| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-34页 |
| ·启动子概述 | 第14-16页 |
| ·启动子的结构与功能 | 第14-16页 |
| ·启动子在代谢工程中的应用 | 第16页 |
| ·启动子工程策略 | 第16-20页 |
| ·Ep-PCR | 第17页 |
| ·启动子间隔区的饱和突变 | 第17-19页 |
| ·启动子的杂交 | 第19-20页 |
| ·转录因子结合位点对启动子的作用 | 第20页 |
| ·合成生物学 | 第20-25页 |
| ·合成生物学概述 | 第20页 |
| ·合成生物学、系统生物学、组学技术与代谢工程的关系 | 第20-21页 |
| ·合成生物学中用到的策略及方法 | 第21-25页 |
| ·酶法降解木聚糖 | 第25-29页 |
| ·概述 | 第25-26页 |
| ·木聚糖酶 | 第26-27页 |
| ·α-L-阿拉伯糖苷酶 | 第27-28页 |
| ·β-木糖苷酶 | 第28页 |
| ·α-葡萄糖醛酸苷酶 | 第28页 |
| ·木聚糖酶法降解应用实例 | 第28-29页 |
| ·木糖醇的生产 | 第29-32页 |
| ·木糖醇概述 | 第29页 |
| ·化学法生产木糖醇 | 第29-30页 |
| ·生物法生产木糖醇 | 第30-32页 |
| ·课题的研究意义与论文研究框架 | 第32-34页 |
| ·研究意义和研究内容 | 第32-33页 |
| ·论文研究框架 | 第33-34页 |
| 第2章 酿酒酵母启动子的克隆及特性表征 | 第34-62页 |
| 引言 | 第34-35页 |
| ·材料与方法 | 第35-48页 |
| ·菌种与试剂 | 第35-38页 |
| ·仪器 | 第38页 |
| ·培养方法 | 第38-39页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第39-46页 |
| ·荧光显微镜检测方法 | 第46页 |
| ·流式细胞仪检测荧光强度方法 | 第46页 |
| ·LacZ 酶活测定方法 | 第46页 |
| ·发酵液成分的检测方法 | 第46-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-61页 |
| ·酿酒酵母基因组数据发掘 | 第48页 |
| ·启动子的克隆与 eGFP 报告基因载体构建 | 第48-54页 |
| ·酿酒酵母转化与启动子的表征 | 第54-59页 |
| ·酿酒酵母启动子强度随细胞生长的变化 | 第59-60页 |
| ·碳源对酿酒酵母启动子强度的影响 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| 第3章 转录因子结合位点对酿酒酵母启动子的影响 | 第62-87页 |
| 引言 | 第62页 |
| ·材料与方法 | 第62-68页 |
| ·菌种与试剂 | 第62-64页 |
| ·仪器 | 第64-65页 |
| ·培养方法 | 第65页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第65-68页 |
| ·LacZ 酶活测定方法 | 第68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-86页 |
| ·转录因子结合位点对启动子功能的重要性 | 第68-71页 |
| ·转录因子结合位点对启动子功能的调控 | 第71-76页 |
| ·不同拷贝数的转录因子结合位点对启动子功能的调控 | 第76-80页 |
| ·不同来源的转录因子结合位点的组合对启动子功能的调控 | 第80-86页 |
| ·小结 | 第86-87页 |
| 第4章 酿酒酵母利用木聚糖转化木糖醇途径的构建与优化 | 第87-108页 |
| 引言 | 第87页 |
| ·材料与方法 | 第87-95页 |
| ·菌种与试剂 | 第87-90页 |
| ·仪器 | 第90页 |
| ·培养方法 | 第90-91页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第91-93页 |
| ·发酵液成分的检测方法 | 第93-95页 |
| ·结果与讨论 | 第95-107页 |
| ·利用木聚糖转化木糖醇的酿酒酵母工程菌的构建 | 第95-98页 |
| ·利用木聚糖转化木糖醇的酿酒酵母工程菌的转录水平优化 | 第98-101页 |
| ·利用木聚糖转化木糖醇酿酒酵母工程菌中相关基因的转录水平分析 | 第101-103页 |
| ·不同碳源对酿酒酵母工程菌的影响 | 第103-104页 |
| ·微好氧条件下酿酒酵母工程菌的木糖醇转化情况 | 第104-106页 |
| ·微好氧间歇补料条件下酿酒酵母工程菌的木糖醇转化情况 | 第106-107页 |
| ·小结 | 第107-108页 |
| 第5章 大肠杆菌启动子的克隆、表征及应用 | 第108-130页 |
| 引言 | 第108页 |
| ·材料与方法 | 第108-117页 |
| ·菌种与试剂 | 第108-111页 |
| ·仪器 | 第111-112页 |
| ·培养方法 | 第112页 |
| ·分子生物学操作方法 | 第112-115页 |
| ·流式细胞仪检测荧光强度方法 | 第115页 |
| ·蛋白质浓度测定方法 | 第115-116页 |
| ·木糖还原酶酶活测定方法 | 第116页 |
| ·发酵液成分的检测方法 | 第116-117页 |
| ·SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第117页 |
| ·结果与讨论 | 第117-128页 |
| ·大肠杆菌启动子的克隆与表征 | 第117-122页 |
| ·大肠杆菌木糖醇生产菌株的构建 | 第122-125页 |
| ·大肠杆菌木糖醇生产菌株的发酵优化 | 第125-127页 |
| ·大肠杆菌利用组成型和诱导型启动子生产木糖醇的比较 | 第127-128页 |
| ·小结 | 第128-130页 |
| 第6章 结论与展望 | 第130-133页 |
| ·结论 | 第130-131页 |
| ·创新点 | 第131-132页 |
| ·对今后工作的建议与展望 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-145页 |
| 附录 | 第145-150页 |
| 攻读学位期间发表论文与研究成果清单 | 第150-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 作者简介 | 第152页 |
