摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略符号注释 | 第10-17页 |
第1章 引言 | 第17-28页 |
1.1 小扁豆 | 第17页 |
1.2 小扁豆中主要植物化学物组成的研究现状 | 第17-22页 |
1.2.1 小扁豆中的脂溶性植物化学物 | 第18-20页 |
1.2.2 小扁豆中的可溶性酚类化合物 | 第20-22页 |
1.2.3 小扁豆中的不溶性酚类化合物(Bound phenolics) | 第22页 |
1.3 小扁豆的生物活性 | 第22-26页 |
1.3.1 化学抗氧化活性 | 第22-24页 |
1.3.2 细胞抗氧化活性 | 第24-25页 |
1.3.3 相关的消化酶抑制活性 | 第25-26页 |
1.4 本课题研究的目的、意义及主要内容 | 第26-28页 |
1.4.1 课题来源 | 第26页 |
1.4.2 研究目的和意义 | 第26-27页 |
1.4.3 主要研究内容 | 第27-28页 |
第2章 不同品种小扁豆中的脂溶性植物化学物 | 第28-50页 |
2.1 前言 | 第28-29页 |
2.2 试验材料与设备 | 第29-31页 |
2.2.1 原料 | 第29-30页 |
2.2.2 试剂 | 第30页 |
2.2.3 标准品 | 第30页 |
2.2.4 实验仪器 | 第30-31页 |
2.3 实验方法 | 第31-33页 |
2.3.1 脂溶性化合物的提取 | 第31页 |
2.3.2 颜色测定 | 第31页 |
2.3.3 气相色谱(GC)分析脂溶性提取物的脂肪酸组成 | 第31-32页 |
2.3.4 生育酚组成的 HPLC 测定 | 第32页 |
2.3.5 总类胡萝卜素含量(TCC)测定 | 第32页 |
2.3.6 类胡萝卜素组成的 HPLC 测定 | 第32-33页 |
2.3.7 脂溶性提取物体外化学抗氧化活性测定 | 第33页 |
2.3.7.1 DPPH 自由基清除能力 | 第33页 |
2.3.7.2 光化学发光法(PCL) | 第33页 |
2.4 统计学分析 | 第33-34页 |
2.5 结果 | 第34-47页 |
2.5.1 颜色测定 | 第34页 |
2.5.2 小扁豆脂溶性成分的分离提取 | 第34-36页 |
2.5.3 小扁豆脂溶性提取物含量及脂肪酸组成分析 | 第36-39页 |
2.5.4 小扁豆脂溶性提取物中生育酚的组成和含量 | 第39-41页 |
2.5.5 小扁豆脂溶性提取物中类胡萝卜素的组成和含量 | 第41-44页 |
2.5.6 小扁豆脂溶性提取物的体外化学抗氧化活性 | 第44-45页 |
2.5.7 体外化学抗氧化活性与脂溶性植物化学物含量的相关性分析 | 第45-47页 |
2.6 讨论 | 第47-49页 |
2.6.1 小扁豆中脂溶性植物化学物的组成和含量 | 第47页 |
2.6.2 小扁豆脂溶性提取物抗氧化活性与植物化学物含量之间的关系 | 第47-48页 |
2.6.3 小扁豆脂溶性植物化学物的抗氧化机理 | 第48-49页 |
2.7 小结 | 第49-50页 |
第3章 不同品种小扁豆中的可溶性酚类化合物 | 第50-73页 |
3.1 前言 | 第50-51页 |
3.2 实验材料与设备 | 第51-52页 |
3.2.1 原料 | 第51页 |
3.2.2 试剂 | 第51-52页 |
3.2.3 标准品 | 第52页 |
3.2.4 实验仪器 | 第52页 |
3.3 实验方法 | 第52-56页 |
3.3.1 可溶性酚类化合物的提取 | 第52-53页 |
3.3.2 可溶性酚类提取物水解 | 第53页 |
3.3.3 总酚含量(TPC)测定 | 第53页 |
3.3.4 总黄酮含量(TFC)测定 | 第53-54页 |
3.3.5 缩合单宁含量(CTC)测定 | 第54页 |
3.3.6 HPLC 和 HPLC-MS 分析测定酚类化合物 | 第54-55页 |
