛选低产尿素黄酒酵母 | 第69-81页 |
6.1 前言 | 第69页 |
6.2 材料与方法 | 第69-74页 |
6.2.1 菌株和质粒 | 第69-70页 |
6.2.2 试剂和仪器 | 第70页 |
6.2.3 培养基 | 第70页 |
6.2.4 分子生物学操作 | 第70-71页 |
6.2.5 分析检测方法 | 第71页 |
6.2.6 酿酒酵母N85进化菌株全基因组测序及比较基因组学分析 | 第71-74页 |
6.3 结果与讨论 | 第74-80页 |
6.3.1 酿酒酵母适应性进化筛选优化 | 第74-75页 |
6.3.2 酿酒酵母适应性进化菌株的初筛 | 第75页 |
6.3.3 酿酒酵母适应性进化菌株的复筛 | 第75-76页 |
6.3.4 低产尿素菌株的黄酒模拟发酵体系验证 | 第76-77页 |
6.3.5 野生型菌株和低产尿素菌株的比较基因组学分析 | 第77-78页 |
6.3.6 低产尿素相关基因的鉴定 | 第78-80页 |
6.4 本章小结 | 第80-81页 |
主要结论与展望 | 第81-83页 |
主要结论 | 第81-82页 |
展望 | 第82-83页 |
论文创新点 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
附录:作者在攻读博士期间发表的论文 | 第93页 |