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詹森杆菌紫色杆菌素优化鉴定及其对结肠癌细胞HT-29的作用

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 文献综述第11-20页
    1.1 紫色杆菌素简介第11-12页
        1.1.1 紫色杆菌素的发现第11页
        1.1.2 紫色杆菌素的生物活性第11-12页
    1.2 发酵法生产紫色杆菌素的研究第12-14页
        1.2.1 培养基组成第12-13页
        1.2.2 发酵条件第13-14页
    1.3 紫色杆菌素的分离纯化研究第14-15页
    1.4 紫色杆菌素的抗肿瘤作用第15-16页
    1.5 蛋白质组学技术在肿瘤研究中的应用第16-18页
    1.6 研究意义与内容第18-20页
第二章 紫色杆菌素发酵条件优化第20-30页
    2.1 前言第20页
    2.2 材料与方法第20-22页
        2.2.1 仪器与试剂第20页
        2.2.2 菌种和培养基第20-21页
        2.2.3 培养方法第21页
        2.2.4 菌体生物量测定第21页
        2.2.5 紫色杆菌素产量测定第21页
        2.2.6 紫色杆菌素产量标准曲线测定第21页
        2.2.7 不同碳源对紫色杆菌素产量的影响第21-22页
        2.2.8 不同氮源对紫色杆菌素产量的影响第22页
        2.2.9 发酵培养基正交试验优化第22页
        2.2.10 发酵条件正交试验优化的影响第22页
    2.3 结果与分析第22-29页
        2.3.1 紫色杆菌素含量标准曲线测定第22-23页
        2.3.2 碳源种类对Vio发酵的影响第23页
        2.3.3 氮源种类对Vio发酵的影响第23-24页
        2.3.4 色氨酸对Vio发酵的影响第24-25页
        2.3.5 正交设计对培养基的优化第25-26页
        2.3.6 初始p H值对Vio发酵的影响第26页
        2.3.7 接种量对Vio发酵的影响第26-27页
        2.3.8 装液量对Vio发酵的影响第27页
        2.3.9 正交试验结果分析第27-28页
        2.3.10 验证性试验第28页
        2.3.11 优化前后比较第28-29页
    2.4 本章小结第29-30页
第三章 紫色杆菌素的鉴定及分离纯化第30-38页
    3.1 前言第30页
    3.2 材料与方法第30-32页
        3.2.1 仪器与试剂第30-31页
        3.2.2 实验菌株第31页
        3.2.3 16S rDNA序列测定及分析第31页
        3.2.4 培养基第31页
        3.2.5 色素提取第31页
        3.2.6 分离纯化第31-32页
        3.2.7 结构鉴定第32页
    3.3 结果与分析第32-37页
        3.3.1 菌种形态鉴定第32-33页
        3.3.2 16S rDNA系统发育分析第33页
        3.3.3 蓝紫色素组分分析第33-34页
        3.3.4 蓝紫色素的组分结构鉴定第34-36页
        3.3.5 讨论第36-37页
    3.4 本章小结第37-38页
第四章 紫色杆菌素理化性质研究第38-43页
    4.1 前言第38页
    4.2 材料与方法第38-39页
        4.2.1 仪器与试剂第38页
        4.2.2 光稳定性第38页
        4.2.3 热稳定性第38-39页
        4.2.4 酸碱稳定性第39页
        4.2.5 溶解性及溶解颜色第39页
        4.2.6 金属离子对色素稳定性的影响第39页
    4.3 结果与分析第39-42页
        4.3.1 光照对蓝紫色素的影响第39-40页
        4.3.2 酸碱稳定性对蓝紫色素的影响第40页
        4.3.3 热稳定性对蓝紫色素的影响第40-41页
        4.3.4 溶解度对蓝紫色素的影响第41页
        4.3.5 金属离子对蓝紫色素的影响第41-42页
    4.4 本章小结第42-43页
第五章 紫色杆菌素对结肠癌细胞株HT-29 的影响第43-54页
    5.1 前言第43页
    5.2 材料与方法第43-49页
        5.2.1 仪器与试剂第43-44页
        5.2.2 细胞来源第44页
        5.2.3 细胞冻存、复苏和培养第44-45页
        5.2.4 显微镜下活细胞形态观察第45页
        5.2.5 细胞计数法检测紫色杆菌素对细胞生长的影响第45-46页
        5.2.6 细胞增殖的检测采用四甲基谷氮唑蓝(MTT)法第46页
        5.2.7 电镜观察细胞超微结构的改变第46-48页
        5.2.8 凋亡细胞的DNA裂解分析第48页
        5.2.9 统计学处理第48-49页
    5.3 结果与分析第49-53页
        5.3.1 细胞形态变化第49-50页
        5.3.2 细胞计数第50页
        5.3.3 MTT检测第50-51页
        5.3.4 电镜观察细胞超微结构的改变第51-52页
        5.3.5 凋亡细胞的DNA裂解分析第52-53页
    5.4 本章小结第53-54页
第六章 iTRAQ差异蛋白质组学研究紫色杆菌素作用后的HT-29第54-72页
    6.1 前言第54页
    6.2 材料与方法第54-58页
        6.2.1 主要仪器和试剂第54-55页
        6.2.2 蛋白质提取第55页
        6.2.3 蛋白质的还原烷基化第55页
        6.2.4 蛋白质的消化第55页
        6.2.5 肽段的标记第55-56页
        6.2.6 质谱检测第56-57页
        6.2.7 差异表达蛋白生物信息学分析第57-58页
    6.3 结果与分析第58-71页
        6.3.1 蛋白质提取结果第58-59页
        6.3.2 RP-LC分离第59页
        6.3.3 质谱检测第59-60页
        6.3.4 搜库-Protein Pilot搜库结果第60-61页
        6.3.5 标iTRAQ的标记效率图第61页
        6.3.6 蛋白定量比率分布给出的蛋白质对数比率的分布第61-62页
        6.3.7 火山图第62页
        6.3.8 差异蛋白质列表第62-63页
        6.3.9 差异蛋白的整体分析第63-65页
        6.3.10 差异蛋白的基因本体论(GO)分析第65-68页
        6.3.11 差异蛋白的通路(pathway)富集分析第68-71页
    6.4 本章小结第71-72页
第七章 结论与展望第72-75页
    7.1 结论第72-73页
        7.1.1 紫色杆菌素的发酵条件优化第72页
        7.1.2 紫色杆菌素的鉴定及分离纯化第72页
        7.1.3 紫色杆菌素的理化性质研究第72页
        7.1.4 紫色杆菌素对结肠癌细胞株 HT-29 的影响第72-73页
        7.1.5 蛋白组学研究紫色杆菌素作用 HT-29 差异蛋白表达变化第73页
    7.2 工作展望第73-75页
        7.2.1 光照褪色后的紫色杆菌素的研究第73页
        7.2.2 紫色杆菌素对HT-29 作用机理的研究第73-74页
        7.2.3 紫色杆菌素的体内抗肿瘤作用研究第74-75页
参考文献第75-81页
发表论文和参加科研情况说明第81-82页
缩略词表第82-83页
附录第83-92页
致谢第92-93页

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