3.3.7 可溶性酚类提取物体外化学抗氧化活性测定 | 第55-56页 |
3.3.7.1 DPPH 自由基清除能力 | 第55页 |
3.3.7.2 铁离子还原/抗氧化能力(FRAP) | 第55页 |
3.3.7.3 氧自由基清除能力(ORAC) | 第55-56页 |
3.4 统计学分析 | 第56页 |
3.5 结果 | 第56-69页 |
3.5.1 比色法测定小扁豆中总酚、总黄酮和缩合单宁含量 | 第56-58页 |
3.5.2 HPLC 和 HPLC-MS 鉴定酚类化合物组成 | 第58-62页 |
3.5.3 HPLC 测定酚类化合物含量 | 第62-66页 |
3.5.4 小扁豆可溶性酚类提取物的体外化学抗氧化活性 | 第66-69页 |
3.5.5 体外化学抗氧化活性与小扁豆中酚类化合物含量的相关性分析 | 第69页 |
3.6 讨论 | 第69-72页 |
3.6.1 96 孔板法快速、准确地测定样品总酚、总黄酮和缩合单宁含量 | 第69-70页 |
3.6.2 小扁豆中可溶性酚类提取物的组成和含量 | 第70-71页 |
3.6.3 小扁豆可溶性酚类提取物抗氧化活性与植物化学物含量之间的关系 | 第71-72页 |
3.7 小结 | 第72-73页 |
第4章 不同品种小扁豆对相关的消化酶的抑制作用 | 第73-85页 |
4.1 前言 | 第73-74页 |
4.2 实验材料与设备 | 第74-75页 |
4.2.1 原料 | 第74页 |
4.2.2 试剂 | 第74页 |
4.2.3 标准品 | 第74页 |
4.2.4 实验仪器 | 第74-75页 |
4.3 实验方法 | 第75-77页 |
4.3.1 可溶性酚类化合物的提取 | 第75页 |
4.3.2 可溶性酚类提取物的纯化 | 第75页 |
4.3.3 α-葡萄糖苷酶活性抑制试验 | 第75-76页 |
4.3.4 脂肪酶活性抑制试验 | 第76-77页 |
4.3.5 小扁豆中主要酚类化合物的酶抑制活性 | 第77页 |
4.4 统计学分析 | 第77页 |
4.5 结果 | 第77-81页 |
4.5.1 不同品种小扁豆的α-葡萄糖苷酶抑制活性 | 第77-78页 |
4.5.2 不同品种小扁豆的脂肪酶抑制活性 | 第78-79页 |
4.5.3 小扁豆中酚类化合物对相关的消化酶抑制活性的贡献 | 第79-81页 |
4.6 讨论 | 第81-83页 |
4.6.1 96 孔板法快速测定样品相关的消化酶抑制活性方法的建立 | 第81-82页 |
4.6.2 小扁豆可溶性酚类提取物对相关的消化酶的抑制活性 | 第82-83页 |
4.6.3 酚类化合物对相关的消化酶活的抑制机理 | 第83页 |
4.7 小结 | 第83-85页 |
第5章 烹煮对小扁豆植物化学物和抗氧化活性的影响 | 第85-106页 |
5.1 前言 | 第85-86页 |
5.2 实验材料与设备 | 第86-87页 |
5.2.1 原料 | 第86页 |
5.2.2 试剂 | 第86页 |
5.2.3 标准品 | 第86-87页 |
5.2.4 实验仪器 | 第87页 |
5.3 实验方法 | 第87-89页 |
5.3.1 标准化家庭烹煮过程 | 第87-88页 |
5.3.2 未经加工和熟小扁豆中植物化学物的顺续提取 | 第88页 |
5.3.2.1 脂溶性化合物提取(Lipophilic compounds) | 第88页 |
5.3.2.2 可溶性酚类化合物提取(Extractable phenolics) | 第88页 |
5.3.2.3 不溶性酚类化合物提取(Bound phenolics) | 第88页 |
5.3.3 气相色谱(GC)分析脂溶性提取物的脂肪酸组成 | 第88页 |
5.3.4 比色法测定提取物中的总植物化学物含量 | 第88页 |
5.3.4.1 总类胡萝卜素含量(TCC)的测定 | 第88页 |
5.3.4.2 总酚(TPC)、总黄酮(TFC)和缩合单宁含量(CTC)的测定 | 第88页 |
