| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第11-20页 |
| 1 胰蛋白酶和胰蛋白酶原 | 第11-12页 |
| 2 胰蛋白酶的分离纯化 | 第12-13页 |
| 2.1 鱼类胰蛋白酶分离纯化研究进展 | 第12页 |
| 2.2 鱼类胰蛋白酶分离纯化方法 | 第12-13页 |
| 3 鱼类胰蛋白酶性质及影响因素的研究 | 第13-16页 |
| 3.1 鱼类胰蛋白酶相对分子量的研究 | 第13页 |
| 3.2 鱼类胰蛋白酶的等电点和同源性的研究 | 第13-14页 |
| 3.3 pH对鱼类胰蛋白酶活性的影响 | 第14页 |
| 3.4 温度对鱼类胰蛋白酶活性的影响 | 第14-15页 |
| 3.5 金属离子和抑制剂对鱼类胰蛋白酶活性的影响 | 第15-16页 |
| 4 鱼类的不同食性 | 第16-17页 |
| 5 饲料因素对消化酶活性的影响的研究 | 第17页 |
| 6 对蛋白质离体消化率的研究 | 第17-18页 |
| 7 胰蛋白酶的应用 | 第18-19页 |
| 8 本文研究内容 | 第19-20页 |
| 第2章 不同食性鱼类胰蛋白酶的分离纯化 | 第20-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 实验鱼 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方案 | 第21页 |
| 2.3 基本实验过程 | 第21-23页 |
| 2.3.1 胰蛋白酶粗酶液的提取 | 第21页 |
| 2.3.2 硫酸铵分级沉淀 | 第21-22页 |
| 2.3.3 胰蛋白酶活性测定 | 第22页 |
| 2.3.4 蛋白含量测定 | 第22-23页 |
| 2.3.5 制备蛋白标准曲线 | 第23页 |
| 2.3.6 样品蛋白含量的测定 | 第23页 |
| 2.4 透析 | 第23-25页 |
| 2.4.1 透析袋预处理 | 第24页 |
| 2.4.2 透析袋的重复利用 | 第24-25页 |
| 2.4.3 胰蛋白酶粗提液的透析 | 第25页 |
| 2.5 亲和层析 | 第25-26页 |
| 2.5.1 上样 | 第25-26页 |
| 2.5.2 洗脱 | 第26页 |
| 2.5.3 清洗和再生 | 第26页 |
| 2.6 胰蛋白酶相对分子量的测定 | 第26-29页 |
| 2.6.1 主要试剂 | 第27-28页 |
| 2.6.2 SDS-PAGE电泳操作步骤 | 第28-29页 |
| 2.7 实验结果与分析 | 第29-34页 |
| 2.7.1 不同食性鱼类胰蛋白酶硫酸铵盐析最佳条件的确定 | 第29-31页 |
| 2.7.2 不同食性鱼类胰蛋白酶亲和层析图谱 | 第31-33页 |
| 2.7.3 不同食性鱼类胰蛋白酶相对分子量的测定 | 第33页 |
| 2.7.4 不同食性鱼类胰蛋白酶分离纯化结果 | 第33-34页 |
| 2.8 讨论 | 第34-38页 |
| 2.8.1 胰蛋白粗提液的提取及酶活力测定的底物选取 | 第34-35页 |
| 2.8.2 不同食性鱼类胰蛋白酶的硫酸铵分级沉淀 | 第35页 |
| 2.8.3 亲和层析 | 第35-36页 |
| 2.8.4 SDS-PAGE电泳 | 第36-38页 |
| 第3章 不同食性鱼类胰蛋白酶部分性质的比较研究 | 第38-50页 |
| 3.1 不同食性鱼类胰蛋白酶性质的测定 | 第38-40页 |
| 3.1.1 胰蛋白酶催化BAPNA反应米氏常数(Km)的测定 | 第38-39页 |
| 3.1.2 胰蛋白酶最适温度的测定 | 第39页 |
| 3.1.3 胰蛋白酶最适pH的测定 | 第39页 |
| 3.1.4 胰蛋白酶热稳定性的测定 | 第39-40页 |
| 3.1.5 胰蛋白酶酸碱稳定性的测定 | 第40页 |
| 3.1.6 金属离子和EDTA对胰蛋白酶活性的影响 | 第40页 |
| 3.2 结果与分析 | 第40-47页 |
| 3.2.1 不同食性鱼类胰蛋白酶的米氏常数Km | 第42页 |
| 3.2.2 不同食性鱼类胰蛋白酶的最适pH | 第42-43页 |
| 3.2.3 不同食性鱼类胰蛋白酶的最适温度 | 第43页 |
| 3.2.4 不同食性鱼类胰蛋白酶的酸碱稳定性 | 第43-45页 |
| 3.2.5 不同食性鱼类胰蛋白酶的热稳定性 | 第45页 |
| 3.2.6 金属离子和EDTA对不同食性鱼类胰蛋白酶活性的影响 | 第45-47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-50页 |
| 3.3.1 不同食性鱼类胰蛋白酶的米氏常数Km | 第47页 |
| 3.3.2 pH对不同食性鱼类胰蛋白酶活性的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.3 温度对不同食性鱼类胰蛋白酶活性的影响 | 第48页 |
| 3.3.4 金属离子和抑制剂对不同食性鱼类胰蛋白酶活性的影响 | 第48-50页 |
| 第4章 不同食性鱼类胰蛋白酶消化能力的比较研究 | 第50-62页 |
| 4.1 主要仪器 | 第50页 |
| 4.2 实验材料 | 第50-51页 |
| 4.3 主要试剂 | 第51页 |
| 4.4 技术路线 | 第51页 |
| 4.5 胰蛋白酶酶解动力学研究 | 第51-54页 |
| 4.5.1 亮氨酸标准曲线的制作 | 第51-52页 |
| 4.5.2 酶解 | 第52-53页 |
| 4.5.3 氨基酸生成量的测定 | 第53页 |
| 4.5.4 氨基酸生成速率 | 第53-54页 |
| 4.6 消化能力的测定 | 第54页 |
| 4.6.1 离体消化率的测定 | 第54页 |
| 4.6.2 离体消化率的计算 | 第54页 |
| 4.6.3 统计分析 | 第54页 |
| 4.7 结果和分析 | 第54-59页 |
| 4.7.1 不同食性鱼类胰蛋白酶对蛋白质酶解产生氨基酸量随时间的变化曲线 | 第54-56页 |
| 4.7.2 不同食性鱼类胰蛋白酶酶解氨基酸生成量的回归方程和氨基酸生成速率 | 第56-58页 |
| 4.7.3 不同食性鱼类胰蛋白酶对蛋白质的离体消化率 | 第58-59页 |
| 4.8 讨论 | 第59-62页 |
| 4.8.1 不同食性鱼类胰蛋白酶对蛋白质的酶解动力学 | 第59-60页 |
| 4.8.2 不同食性鱼类胰蛋白酶对蛋白质的离体消化率 | 第60-61页 |
| 4.8.3 蛋白质的酶解动力学与离体消化率 | 第61-62页 |
| 第5章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 结论 | 第62-63页 |
| 5.1.1 不同食性鱼类胰蛋白酶的分离纯化 | 第62页 |
| 5.1.2 不同食性鱼类胰蛋白酶部分性质的比较研究 | 第62-63页 |
| 5.1.3 不同食性鱼类胰蛋白酶对蛋白质消化力的比较研究 | 第63页 |
| 5.2 研究意义和展望 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
