摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
缩略词 | 第15-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-31页 |
1.1 多糖的提取及分离纯化 | 第17-19页 |
1.2 多糖的结构分析方法 | 第19-20页 |
1.3 多糖的生物活性研究 | 第20-25页 |
1.3.1 多糖对肠道菌群的影响 | 第20-22页 |
1.3.2 多糖的降血糖降血脂作用 | 第22-23页 |
1.3.3 多糖的免疫调节活性 | 第23-25页 |
1.3.4 多糖的其他生物活性 | 第25页 |
1.4 多糖/蛋白复合体系在营养递送系统中的应用 | 第25-27页 |
1.5 沙蒿多糖的研究现状 | 第27-28页 |
1.6 课题研究的主要意义及研究内容 | 第28-31页 |
1.6.1 研究的主要内容 | 第28页 |
1.6.2 课题研究的意义 | 第28-29页 |
1.6.3 创新点 | 第29-30页 |
1.6.4 实验技术路线 | 第30-31页 |
第二章 沙蒿多糖对高果糖诱导小鼠胰岛素抵抗及肝脏脂肪变性的保护作用 | 第31-49页 |
2.1 引言 | 第31页 |
2.2 试验材料与仪器 | 第31-35页 |
2.2.1 实验原料与试剂 | 第31-32页 |
2.2.2 实验仪器与设备 | 第32页 |
2.2.3 ASKP的提取 | 第32-33页 |
2.2.4 ASKP的单糖组成分析 | 第33页 |
2.2.5 ASKP的抗氧化能力测定 | 第33-34页 |
2.2.6 动物实验设计 | 第34-35页 |
2.2.7 血清生化指标分析 | 第35页 |
2.2.8 口服葡萄糖耐量实验 | 第35页 |
2.2.9 肝脏生化指标分析 | 第35页 |
2.2.10 肝脏及脂肪组织的病理学切片 | 第35页 |
2.2.11 数据处理与统计分析 | 第35页 |
2.3 结果与分析 | 第35-45页 |
2.3.1 ASKP的单糖组成分析结果 | 第36页 |
2.3.2 ASKP的体外抗氧化活性 | 第36-37页 |
2.3.3 ASKP对小鼠体重及肝体指数的影响 | 第37-38页 |
2.3.4 ASKP对小鼠血糖、血胰岛素及胰岛素敏感指数的影响 | 第38-39页 |
2.3.5 口服葡萄糖耐量实验 | 第39-40页 |
2.3.6 ASKP对小鼠血清AST与ALT活性的影响 | 第40页 |
2.3.7 ASKP对小鼠肝脏脂肪含量的影响 | 第40-41页 |
2.3.8 ASKP拮抗高果糖引起的肝脏氧化应激 | 第41-42页 |
2.3.9 肝脏及腹部脂肪组织的病理学切片观察 | 第42-44页 |
2.3.10 小鼠血清及肝脏生化指标聚类分析 | 第44-45页 |
2.4 讨论 | 第45-47页 |
2.5 小结 | 第47-49页 |
第三章 沙蒿多糖通过重塑肠道菌群改善高果糖诱发小鼠肝脂变性的机制研究 | 第49-69页 |
3.1 引言 | 第49-50页 |
3.2 实验材料与仪器 | 第50页 |
3.2.1 实验原料与试剂 | 第50页 |
3.2.2 实验仪器 | 第50页 |
3.3 实验方法 | 第50-53页 |
3.3.1 动物实验设计 | 第50-51页 |
3.3.2 血清及肝脏生化指标的测定 | 第51页 |
3.3.3 小鼠血清及肝脏脂肪酸代谢轮廓分析 | 第51页 |
3.3.4 16S rDNA高通量测序检测小鼠肠道菌群组成 | 第51-53页 |
3.3.5 数据处理与统计分析 | 第53页 |
3.4 结果与分析 | 第53-65页 |
3.4.1 小鼠血清内毒素与尿酸测定结果 | 第53-54页 |
3.4.2 小鼠血清炎症因子的测定结果 | 第54-55页 |
3.4.3 ASKP对脂肪生成酶FAS、SCD-1、ACC表达的影响 | 第55-56页 |
3.4.4 高果糖膳食对小鼠脂肪酸代谢的影响 | 第56-59页 |
3.4.5 ASKP对高果糖诱导的小鼠脂肪酸代谢紊乱的影响 | 第59-60页 |
3.4.6 ASKP对小鼠肠道菌群的影响 | 第60-65页 |
3.5 讨论 | 第65-68页 |
3.6 小结 | 第68-69页 |
第四章 沙蒿多糖ASKP-1的结构表征及其通过MAPK,PI3K/Akt,NF-κB信号通路激活巨噬细胞的分子机制研究 | 第69-93页 |
4.1 引言 | 第69-70页 |
4.2 实验材料及仪器 | 第70-71页 |
4.2.1 实验材料 | 第70页 |
4.2.2 实验仪器与设备 | 第70-71页 |
4.3 实验方法 | 第71-76页 |
4.3.1 ASKP的分离纯化 | 第71-72页 |
4.3.2 ASKP-1相对分子质量的测定多糖组分纯度的鉴定 | 第72页 |
4.3.3 ASKP-1的单糖组成分析 | 第72页 |
4.3.4 ASKP-1的紫外(UV)和红外(FT-IR)分析 | 第72页 |