5.3.5 HPLC 测定提取物中的植物化学物组成和含量 | 第88-89页 |
5.3.5.1 生育酚组成和含量的测定 | 第88页 |
5.3.5.2 类胡萝卜素组成和含量的测定 | 第88页 |
5.3.5.3 可溶性和不溶性酚类化合物组成和含量的测定 | 第88-89页 |
5.3.6 未经加工和煮熟小扁豆中植物化学物的体外化学抗氧化活性测定 | 第89页 |
5.3.6.1 DPPH 自由基清除能力 | 第89页 |
5.3.6.2 亲脂性提取物的氧自由基清除能力(ORAC- L) | 第89页 |
5.3.6.3 亲水性提取物的氧自由基清除能力(ORAC- H) | 第89页 |
5.4 统计学分析 | 第89-90页 |
5.5 结果 | 第90-102页 |
5.5.1 烹煮前后亲脂性类胡萝卜素组成和含量 | 第90页 |
5.5.2 烹煮前后亲脂性生育酚的组成和含量 | 第90-93页 |
5.5.3 烹煮前后脂溶性提取物脂肪酸组成 | 第93页 |
5.5.4 烹煮前后小扁豆可溶性和不溶性酚类提取物中的 TPC、TFC 和 CTC | 第93-95页 |
5.5.5 烹煮前后 HPLC 测定的可溶性和不溶性酚类化合物的鉴定 | 第95-97页 |
5.5.6 烹煮前后 HPLC 测定的可溶性和不溶性酚类化合物含量 | 第97-99页 |
5.5.7 烹煮前后小扁豆脂溶性、可溶性酚类和不溶性酚类提取物的抗氧化活性 | 第99-102页 |
5.6 讨论 | 第102-104页 |
5.6.1 烹煮过程对脂溶性植物化学物组成的影响 | 第102-103页 |
5.6.2 烹煮过程对可溶性酚类植物化学物组成的影响 | 第103页 |
5.6.3 烹煮过程对不溶性酚类植物化学物组成的影响 | 第103-104页 |
5.7 小结 | 第104-106页 |
第6章 烹煮后小扁豆可溶性酚类提取物的生物可接受率和细胞抗氧化活性 | 第106-127页 |
6.1 前言 | 第106-107页 |
6.2 实验材料与设备 | 第107-108页 |
6.2.1 原料 | 第107页 |
6.2.2 试剂 | 第107页 |
6.2.3 标准品 | 第107-108页 |
6.2.4 细胞系 | 第108页 |
6.2.5 实验仪器 | 第108页 |
6.3 试验方法 | 第108-112页 |
6.3.1 原料制备 | 第108页 |
6.3.2 可溶性酚类化合物提取 | 第108-109页 |
6.3.3 体外消化实验 | 第109页 |
6.3.4 酚类化合物组成含量测定 | 第109页 |
6.3.5 体外化学法测定抗氧化活性(DPPH、FRAP、ORAC) | 第109页 |
6.3.6 Caco-2 细胞培养 | 第109-110页 |
6.3.7 基于细胞的抗氧化活性(CAA)测定 | 第110页 |
6.3.8 WST-1(water-soluble tetrazolium-1)法测定细胞活力 | 第110-111页 |
6.3.9 H2O2诱导氧化应激损伤 Caco-2细胞模型 | 第111页 |
6.3.10 白介素-8(IL-8)免疫测定试验 | 第111-112页 |
6.4 统计学分析 | 第112页 |
6.5 结果 | 第112-123页 |
6.5.1 消化前后小扁豆可溶性酚类植物化学组成和含量的变化 | 第112-116页 |
6.5.2 消化前后小扁豆可溶性酚类植物化学物体外抗氧化活性变化 | 第116-117页 |
6.5.3 消化前后小扁豆可溶性酚类植物化学物对 Caco-2 细胞的细胞毒性 | 第117-119页 |
6.5.4 小扁豆可溶性酚类提取物的细胞抗氧化活性 | 第119页 |
6.5.5 体外消化前后小扁豆可溶性酚类提取物对 H2O2诱导的 Caco-2细胞氧化应激损伤的保护作用 | 第119-123页 |
6.5.5.1 不同浓度 H2O2对 Caco-2 细胞存活率的影响 | 第119-120页 |
