| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 食物过敏及花生致敏原 | 第12-13页 |
| 1.1.1 食物过敏 | 第12页 |
| 1.1.2 花生致敏原 | 第12-13页 |
| 1.2 食物致敏原检测技术 | 第13-14页 |
| 1.2.1 致敏原检测技术 | 第13页 |
| 1.2.2 食物过敏诊断技术 | 第13-14页 |
| 1.3 加工方式对食物致敏原抗原反应性的影响 | 第14-15页 |
| 1.3.1 典型热加工 | 第14页 |
| 1.3.2 发芽 | 第14-15页 |
| 1.3.3 高温高压 | 第15页 |
| 1.4 致敏蛋白诱发过敏的关键影响因素 | 第15-19页 |
| 1.4.1 经口食物过敏反应的基本生理过程 | 第15-16页 |
| 1.4.2 致敏原消化稳定性与过敏反应 | 第16-17页 |
| 1.4.3 致敏原抗原表位与过敏反应 | 第17页 |
| 1.4.4 食物过敏的病理学机制 | 第17-19页 |
| 1.5 本课题的研究目的及意义 | 第19页 |
| 1.6 本课题的主要研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 典型热加工处理及发芽对花生致敏原的影响 | 第20-37页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.1 试验材料与试剂 | 第20-21页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第21页 |
| 2.3 试验方法 | 第21-24页 |
| 2.3.1 主要试剂的制备 | 第21-22页 |
| 2.3.2 花生粗蛋白及Ara h1的制备 | 第22页 |
| 2.3.3 兔源多克隆抗体的制备 | 第22页 |
| 2.3.4 花生的热加工处理及Ara h1高温高压处理 | 第22-23页 |
| 2.3.5 花生发芽及样品保存 | 第23页 |
| 2.3.6 样品中可溶性蛋白的提取及其含量的测定 | 第23页 |
| 2.3.7 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23页 |
| 2.3.8 免疫印迹 | 第23-24页 |
| 2.3.9 间接竟争ELISA | 第24页 |
| 2.3.10 Ara h1的质谱鉴定 | 第24页 |
| 2.3.11 数据处理与分析 | 第24页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第24-36页 |
| 2.4.1 热加工处理后样品中可溶性蛋白含量的变化 | 第24-25页 |
| 2.4.2 热加工处理后样品中蛋白的电泳特征变化 | 第25-26页 |
| 2.4.3 热加工处理后样品中致敏蛋白免疫反应性的变化 | 第26-28页 |
| 2.4.4 花生发芽过程中可溶性蛋白含量的变化 | 第28-29页 |
| 2.4.5 花生发芽过程中蛋白提取物的电泳图谱的变化 | 第29-31页 |
| 2.4.6 花生发芽过程中致敏蛋白免疫反应性的变化 | 第31-32页 |
| 2.4.7 高温高压处理后样品中可溶性蛋白含量的变化 | 第32-33页 |
| 2.4.8 高温高压处理后样品中可溶性蛋白电泳图谱的变化 | 第33-34页 |
| 2.4.9 高温高压处理后样品中可溶性蛋白免疫反应性的变化 | 第34-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 高温高压处理对致敏原消化稳定性的影响 | 第37-44页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第37-38页 |
| 3.2.1 试验材料与试剂 | 第37页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第37-38页 |
| 3.3 试验方法 | 第38-39页 |
| 3.3.1 主要试剂的制备 | 第38页 |
| 3.3.2 蛋白液的稀释和制备 | 第38页 |
| 3.3.3 胃消化模拟液的制备、反应及取样 | 第38页 |
| 3.3.4 肠消化模拟液的制备、反应及取样 | 第38页 |
| 3.3.5 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第38页 |
| 3.3.6 免疫印迹 | 第38-39页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第39-43页 |
| 3.4.1 SGF作用后Ara h1电泳图谱的变化 | 第39-40页 |
| 3.4.2 SGF作用后Ara h1的免疫印迹杂交图 | 第40-41页 |
| 3.4.3 SIF作用后Ara h1电泳图谱的变化 | 第41-42页 |
