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沙蒿多糖的肝损伤保护、免疫调节及其载运姜黄素的稳态化递送

摘要第3-6页
Abstract第6-9页
缩略词第15-17页
第一章 文献综述第17-31页
    1.1 多糖的提取及分离纯化第17-19页
    1.2 多糖的结构分析方法第19-20页
    1.3 多糖的生物活性研究第20-25页
        1.3.1 多糖对肠道菌群的影响第20-22页
        1.3.2 多糖的降血糖降血脂作用第22-23页
        1.3.3 多糖的免疫调节活性第23-25页
        1.3.4 多糖的其他生物活性第25页
    1.4 多糖/蛋白复合体系在营养递送系统中的应用第25-27页
    1.5 沙蒿多糖的研究现状第27-28页
    1.6 课题研究的主要意义及研究内容第28-31页
        1.6.1 研究的主要内容第28页
        1.6.2 课题研究的意义第28-29页
        1.6.3 创新点第29-30页
        1.6.4 实验技术路线第30-31页
第二章 沙蒿多糖对高果糖诱导小鼠胰岛素抵抗及肝脏脂肪变性的保护作用第31-49页
    2.1 引言第31页
    2.2 试验材料与仪器第31-35页
        2.2.1 实验原料与试剂第31-32页
        2.2.2 实验仪器与设备第32页
        2.2.3 ASKP的提取第32-33页
        2.2.4 ASKP的单糖组成分析第33页
        2.2.5 ASKP的抗氧化能力测定第33-34页
        2.2.6 动物实验设计第34-35页
        2.2.7 血清生化指标分析第35页
        2.2.8 口服葡萄糖耐量实验第35页
        2.2.9 肝脏生化指标分析第35页
        2.2.10 肝脏及脂肪组织的病理学切片第35页
        2.2.11 数据处理与统计分析第35页
    2.3 结果与分析第35-45页
        2.3.1 ASKP的单糖组成分析结果第36页
        2.3.2 ASKP的体外抗氧化活性第36-37页
        2.3.3 ASKP对小鼠体重及肝体指数的影响第37-38页
        2.3.4 ASKP对小鼠血糖、血胰岛素及胰岛素敏感指数的影响第38-39页
        2.3.5 口服葡萄糖耐量实验第39-40页
        2.3.6 ASKP对小鼠血清AST与ALT活性的影响第40页
        2.3.7 ASKP对小鼠肝脏脂肪含量的影响第40-41页
        2.3.8 ASKP拮抗高果糖引起的肝脏氧化应激第41-42页
        2.3.9 肝脏及腹部脂肪组织的病理学切片观察第42-44页
        2.3.10 小鼠血清及肝脏生化指标聚类分析第44-45页
    2.4 讨论第45-47页
    2.5 小结第47-49页
第三章 沙蒿多糖通过重塑肠道菌群改善高果糖诱发小鼠肝脂变性的机制研究第49-69页
    3.1 引言第49-50页
    3.2 实验材料与仪器第50页
        3.2.1 实验原料与试剂第50页
        3.2.2 实验仪器第50页
    3.3 实验方法第50-53页
        3.3.1 动物实验设计第50-51页
        3.3.2 血清及肝脏生化指标的测定第51页
        3.3.3 小鼠血清及肝脏脂肪酸代谢轮廓分析第51页
        3.3.4 16S rDNA高通量测序检测小鼠肠道菌群组成第51-53页
        3.3.5 数据处理与统计分析第53页
    3.4 结果与分析第53-65页
        3.4.1 小鼠血清内毒素与尿酸测定结果第53-54页
        3.4.2 小鼠血清炎症因子的测定结果第54-55页
        3.4.3 ASKP对脂肪生成酶FAS、SCD-1、ACC表达的影响第55-56页
        3.4.4 高果糖膳食对小鼠脂肪酸代谢的影响第56-59页
        3.4.5 ASKP对高果糖诱导的小鼠脂肪酸代谢紊乱的影响第59-60页
        3.4.6 ASKP对小鼠肠道菌群的影响第60-65页
    3.5 讨论第65-68页
    3.6 小结第68-69页
第四章 沙蒿多糖ASKP-1的结构表征及其通过MAPK,PI3K/Akt,NF-κB信号通路激活巨噬细胞的分子机制研究第69-93页
    4.1 引言第69-70页
    4.2 实验材料及仪器第70-71页
        4.2.1 实验材料第70页
        4.2.2 实验仪器与设备第70-71页
    4.3 实验方法第71-76页
        4.3.1 ASKP的分离纯化第71-72页
        4.3.2 ASKP-1相对分子质量的测定多糖组分纯度的鉴定第72页
        4.3.3 ASKP-1的单糖组成分析第72页
        4.3.4 ASKP-1的紫外(UV)和红外(FT-IR)分析第72页
        4.3.5 ASKP-1的环境扫描电镜分析第72页