6.5.5.2 不同浓度 H2O2对细胞 IL-8 水平的影响 | 第120-121页 |
6.5.5.3 体外消化前后小扁豆可溶性酚类提取物对 H2O2诱导的细胞氧化损伤的保护作用 | 第121-123页 |
6.6 讨论 | 第123-125页 |
6.6.1 H_2O_2诱导 Caco-2细胞氧化损伤模型的建立 | 第123-124页 |
6.6.2 小扁豆可溶性酚类植物化学物的细胞抗氧化活性 | 第124页 |
6.6.3 小扁豆可溶性酚类植物化学物的生物可接受率 | 第124-125页 |
6.7 小结 | 第125-127页 |
第7章 烹煮后小扁豆可溶性酚类提取物的抗炎活性 | 第127-137页 |
7.1 前言 | 第127-128页 |
7.2 实验材料与设备 | 第128-129页 |
7.2.1 原料 | 第128页 |
7.2.2 试剂 | 第128页 |
7.2.3 标准品 | 第128页 |
7.2.4 细胞系 | 第128页 |
7.2.5 实验仪器 | 第128-129页 |
7.3 试验方法 | 第129-130页 |
7.3.1 原料制备 | 第129页 |
7.3.2 可溶性酚类化合物提取 | 第129页 |
7.3.3 Caco-2 细胞培养 | 第129页 |
7.3.4 TNF-α诱导 Caco-2 细胞炎症模型 | 第129页 |
7.3.5 白介素-8(IL-8)免疫测定试验 | 第129页 |
7.3.6 qRT-PCR 测定 Caco-2 细胞 IL-6、IL-1β和 COX-2 mRNA 表达水平 | 第129-130页 |
7.4 统计学分析 | 第130页 |
7.5 结果 | 第130-135页 |
7.5.1 不同浓度 TNF-α对细胞 IL-8 分泌水平的影响 | 第130-131页 |
7.5.2 小扁豆可溶性酚类提取物对细胞 IL-8 分泌水平的影响 | 第131-132页 |
7.5.3 小扁豆可溶性酚类提取物对 Caco-2 细胞内炎症因子 IL-6、IL-1β和 COX-2 mRNA 表达水平的影响 | 第132-135页 |
7.6 讨论 | 第135-136页 |
7.6.1 小扁豆的抗炎活性 | 第135-136页 |
7.6.2 黄酮类植物化学物的抗炎活性 | 第136页 |
7.7 小结 | 第136-137页 |
第8章 结论与展望 | 第137-141页 |
8.1 结论 | 第137-140页 |
8.1.1 不同品种小扁豆脂溶性植物化学物组成存在较大差异 | 第137页 |
8.1.2 不同品种小扁豆脂溶性提取物的体外抗氧化活性存在较大差异 | 第137页 |
8.1.3 小扁豆中脂溶性植物化学物含量与其体外抗氧化活性存在正相关 | 第137页 |
8.1.4 不同品种小扁豆可溶性酚类植物化学物组成相似但含量有较大差异 | 第137-138页 |
8.1.5 不同品种小扁豆可溶性酚类提取物的体外抗氧化活性存在差异 | 第138页 |
8.1.6 小扁豆可溶性酚类化合物含量与其体外抗氧化活性呈显著正相关 | 第138页 |
8.1.7 小扁豆可溶性黄酮醇类化合物对α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶的活性显现强的抑制能力 | 第138-139页 |
8.1.8 烹煮对小扁豆不同的植物化学含量和体外化学抗氧化活性有不同的影响 | 第139页 |
8.1.9 烹煮后小扁豆可溶性酚类提取物不同组成在胃和肠道的生物可接受率有较大差别,从而引起细胞抗氧化活性的差异 | 第139页 |
8.1.10 烹煮后小扁豆可溶性酚类提取物具有明显的抗炎活性 | 第139-140页 |
8.2 进一步工作方向 | 第140-141页 |
创新之处 | 第141-142页 |
参考文献 | 第142-155页 |
致谢 | 第155-156页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第156-157页 |