| 3.4.4 SIF作用后Ara h1的免疫印迹杂交图 | 第42-43页 |
| 3.5 本章小结 | 第43-44页 |
| 第四章 致敏原高温高压处理对小鼠过敏反应的影响 | 第44-52页 |
| 4.1 引言 | 第44页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第44-45页 |
| 4.2.1 试验材料与试剂 | 第44-45页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第45页 |
| 4.3 试验方法 | 第45-47页 |
| 4.3.1 花生过敏小鼠模型的建立与血清的保存 | 第45页 |
| 4.3.2 试验动物过敏反应评价 | 第45-46页 |
| 4.3.3 特异性IgE的测定 | 第46页 |
| 4.3.4 肥大细胞酶-1 的测定 | 第46页 |
| 4.3.5 过敏组织化学测定 | 第46页 |
| 4.3.6 致敏原高温高压处理后对小鼠过敏反应的影响 | 第46页 |
| 4.3.7 类胰蛋白酶的测定 | 第46-47页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第47-51页 |
| 4.4.1 致敏原灌胃小鼠的过敏反应体征评分 | 第47页 |
| 4.4.2 致敏原灌胃小鼠的特异性IgE水平 | 第47-48页 |
| 4.4.3 致敏原灌胃小鼠的肥大细胞酶-1 含量 | 第48页 |
| 4.4.4 致敏原灌胃小鼠的肥大细胞脱颗粒作用组织切片 | 第48-49页 |
| 4.4.5 Arah1高温高压处理后灌胃小鼠的过敏反应体征评分 | 第49-50页 |
| 4.4.6 Arah1高温高压处理后灌胃小鼠的特异性IgE水平 | 第50页 |
| 4.4.7 Arah1高温高压处理后灌胃小鼠的MCPT-1 含量 | 第50-51页 |
| 4.5 本章小结 | 第51-52页 |
| 第五章 高温高压处理对免疫细胞激活能力的影响 | 第52-62页 |
| 5.1 引言 | 第52页 |
| 5.2 材料与仪器 | 第52-53页 |
| 5.2.1 试验材料与试剂 | 第52页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第52-53页 |
| 5.3 试验方法 | 第53-54页 |
| 5.3.1 脾细胞增殖试验 | 第53页 |
| 5.3.2 致敏原蛋白体外刺激试验 | 第53页 |
| 5.3.3 脾细胞的分离及流式检测 | 第53页 |
| 5.3.4 腹腔肥大细胞脱颗粒试验 | 第53-54页 |
| 5.3.5 过敏相关细胞因子及抗体的测定 | 第54页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第54-61页 |
| 5.4.1 脾细胞体外刺激增殖测定结果 | 第54-55页 |
| 5.4.2 脾脏淋巴细胞流式分型结果 | 第55-57页 |
| 5.4.3 Th1相关细胞因子测定结果 | 第57-58页 |
| 5.4.4 Th2相关细胞因子测定结果 | 第58-59页 |
| 5.4.5 双向调节细胞因子TGF-β 测定结果 | 第59-60页 |
| 5.4.6 肥大细胞体外脱颗粒作用测定结果 | 第60-61页 |
| 5.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第六章 高温高压处理对致敏原结构的影响 | 第62-71页 |
| 6.1 引言 | 第62页 |
| 6.2 材料与仪器 | 第62-63页 |
| 6.2.1 试验材料与试剂 | 第62页 |
| 6.2.2 主要仪器 | 第62-63页 |
| 6.3 试验方法 | 第63-64页 |
| 6.3.1 蛋白凝集的主要作用力分析 | 第63页 |
| 6.3.2 Zata电位及粒度分析 | 第63页 |
| 6.3.3 原子力显微镜观测蛋白微观结构 | 第63页 |
| 6.3.4 圆二色谱分析 | 第63页 |
| 6.3.5 内源荧光分析 | 第63页 |
| 6.3.6 蛋白疏水性测定 | 第63-64页 |
| 6.4 结果与讨论 | 第64-70页 |
| 6.4.1 蛋白质凝集主要作用力 | 第64-65页 |
| 6.4.2 粒度及Zata电位 | 第65-66页 |
| 6.4.3 原子力显微结构 | 第66-67页 |
| 6.4.4 圆二色谱 | 第67-68页 |
| 6.4.5 内源荧光 | 第68-69页 |
| 6.4.6 蛋白质疏水性 | 第69-70页 |
| 6.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 主要结论与展望 | 第71-73页 |
| 主要结论 | 第71-72页 |
| 展望 | 第72-73页 |
| 论文主要创新点 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 附录 | 第82-83页 |
