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冷藏过程中草鱼肌肉关键蛋白质的变化分析

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第12-26页
    1.1 我国淡水鱼资源现状第12-13页
    1.2 草鱼简介第13页
    1.3 淡水鱼死后肌肉组织的变化第13-14页
        1.3.1 淡水鱼死后早期的生化变化第13页
        1.3.2 死后僵硬第13-14页
        1.3.3 解僵与自溶第14页
        1.3.4 腐败第14页
    1.4 蛋白质组学的定义及研究内容第14-22页
        1.4.1 蛋白质组学的定义第14-15页
        1.4.2 蛋白质组学的研究基础第15页
        1.4.3 蛋白质组学的研究内容第15-16页
        1.4.4 蛋白质组学的研究方法和核心技术第16-22页
            1.4.4.1 双向电泳凝胶技术第16-20页
            1.4.4.2 质谱技术第20-21页
            1.4.4.3 生物信息学第21-22页
    1.5 蛋白质组学在生物宰后贮藏过程中的变化的研究第22-23页
    1.6 本课题的研究目的、意义和内容第23-26页
        1.6.1 本课题的研究意义第23-24页
        1.6.2 本课题的研究目的第24-25页
        1.6.3 本课题的研究内容第25-26页
第二章 冷藏过程中草鱼肌原纤维蛋白的变化规律第26-44页
    2.1 引言第26-27页
    2.2 实验材料与设备第27-29页
        2.2.1 主要材料与试剂第27-28页
        2.2.2 实验仪器第28-29页
    2.3 实验方法第29-32页
        2.3.1 不同冷藏时间点肌原纤维蛋白样品的制备第29页
        2.3.2 肌原纤维蛋白SDS-PAGE分析第29页
        2.3.3 巯基与二硫键含量的变化分析第29-30页
        2.3.4 反相液相色谱法PRLC测定蛋白质表面疏水性的变化第30页
        2.3.5 热力学性质变化分析第30页
        2.3.6 蛋白质显微结构的变化分析第30-31页
        2.3.7 二级结构的变化分析第31页
        2.3.8 肌球蛋白Ca~(2+)-ATPase活性的变化分析第31-32页
            2.3.8.1 肌动球蛋白的提取第31页
            2.3.8.2 酶活的测定第31-32页
    2.4 实验结果与分析第32-42页
        2.4.1 肌原纤维蛋白SDS-PAGE分析第32-34页
        2.4.2 热力学性质变化分析第34-35页
        2.4.3 蛋白质显微结构的变化分析第35-36页
        2.4.4 表面疏水性的变化分析第36-37页
        2.4.5 二级结构的变化分析第37-39页
        2.4.6 Ca~(2+)-ATPase活性的变化分析第39-40页
        2.4.7 疏基与二硫键含量的变化分析第40-42页
    2.5 讨论第42-43页
    2.6 本章小结第43-44页
第三章 冷藏过程中草鱼肌肉蛋白质组学研究第44-77页
    3.1 引言第44页
    3.2 实验材料与设备第44-47页
        3.2.1 主要材料与试剂第44-46页
        3.2.2 实验仪器第46-47页
    3.3 实验方法第47-58页
        3.3.1 双向电泳主要试剂的配制第47-50页
        3.3.2 蛋白质的提纯和定量第50-52页
            3.3.2.1 关键时间点草鱼样品的制备第50页
            3.3.2.2 草鱼肉组织的研磨第50页
            3.3.2.3 蛋白质的提取第50-51页
            3.3.2.4 蛋白质的纯化第51页
            3.3.2.5 蛋白质的定量第51-52页
        3.3.3 双向电泳第52-55页
            3.3.3.1 第一向等点聚焦(IEF电泳)第52-53页
            3.3.3.2 二向凝胶的灌制第53页
            3.3.3.3 胶条的平衡第53页
            3.3.3.4 第二向SDS-PAGE凝胶电泳第53-54页
            3.3.3.5 染色第54-55页
            3.3.3.6 图像的扫描与分析第55页
        3.3.4 差异蛋白质的质谱鉴定第55-58页
            3.3.4.1 质谱前准备第55-57页
            3.3.4.2 质谱检测第57页
            3.3.4.3 数据库检索第57-58页
    3.4 实验结果与分析第58-75页
        3.4.1 应用SDS-PAGE技术分析草鱼肌肉总蛋白的变化第58-59页
        3.4.2 2-DE双向电泳技术对草鱼肌肉的差异蛋白分析第59-68页
            3.4.2.1 冷藏过程中草鱼肌肉差异蛋白点第59-61页
            3.4.2.2 质谱鉴定待切点的选择第61-68页
        3.4.3 冷藏过程中草鱼肌肉差异蛋白的质谱鉴定及功能分析第68-75页
    3.5 讨论第75-76页
    3.6 本章小结第76-77页
第四章 主要结论与创新点第77-79页
    4.1 本研究的主要结论第77-78页
    4.2 本研究的创新点和意义第78页
    4.3 今后努力和研究的方向第78-79页
参考文献第79-85页
致谢第85-86页
附录A(攻读学位期间所发表的论文)第86-87页
附录B(部分蛋白MALDI TOF&TOF/TOF肽指纹图谱)第87-93页

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