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产抑菌物质芽胞杆菌BI2的诱变和发酵研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 前言第9-25页
    1.1 黄曲霉及其毒素的危害第9页
    1.2 芽胞杆菌防治植物病害菌第9-11页
    1.3 芽胞杆菌产生的抗菌物质及其特征第11-12页
        1.3.1 非核糖合成途径产生的抗菌物质第11-12页
        1.3.2 核糖体合成途径产生的抗菌物质第12页
    1.4 微生物诱变育种技术第12-17页
        1.4.1 物理诱变第13-14页
        1.4.2 化学诱变第14-15页
        1.4.3 ARTP诱变系统第15-16页
        1.4.4 芽胞杆菌诱变育种的筛选方法第16-17页
    1.5 芽胞的特性与形成机理第17-20页
        1.5.1 芽胞结构与特性第17-18页
        1.5.2 芽胞的形成机理第18-19页
        1.5.3 影响芽胞形成的因素第19页
        1.5.4 芽胞杆菌发酵中芽胞的增殖第19-20页
    1.6 芽胞杆菌抑菌物质的分离纯化和鉴定第20-23页
        1.6.1 发酵液预处理和固液分离第20页
        1.6.2 初步纯化第20-22页
        1.6.3 高度纯化第22-23页
    1.7 本研究的意义及主要内容第23-25页
        1.7.1 研究意义第23-24页
        1.7.2 研究目的第24页
        1.7.3 研究内容第24页
        1.7.4 技术路线图第24-25页
2 材料与方法第25-39页
    2.1 实验材料第25-27页
        2.1.1 菌种第25页
        2.1.2 主要药品第25-26页
        2.1.3 主要仪器与设备第26-27页
        2.1.4 主要培养基第27页
        2.1.5 主要溶液第27页
    2.2 实验方法第27-39页
        2.2.1 黄曲霉孢子悬液的制备第27页
        2.2.2 抑菌物质的抑菌活性测定第27-28页
        2.2.3 两性霉素B标准曲线的测定第28页
        2.2.4 芽胞杆菌诱变筛选方法第28-29页
        2.2.5 ARTP诱变及筛选第29-30页
        2.2.6 突变株BI_2-012高产抑菌物质培养基优化第30-33页
        2.2.7 突变株BI_2-012产抑菌物质发酵条件优化第33页
        2.2.8 突变株BI_2-012芽胞的增殖培养第33-34页
        2.2.9 芽胞杆菌产抑菌物质分离纯化第34-38页
        2.2.10 抑菌物质的分析第38页
        2.2.11 数据统计分析第38-39页
3 结果与讨论第39-73页
    3.1 两性霉素B的标准曲线第39页
    3.2 等离子诱变前芽胞杆菌BI_2生长曲线第39-40页
    3.3 芽胞杆菌BI_2诱变高产抑菌物质筛选方法的建立第40-44页
        3.3.1 八叠球菌做指示菌第40-42页
        3.3.2 以溴百里酚蓝做指示剂的方法第42页
        3.3.3 黑曲霉做指示菌第42-44页
    3.4 等离子诱变芽胞杆菌BI_2第44-47页
        3.4.1 ARTP处理后芽胞杆菌BI_2致死曲线第44-45页
        3.4.2 菌株的初筛第45-46页
        3.4.3 菌株的复筛第46-47页
        3.4.4 遗传稳定性实验第47页
    3.5 突变株BI_2-012高产抑菌物质培养基和条件优化第47-55页
        3.5.1 突变株BI_2-012的生长曲线第47-48页
        3.5.2 不同碳源对抑菌活性的影响第48-49页
        3.5.3 不同氮源对抑菌活性的影响第49-50页
        3.5.4 考虑交互作用的正交实验第50-53页
        3.5.5 BI_2-012高产抑菌物质发酵条件优化第53-54页
        3.5.6 最优发酵培养基和发酵条件结果验证第54-55页
        3.5.7 5-L发酵罐发酵动力学第55页
    3.6 BI_2-012芽胞的增殖培养第55-62页
        3.6.1 芽胞计数方法确定第55-56页
        3.6.2 不同发酵时间产芽胞情况第56-57页
        3.6.3 Mn~(2+)添加量对产芽胞的影响第57-59页
        3.6.4 Mn~(2+)添加时间对产芽胞的影响第59-60页
        3.6.5 产芽胞发酵条件的优化第60-62页
        3.6.6 不同发酵时间的芽胞产量和抑菌活性第62页
    3.7 芽胞杆菌产抑菌物质分离纯化第62-73页
        3.7.1 大孔吸附树脂脱色第62-65页
        3.7.2 离子交换法提取第65-68页
        3.7.3 中低压反相柱层析法第68-69页
        3.7.4 抑菌物质分析方法的建立第69-71页
        3.7.5 抑菌物质的小量制备第71-73页
4 结论第73-74页
5 展望第74-75页
6 参考文献第75-81页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第81-82页
8 致谢第82页

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