摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
1 前言 | 第9-25页 |
1.1 黄曲霉及其毒素的危害 | 第9页 |
1.2 芽胞杆菌防治植物病害菌 | 第9-11页 |
1.3 芽胞杆菌产生的抗菌物质及其特征 | 第11-12页 |
1.3.1 非核糖合成途径产生的抗菌物质 | 第11-12页 |
1.3.2 核糖体合成途径产生的抗菌物质 | 第12页 |
1.4 微生物诱变育种技术 | 第12-17页 |
1.4.1 物理诱变 | 第13-14页 |
1.4.2 化学诱变 | 第14-15页 |
1.4.3 ARTP诱变系统 | 第15-16页 |
1.4.4 芽胞杆菌诱变育种的筛选方法 | 第16-17页 |
1.5 芽胞的特性与形成机理 | 第17-20页 |
1.5.1 芽胞结构与特性 | 第17-18页 |
1.5.2 芽胞的形成机理 | 第18-19页 |
1.5.3 影响芽胞形成的因素 | 第19页 |
1.5.4 芽胞杆菌发酵中芽胞的增殖 | 第19-20页 |
1.6 芽胞杆菌抑菌物质的分离纯化和鉴定 | 第20-23页 |
1.6.1 发酵液预处理和固液分离 | 第20页 |
1.6.2 初步纯化 | 第20-22页 |
1.6.3 高度纯化 | 第22-23页 |
1.7 本研究的意义及主要内容 | 第23-25页 |
1.7.1 研究意义 | 第23-24页 |
1.7.2 研究目的 | 第24页 |
1.7.3 研究内容 | 第24页 |
1.7.4 技术路线图 | 第24-25页 |
2 材料与方法 | 第25-39页 |
2.1 实验材料 | 第25-27页 |
2.1.1 菌种 | 第25页 |
2.1.2 主要药品 | 第25-26页 |
2.1.3 主要仪器与设备 | 第26-27页 |
2.1.4 主要培养基 | 第27页 |
2.1.5 主要溶液 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-39页 |
2.2.1 黄曲霉孢子悬液的制备 | 第27页 |
2.2.2 抑菌物质的抑菌活性测定 | 第27-28页 |
2.2.3 两性霉素B标准曲线的测定 | 第28页 |
2.2.4 芽胞杆菌诱变筛选方法 | 第28-29页 |
2.2.5 ARTP诱变及筛选 | 第29-30页 |
2.2.6 突变株BI_2-012高产抑菌物质培养基优化 | 第30-33页 |
2.2.7 突变株BI_2-012产抑菌物质发酵条件优化 | 第33页 |
2.2.8 突变株BI_2-012芽胞的增殖培养 | 第33-34页 |
2.2.9 芽胞杆菌产抑菌物质分离纯化 | 第34-38页 |
2.2.10 抑菌物质的分析 | 第38页 |
2.2.11 数据统计分析 | 第38-39页 |
3 结果与讨论 | 第39-73页 |
3.1 两性霉素B的标准曲线 | 第39页 |
3.2 等离子诱变前芽胞杆菌BI_2生长曲线 | 第39-40页 |
3.3 芽胞杆菌BI_2诱变高产抑菌物质筛选方法的建立 | 第40-44页 |
3.3.1 八叠球菌做指示菌 | 第40-42页 |
3.3.2 以溴百里酚蓝做指示剂的方法 | 第42页 |
3.3.3 黑曲霉做指示菌 | 第42-44页 |
3.4 等离子诱变芽胞杆菌BI_2 | 第44-47页 |
3.4.1 ARTP处理后芽胞杆菌BI_2致死曲线 | 第44-45页 |
3.4.2 菌株的初筛 | 第45-46页 |
3.4.3 菌株的复筛 | 第46-47页 |
3.4.4 遗传稳定性实验 | 第47页 |
3.5 突变株BI_2-012高产抑菌物质培养基和条件优化 | 第47-55页 |
3.5.1 突变株BI_2-012的生长曲线 | 第47-48页 |
3.5.2 不同碳源对抑菌活性的影响 | 第48-49页 |
3.5.3 不同氮源对抑菌活性的影响 | 第49-50页 |
3.5.4 考虑交互作用的正交实验 | 第50-53页 |
3.5.5 BI_2-012高产抑菌物质发酵条件优化 | 第53-54页 |
3.5.6 最优发酵培养基和发酵条件结果验证 | 第54-55页 |
3.5.7 5-L发酵罐发酵动力学 | 第55页 |
3.6 BI_2-012芽胞的增殖培养 | 第55-62页 |
3.6.1 芽胞计数方法确定 | 第55-56页 |
3.6.2 不同发酵时间产芽胞情况 | 第56-57页 |
3.6.3 Mn~(2+)添加量对产芽胞的影响 | 第57-59页 |
3.6.4 Mn~(2+)添加时间对产芽胞的影响 | 第59-60页 |
3.6.5 产芽胞发酵条件的优化 | 第60-62页 |
3.6.6 不同发酵时间的芽胞产量和抑菌活性 | 第62页 |
3.7 芽胞杆菌产抑菌物质分离纯化 | 第62-73页 |
3.7.1 大孔吸附树脂脱色 | 第62-65页 |
3.7.2 离子交换法提取 | 第65-68页 |
3.7.3 中低压反相柱层析法 | 第68-69页 |
3.7.4 抑菌物质分析方法的建立 | 第69-71页 |
3.7.5 抑菌物质的小量制备 | 第71-73页 |
4 结论 | 第73-74页 |
5 展望 | 第74-75页 |
6 参考文献 | 第75-81页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第81-82页 |
8 致谢 | 第82页 |