| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| 1.1 阿魏酸酯酶概述 | 第7-9页 |
| 1.1.1 阿魏酸酯酶简介 | 第7页 |
| 1.1.2 阿魏酸酯酶的来源与分类 | 第7-8页 |
| 1.1.3 FAE的结构及其催化特性 | 第8-9页 |
| 1.2 阿魏酸酯酶基因工程研究进展 | 第9-10页 |
| 1.3 阿魏酸酯酶的应用 | 第10-12页 |
| 1.3.1 阿魏酸酯酶在食品及药品行业的应用 | 第10页 |
| 1.3.2 造纸与饲料工业的应用 | 第10页 |
| 1.3.3 生物合成及能源方面的应用 | 第10-11页 |
| 1.3.4 阿魏酸酯酶在啤酒酿造中的基础应用 | 第11-12页 |
| 1.4 课题研究目的与意义 | 第12-13页 |
| 1.5 课题主要研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-23页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第14页 |
| 2.1.2 实验试剂与工具酶 | 第14页 |
| 2.1.3 主要溶液及培养基 | 第14-15页 |
| 2.2 实验仪器 | 第15页 |
| 2.3 实验方法 | 第15-23页 |
| 2.3.1 黑曲霉基因组的提取 | 第15页 |
| 2.3.2 黑曲霉阿魏酸酯酶基因的克隆及密码子优化合成 | 第15-18页 |
| 2.3.3 阿魏酸酯酶的酶活测定 | 第18页 |
| 2.3.4 毕赤酵母重组表达载体的构建及阳性转化子的筛选 | 第18-19页 |
| 2.3.5 重组阿魏酸酯酶的发酵优化 | 第19-20页 |
| 2.3.6 重组阿魏酸酯酶的分离纯化 | 第20页 |
| 2.3.7 重组阿魏酸酯酶酶学性质研究 | 第20页 |
| 2.3.8 阿魏酸酯酶对麦芽过滤性能的影响 | 第20-21页 |
| 2.3.9 阿魏酸酯酶对麦汁抗氧化性的影响 | 第21页 |
| 2.3.10 阿魏酸酯酶对小麦啤酒风味物质 4-VG的影响 | 第21-23页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第23-42页 |
| 3.1 黑曲霉阿魏酸酯酶的克隆表达 | 第23-28页 |
| 3.1.1 黑曲霉阿魏酸酯酶基因的克隆和基因优化 | 第23-25页 |
| 3.1.2 重组表达载体的构建及阳性转化子的筛选 | 第25-26页 |
| 3.1.3 重组阿魏酸酯酶在毕赤酵母中的表达 | 第26-28页 |
| 3.2 重组阿魏酸酯酶的发酵条件优化 | 第28-32页 |
| 3.2.1 重组菌生长曲线的测定 | 第28页 |
| 3.2.2 最佳甲醇浓度和诱导时间的确定 | 第28-29页 |
| 3.2.3 最佳接种量的确定 | 第29页 |
| 3.2.4 培养基起始pH及诱导温度的确定 | 第29-31页 |
| 3.2.5 正交实验优化 | 第31-32页 |
| 3.3 重组阿魏酸酯酶的分离纯化及酶学性质研究 | 第32-36页 |
| 3.3.1 重组阿魏酸酯酶的镍柱亲和层析 | 第32-33页 |
| 3.3.2 重组阿魏酸酯酶的最适作用温度及热稳定性 | 第33-34页 |
| 3.3.3 重组阿魏酸酯酶的最适反应pH及pH稳定性 | 第34-35页 |
| 3.3.4 金属离子对重组阿魏酸酯酶稳定性的影响 | 第35-36页 |
| 3.4 阿魏酸酯酶在啤酒酿造中的应用 | 第36-42页 |
| 3.4.1 阿魏酸酯酶对麦汁中游离阿魏酸含量的影响 | 第36页 |
| 3.4.2 阿魏酸酯酶对大麦麦芽过滤性能的影响 | 第36-38页 |
| 3.4.3 阿魏酸酯酶对麦汁抗氧化能力的影响 | 第38-39页 |
| 3.4.4 阿魏酸酯酶对小麦啤酒风味物质 4-VG的影响 | 第39-42页 |
| 结果与展望 | 第42-44页 |
| 结果 | 第42页 |
| 展望 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
