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嗜热链球菌CRISPR-Cas系统的分析及抗噬菌体机制的研究

摘要第8-10页
英文摘要第10-11页
1 前言第12-27页
    1.1 立题背景第12页
    1.2 研究目的及意义第12-13页
    1.3 主要研究内容第13页
    1.4 课题来源第13-14页
    1.5 文献综述第14-27页
        1.5.1 乳酸菌概述第14页
        1.5.2 乳酸菌噬菌体第14-16页
        1.5.3 乳酸菌的抗噬菌体机制第16-17页
        1.5.4 CRISPR-Cas系统的结构与类型第17-21页
        1.5.5 CRISPR-Cas系统的作用机制第21-23页
        1.5.6 噬菌体不敏感突变(BIMs)第23-24页
        1.5.7 噬菌体抗CRISPR机制第24-27页
2 材料与方法第27-32页
    2.1 实验材料第27-28页
        2.1.1 菌种第27页
        2.1.2 培养基第27页
        2.1.3 主要试剂第27-28页
        2.1.4 主要仪器第28页
    2.2 实验方法第28-32页
        2.2.1 乳酸菌CRISPR-Cas系统的预测及同源性分析第28-29页
        2.2.2 嗜热链球菌CRISPR-Cas系统的检测第29-30页
        2.2.3 嗜热链球菌抗噬菌体机制研究第30-31页
        2.2.4 抗性菌株的发酵性能测定第31-32页
3 结果与分析第32-63页
    3.1 乳酸菌CRISPR-Cas系统同源性分析第32-40页
        3.1.1 乳酸菌CRISPR-Cas系统结构图第32-36页
        3.1.2 重复序列同源性分析第36页
        3.1.3 Cas蛋白同源性分析第36-40页
    3.2 嗜热链球菌CRISPR-Cas系统的检测第40-52页
        3.2.1 嗜热链球菌CRISPR序列的扩增与测序第40-41页
        3.2.2 供试嗜热链球菌CRISPR序列的检测第41页
        3.2.3 不同类型CRISPR-Cas系统标志cas基因的同源性分析第41-43页
        3.2.4 嗜热链球菌cas基因的扩增与测序第43-46页
        3.2.5 间隔序列同源性分析第46-50页
        3.2.6 重复序列同源性分析第50-51页
        3.2.7 CRISPR基因座活性分析第51-52页
    3.3 嗜热链球菌抗噬菌体机制研究第52-59页
        3.3.1 噬菌体效价的测定第52-53页
        3.3.2 噬菌体不敏感突变菌株(BIMs)的筛选第53页
        3.3.3 宿主菌CRISPR序列扩增结果第53-54页
        3.3.4 重复序列二级结构分析第54-55页
        3.3.5 St-Ⅰ间隔序列同源性分析第55-57页
        3.3.6 PAM预测第57页
        3.3.7 BIM CRISPR扩增结果第57-59页
    3.4 抗性菌株发酵性能测定第59-63页
        3.4.1 抗性菌株发酵性能初步测定第59-61页
        3.4.2 抗性菌株在高噬菌体环境下的发酵性能测定第61-63页
4 讨论第63-67页
    4.1 乳酸菌CRISPR-Cas系统的同源性第63页
    4.2 嗜热链球菌CRISPR-Cas系统的结构特征第63-64页
    4.3 嗜热链球菌St-Ⅰ及其噬菌体不敏感突变菌株的CRISPR系统第64-65页
    4.4 抗性菌株的发酵性能第65-67页
5 结论第67-68页
致谢第68-69页
参考文献第69-78页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第78页

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