        4.3.6 ASKP-1的甲基化分析第72-73页
        4.3.7 细胞培养条件第73页
        4.3.8 MTT法测定细胞存活率细胞培养条件第73页
        4.3.9 DAPI染色观察细胞形态第73页
        4.3.10 内毒素污染检测第73-74页
        4.3.11 NO和细胞因子检测第74页
        4.3.12 倒置荧光显微镜检测细胞内ROS的水平第74页
        4.3.13 流式细胞术检测细胞内ROS的水平第74页
        4.3.14 RAW264.7吞噬活性检测第74-75页
        4.3.15 Western Blot检测细胞蛋白表达第75页
        4.3.16 TLR4受体阻断剂对RAW264.7细胞释放NO和TNF-α的影响第75页
        4.3.17 免疫荧光染色法对核转录因子NF-κB的检测第75-76页
        4.3.18 数据统计与分析第76页
    4.4 结果与分析第76-88页
        4.4.1 ASKP的分离纯化第76-77页
        4.4.2 ASKP-1的结构表征第77-80页
        4.4.3 细胞存活率及细胞形态学变化分析第80-81页
        4.4.4 ASKP-1对巨噬细胞分泌NO和细胞因子的影响第81-82页
        4.4.5 ASKP-1中内毒素的检测第82-83页
        4.4.6 ASKP-1对巨噬细胞RAW264.7吞噬活性的影响第83页
        4.4.7 ASKP-1对RAW264.7细胞内活性氧的影响第83-84页
        4.4.8 ASKP-1对MAPK和PI3K/Akt信号通路的影响第84-85页
        4.4.9 MAPK三个亚基及PI3K抑制剂对ASKP-1激活巨噬细胞的影响第85-86页
        4.4.10 ASKP-1对核转录因子NF-κB的影响第86-87页
        4.4.11 ASKP-1免疫调节作用靶点的识别第87-88页
    4.5 讨论第88-90页
    4.6 本章小结第90-93页
第五章 沙蒿酸性多糖ASKP-3与溶菌酶纳米复合物的自组装及其负载姜黄素的稳态化递送研究第93-115页
    5.1 引言第93-94页
    5.2 实验材料及仪器第94-95页
        5.2.1 实验材料第94页
        5.2.2 实验仪器与设备第94-95页
    5.3 实验方法第95-99页
        5.3.1 ASKP-3的分离纯化第95页
        5.3.2 ASKP-3的结构表征第95页
        5.3.3 溶菌酶Ly和ASKP-3复合溶液的制备第95页
        5.3.4 优化Ly/ASKP-3纳米复合物合成的最佳条件第95-96页
        5.3.5 Ly/ASKP-3纳米复合物的表征第96-97页
        5.3.6 姜黄素Cur的负载第97页
        5.3.7 HPLC分析Cur在磷酸盐缓冲液中的稳定性第97-98页
        5.3.8 HPLC分析Cur在1640细胞培养液中的稳定性第98页
        5.3.9 细胞培养第98页
        5.3.10 细胞毒性试验第98页
        5.3.11 Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡第98-99页
        5.3.12 HepG-2细胞对负载Cur纳米复合物的吞噬研究第99页
        5.3.13 小鼠血清中Cur含量测定第99页
        5.3.14 数据分析第99页
    5.4 结果与讨论第99-113页
        5.4.1 ASKP-3的分离纯化第99-100页
        5.4.2 ASKP-3的结构表征第100-101页
        5.4.3 Ly/ASKP-3纳米复合物的形成第101-103页
        5.4.4 Ly/ASKP-3纳米复合物相互作用的影响因素第103-104页
        5.4.5 Ly/ASKP-3纳米复合物的表征第104-105页
        5.4.6 载Cur Ly/ASKP-3纳米复合物的制备第105页
        5.4.7 Cur-loaded Ly/ASKP-3纳米复合物在PBS中的稳定性第105-107页
        5.4.8 Cur在1640细胞培养液中的稳定性第107-109页
        5.4.9 体外细胞毒性和凋亡实验第109-111页
        5.4.10 Cur-纳米复合物的细胞吞噬研究第111-112页
        5.4.11 小鼠血清Cur含量的测定第112-113页
    5.5 本章小结第113-115页
第六章 结论与展望第115-119页
    6.1 结论第115-116页
    6.2 展望第116-119页
参考文献第119-139页
致谢第139-141页
攻读学位期间的研究成果第141-144页

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