| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 第1章 文献综述 | 第8-18页 |
| 1.1 黄酮类化合物及其应用前景 | 第8-13页 |
| 1.1.1 黄酮类化合物简介 | 第8-9页 |
| 1.1.2 黄酮类化合物相关功能研究 | 第9-13页 |
| 1.2 黄酮类化合物合成方法 | 第13-15页 |
| 1.2.1 植物提取 | 第13页 |
| 1.2.2 化学合成 | 第13-14页 |
| 1.2.3 合成生物学方法 | 第14-15页 |
| 1.3 微生物合成黄酮类化合物的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3.1 利用大肠杆菌生产黄酮类化合物 | 第15-16页 |
| 1.3.2 利用酿酒酵母生产黄酮类化合物及其优势 | 第16页 |
| 1.4 本课题的研究内容及意义 | 第16-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-26页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19-21页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第21-23页 |
| 2.1.4 培养基 | 第23-25页 |
| 2.1.5 溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.2 基因元件的获得 | 第26-27页 |
| 2.3 分子实验操作 | 第27-32页 |
| 2.3.1 大肠杆菌的质粒提取 | 第27页 |
| 2.3.2 PCR | 第27-29页 |
| 2.3.3 酶切反应 | 第29页 |
| 2.3.4 普通DNA产物回收 | 第29-30页 |
| 2.3.5 大肠杆菌连接转化 | 第30-31页 |
| 2.3.6 大肠杆菌转化验证 | 第31页 |
| 2.3.7 酵母转化 | 第31页 |
| 2.3.8 酵母质粒提取 | 第31-32页 |
| 2.3.9 酵母基因组提取 | 第32页 |
| 2.4 发酵培养 | 第32-33页 |
| 2.4.1 深孔板发酵 | 第32-33页 |
| 2.4.2 摇瓶发酵 | 第33页 |
| 2.4.3 混菌摇瓶发酵 | 第33页 |
| 2.5 产物提取与检测 | 第33-36页 |
| 2.5.1 产物提取方法 | 第33-34页 |
| 2.5.2 紫外液相色谱检测条件 | 第34页 |
| 2.5.3 标准曲线的测定 | 第34-36页 |
| 第3章 产柚皮素酿酒酵母菌株的构建 | 第36-50页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 柚皮素功能模块构建 | 第36-38页 |
| 3.3 产柚皮素酵母菌株的发酵检测 | 第38-43页 |
| 3.3.1 Delta位点整合柚皮素路径的酵母菌株筛选 | 第38-39页 |
| 3.3.2 菌体生长曲线测定 | 第39-40页 |
| 3.3.3 柚皮素产物合成随时间变化分析 | 第40-43页 |
| 3.4 混菌发酵生产柚皮素的体系优化 | 第43-48页 |
| 3.4.1 酿酒酵母初始接种比例对混菌发酵的影响 | 第43-45页 |
| 3.4.2 底物木糖添加方式对混菌发酵过程的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.3 不同培养基组成对混菌体系发酵的影响 | 第46-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 第4章 产花旗松素酵母菌株的构建与发酵 | 第50-58页 |
| 4.1 引言 | 第50页 |
| 4.2 花旗松素功能模块构建 | 第50-52页 |
| 4.3 花旗松素菌株发酵检测 | 第52-55页 |
| 4.3.1 菌体生长曲线测定 | 第52页 |
| 4.3.2 花旗松素产物曲线测定 | 第52-54页 |
| 4.3.3 香豆酰-CoA连接酶的路径限制解除 | 第54-55页 |
| 4.4 路径后续黄酮类产物功能模块构建 | 第55-56页 |
| 4.5 本章小结 | 第56-58页 |
| 第5章 结论与展望 | 第58-60页 |
| 5.1 结论 | 第58-59页 |
| 5.2 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72页 |