4.3.5 ASKP-1的环境扫描电镜分析 | 第72页 |
4.3.6 ASKP-1的甲基化分析 | 第72-73页 |
4.3.7 细胞培养条件 | 第73页 |
4.3.8 MTT法测定细胞存活率细胞培养条件 | 第73页 |
4.3.9 DAPI染色观察细胞形态 | 第73页 |
4.3.10 内毒素污染检测 | 第73-74页 |
4.3.11 NO和细胞因子检测 | 第74页 |
4.3.12 倒置荧光显微镜检测细胞内ROS的水平 | 第74页 |
4.3.13 流式细胞术检测细胞内ROS的水平 | 第74页 |
4.3.14 RAW264.7吞噬活性检测 | 第74-75页 |
4.3.15 Western Blot检测细胞蛋白表达 | 第75页 |
4.3.16 TLR4受体阻断剂对RAW264.7细胞释放NO和TNF-α的影响 | 第75页 |
4.3.17 免疫荧光染色法对核转录因子NF-κB的检测 | 第75-76页 |
4.3.18 数据统计与分析 | 第76页 |
4.4 结果与分析 | 第76-88页 |
4.4.1 ASKP的分离纯化 | 第76-77页 |
4.4.2 ASKP-1的结构表征 | 第77-80页 |
4.4.3 细胞存活率及细胞形态学变化分析 | 第80-81页 |
4.4.4 ASKP-1对巨噬细胞分泌NO和细胞因子的影响 | 第81-82页 |
4.4.5 ASKP-1中内毒素的检测 | 第82-83页 |
4.4.6 ASKP-1对巨噬细胞RAW264.7吞噬活性的影响 | 第83页 |
4.4.7 ASKP-1对RAW264.7细胞内活性氧的影响 | 第83-84页 |
4.4.8 ASKP-1对MAPK和PI3K/Akt信号通路的影响 | 第84-85页 |
4.4.9 MAPK三个亚基及PI3K抑制剂对ASKP-1激活巨噬细胞的影响 | 第85-86页 |
4.4.10 ASKP-1对核转录因子NF-κB的影响 | 第86-87页 |
4.4.11 ASKP-1免疫调节作用靶点的识别 | 第87-88页 |
4.5 讨论 | 第88-90页 |
4.6 本章小结 | 第90-93页 |
第五章 沙蒿酸性多糖ASKP-3与溶菌酶纳米复合物的自组装及其负载姜黄素的稳态化递送研究 | 第93-115页 |
5.1 引言 | 第93-94页 |
5.2 实验材料及仪器 | 第94-95页 |
5.2.1 实验材料 | 第94页 |
5.2.2 实验仪器与设备 | 第94-95页 |
5.3 实验方法 | 第95-99页 |
5.3.1 ASKP-3的分离纯化 | 第95页 |
5.3.2 ASKP-3的结构表征 | 第95页 |
5.3.3 溶菌酶Ly和ASKP-3复合溶液的制备 | 第95页 |
5.3.4 优化Ly/ASKP-3纳米复合物合成的最佳条件 | 第95-96页 |
5.3.5 Ly/ASKP-3纳米复合物的表征 | 第96-97页 |
5.3.6 姜黄素Cur的负载 | 第97页 |
5.3.7 HPLC分析Cur在磷酸盐缓冲液中的稳定性 | 第97-98页 |
5.3.8 HPLC分析Cur在1640细胞培养液中的稳定性 | 第98页 |
5.3.9 细胞培养 | 第98页 |
5.3.10 细胞毒性试验 | 第98页 |
5.3.11 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第98-99页 |
5.3.12 HepG-2细胞对负载Cur纳米复合物的吞噬研究 | 第99页 |
5.3.13 小鼠血清中Cur含量测定 | 第99页 |
5.3.14 数据分析 | 第99页 |
5.4 结果与讨论 | 第99-113页 |
5.4.1 ASKP-3的分离纯化 | 第99-100页 |
5.4.2 ASKP-3的结构表征 | 第100-101页 |
5.4.3 Ly/ASKP-3纳米复合物的形成 | 第101-103页 |
5.4.4 Ly/ASKP-3纳米复合物相互作用的影响因素 | 第103-104页 |
5.4.5 Ly/ASKP-3纳米复合物的表征 | 第104-105页 |
5.4.6 载Cur Ly/ASKP-3纳米复合物的制备 | 第105页 |
5.4.7 Cur-loaded Ly/ASKP-3纳米复合物在PBS中的稳定性 | 第105-107页 |
5.4.8 Cur在1640细胞培养液中的稳定性 | 第107-109页 |
5.4.9 体外细胞毒性和凋亡实验 | 第109-111页 |
5.4.10 Cur-纳米复合物的细胞吞噬研究 | 第111-112页 |
5.4.11 小鼠血清Cur含量的测定 | 第112-113页 |
5.5 本章小结 | 第113-115页 |
第六章 结论与展望 | 第115-119页 |
6.1 结论 | 第115-116页 |
6.2 展望 | 第116-119页 |
参考文献 | 第119-139页 |
致谢 | 第139-141页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第141-144页 |