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野生食用菌松茸内标准基因筛选及恒温检测技术的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
基金资助第9-13页
主要仪器设备表第13-14页
主要缩略词表第14-15页
第一章 文献综述第15-37页
    1.1 国内外松茸市场的发展现状及趋势第15页
    1.2 松茸产品鉴伪检测技术的研究现状第15-19页
        1.2.1 形态识别法第16页
        1.2.2 理化检测法第16-17页
        1.2.3 分子生物学法第17-19页
    1.3 国内外核酸体外扩增技术的研究现状第19-32页
        1.3.1 依赖于特异性引物延伸的等温扩增技术第19-26页
        1.3.2 依赖于切刻内切酶的等温扩增技术第26-32页
    1.4 国内外胶体金核酸试纸条的研究现状第32-35页
        1.4.1 胶体金免疫层析的类型与原理第32-34页
        1.4.2 胶体金核酸层析研究现状第34-35页
    1.5 研究目的与意义第35页
    1.6 研究内容第35-37页
        1.6.1 野生菌松茸基因组DNA提取方法的对比研究第36页
        1.6.2 野生菌松茸内标准基因的筛选研究第36页
        1.6.3 LAMP技术体系的建立研究第36页
        1.6.4 胶体金核酸层析技术的建立与应用研究第36-37页
第二章 野生菌松茸基因组DNA的提取第37-47页
    2.1 引言第37页
    2.2 材料与试剂第37-39页
        2.2.1 实验材料第37页
        2.2.2 实验试剂第37-39页
    2.3 实验方法第39-42页
        2.3.1 野生菌松茸基因组DNA提取方法第39-41页
        2.3.2 紫外吸收法测定野生菌松茸基因组DNA浓度与纯度第41页
        2.3.3 野生菌松茸基因组DNA的酶切检测第41-42页
        2.3.4 真菌通用引物18S PCR检测第42页
    2.4 结果与分析第42-45页
        2.4.1 野生菌松茸基因组DNA的电泳分析第42-43页
        2.4.2 野生菌松茸基因组DNA浓度与纯度的测定第43-44页
        2.4.3 野生菌松茸基因组DNA的酶切分析第44-45页
        2.4.4 野生菌松茸基因组DNA的PCR扩增第45页
    2.5 本章讨论第45-47页
第三章 野生菌松茸内标准基因的开发第47-61页
    3.1 引言第47页
    3.2 材料与试剂第47-48页
        3.2.1 实验材料第47-48页
        3.2.2 实验试剂第48页
    3.3 实验方法第48-51页
        3.3.1 松茸内标准基因筛选第48-49页
        3.3.2 松茸内标准基因物种特异性的验证第49-50页
        3.3.3 松茸内标准基因灵敏度的检测第50-51页
        3.3.4 松茸内标准基因拷贝数的检测第51页
        3.3.5 松茸内标准基因等位变异的检测第51页
    3.4 实验结果第51-59页
        3.4.1 松茸内标准基因的筛选与引物设计第51-52页
        3.4.2 松茸内标准基因物种特异性的验证结果第52-56页
        3.4.3 松茸内标准基因灵敏度的检测结果第56-57页
        3.4.4 松茸pol基因拷贝数的检测结果第57-58页
        3.4.5 松茸pol基因等位变异的检测结果第58-59页
    3.5 本章讨论第59-61页
第四章 环介导等温扩增——胶体金核酸试纸条检测体系的建立第61-83页
    4.1 引言第61页
    4.2 材料与试剂第61-62页
        4.2.1 实验材料第61页
        4.2.2 实验试剂第61-62页
    4.3 实验方法第62-67页
        4.3.1 LAMP引物设计第62-63页
        4.3.2 LAMP反应体系及程序第63-64页
        4.3.3 LAMP反应条件优化第64-65页
        4.3.4 定性LAMP灵敏度的检测第65页
        4.3.5 定量LAMP灵敏度的检测第65页
        4.3.6 LAMP—胶体金核酸试纸条检测体系的建立第65-66页
        4.3.7 LAMP—胶体金核酸试纸条检测体系的应用第66-67页
    4.4 实验结果第67-79页
        4.4.1 LAMP引物的确定结果第67-68页
        4.4.2 LAMP反应条件的优化结果第68-73页
        4.4.3 定性LAMP灵敏度的检测结果第73-74页
        4.4.4 定量LAMP灵敏度的检测结果第74-75页
        4.4.5 LAMP——胶体金核酸试纸条检测体系的建立第75-78页
        4.4.6 LAMP——胶体金核酸试纸条检测体系的应用第78-79页
    4.5 本章讨论第79-83页
第五章 结论与展望第83-85页
    5.1 本研究主要结论第83页
    5.2 展望第83-85页
致谢第85-87页
参考文献第87-99页
附录第99页

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