摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
基金资助 | 第9-13页 |
主要仪器设备表 | 第13-14页 |
主要缩略词表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-37页 |
1.1 国内外松茸市场的发展现状及趋势 | 第15页 |
1.2 松茸产品鉴伪检测技术的研究现状 | 第15-19页 |
1.2.1 形态识别法 | 第16页 |
1.2.2 理化检测法 | 第16-17页 |
1.2.3 分子生物学法 | 第17-19页 |
1.3 国内外核酸体外扩增技术的研究现状 | 第19-32页 |
1.3.1 依赖于特异性引物延伸的等温扩增技术 | 第19-26页 |
1.3.2 依赖于切刻内切酶的等温扩增技术 | 第26-32页 |
1.4 国内外胶体金核酸试纸条的研究现状 | 第32-35页 |
1.4.1 胶体金免疫层析的类型与原理 | 第32-34页 |
1.4.2 胶体金核酸层析研究现状 | 第34-35页 |
1.5 研究目的与意义 | 第35页 |
1.6 研究内容 | 第35-37页 |
1.6.1 野生菌松茸基因组DNA提取方法的对比研究 | 第36页 |
1.6.2 野生菌松茸内标准基因的筛选研究 | 第36页 |
1.6.3 LAMP技术体系的建立研究 | 第36页 |
1.6.4 胶体金核酸层析技术的建立与应用研究 | 第36-37页 |
第二章 野生菌松茸基因组DNA的提取 | 第37-47页 |
2.1 引言 | 第37页 |
2.2 材料与试剂 | 第37-39页 |
2.2.1 实验材料 | 第37页 |
2.2.2 实验试剂 | 第37-39页 |
2.3 实验方法 | 第39-42页 |
2.3.1 野生菌松茸基因组DNA提取方法 | 第39-41页 |
2.3.2 紫外吸收法测定野生菌松茸基因组DNA浓度与纯度 | 第41页 |
2.3.3 野生菌松茸基因组DNA的酶切检测 | 第41-42页 |
2.3.4 真菌通用引物18S PCR检测 | 第42页 |
2.4 结果与分析 | 第42-45页 |
2.4.1 野生菌松茸基因组DNA的电泳分析 | 第42-43页 |
2.4.2 野生菌松茸基因组DNA浓度与纯度的测定 | 第43-44页 |
2.4.3 野生菌松茸基因组DNA的酶切分析 | 第44-45页 |
2.4.4 野生菌松茸基因组DNA的PCR扩增 | 第45页 |
2.5 本章讨论 | 第45-47页 |
第三章 野生菌松茸内标准基因的开发 | 第47-61页 |
3.1 引言 | 第47页 |
3.2 材料与试剂 | 第47-48页 |
3.2.1 实验材料 | 第47-48页 |
3.2.2 实验试剂 | 第48页 |
3.3 实验方法 | 第48-51页 |
3.3.1 松茸内标准基因筛选 | 第48-49页 |
3.3.2 松茸内标准基因物种特异性的验证 | 第49-50页 |
3.3.3 松茸内标准基因灵敏度的检测 | 第50-51页 |
3.3.4 松茸内标准基因拷贝数的检测 | 第51页 |
3.3.5 松茸内标准基因等位变异的检测 | 第51页 |
3.4 实验结果 | 第51-59页 |
3.4.1 松茸内标准基因的筛选与引物设计 | 第51-52页 |
3.4.2 松茸内标准基因物种特异性的验证结果 | 第52-56页 |
3.4.3 松茸内标准基因灵敏度的检测结果 | 第56-57页 |
3.4.4 松茸pol基因拷贝数的检测结果 | 第57-58页 |
3.4.5 松茸pol基因等位变异的检测结果 | 第58-59页 |
3.5 本章讨论 | 第59-61页 |
第四章 环介导等温扩增——胶体金核酸试纸条检测体系的建立 | 第61-83页 |
4.1 引言 | 第61页 |
4.2 材料与试剂 | 第61-62页 |
4.2.1 实验材料 | 第61页 |
4.2.2 实验试剂 | 第61-62页 |
4.3 实验方法 | 第62-67页 |
4.3.1 LAMP引物设计 | 第62-63页 |
4.3.2 LAMP反应体系及程序 | 第63-64页 |
4.3.3 LAMP反应条件优化 | 第64-65页 |
4.3.4 定性LAMP灵敏度的检测 | 第65页 |
4.3.5 定量LAMP灵敏度的检测 | 第65页 |
4.3.6 LAMP—胶体金核酸试纸条检测体系的建立 | 第65-66页 |
4.3.7 LAMP—胶体金核酸试纸条检测体系的应用 | 第66-67页 |
4.4 实验结果 | 第67-79页 |
4.4.1 LAMP引物的确定结果 | 第67-68页 |
4.4.2 LAMP反应条件的优化结果 | 第68-73页 |
4.4.3 定性LAMP灵敏度的检测结果 | 第73-74页 |
4.4.4 定量LAMP灵敏度的检测结果 | 第74-75页 |
4.4.5 LAMP——胶体金核酸试纸条检测体系的建立 | 第75-78页 |
4.4.6 LAMP——胶体金核酸试纸条检测体系的应用 | 第78-79页 |
4.5 本章讨论 | 第79-83页 |
第五章 结论与展望 | 第83-85页 |
5.1 本研究主要结论 | 第83页 |
5.2 展望 | 第83-85页 |
致谢 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-99页 |
附录 | 第99页 |