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黑木耳中性多糖片段硫酸酯对辐射诱导氧化应激防护作用

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
目录第8-18页
第1章 绪论第18-40页
    1.1 课题背景及研究的目的和意义第18页
    1.2 辐射与自由基第18-20页
    1.3 自由基与氧化应激第20-23页
        1.3.1 自由基对生物分子的作用第20-21页
        1.3.2 自由基对生物系统的影响第21-23页
    1.4 抗氧化防护途径第23-27页
        1.4.1 增强抗氧化酶活性第23-24页
        1.4.2 直接清除自由基、抑制脂质过氧化第24-25页
        1.4.3 抑制细胞凋亡第25页
        1.4.4 修复DNA氧化损伤第25-26页
        1.4.5 免疫调节作用第26-27页
        1.4.6 抑制氧化酶活性第27页
        1.4.7 激活体内非酶类抗氧化剂第27页
    1.5 辐射防护剂研究现状第27-30页
    1.6 多糖构效关系第30-33页
        1.6.1 溶解度、粘度对多糖生理活性影响第30-31页
        1.6.2 分子量对多糖生理活性影响第31页
        1.6.3 某些特定基团对多糖生理活性影响第31-32页
        1.6.4 空间构象对多糖生理活性影响第32-33页
    1.7 多糖硫酸酯化修饰第33-36页
        1.7.1 多糖硫酸酯的修饰方法第33-34页
        1.7.2 多糖硫酸酯的结构分析第34页
        1.7.3 多糖硫酸酯的生物活性研究第34-36页
    1.8 黑木耳多糖的研究第36-39页
        1.8.1 黑木耳多糖的提取、纯化及结构表征第36-38页
        1.8.2 黑木耳多糖的抗氧化活性第38-39页
    1.9 本课题主要研究内容第39-40页
第2章 实验材料与方法第40-58页
    2.1 实验材料与仪器设备第40-42页
        2.1.1 实验原料第40页
        2.1.2 实验动物第40页
        2.1.3 主要仪器设备第40-41页
        2.1.4 主要试剂第41-42页
    2.2 黑木耳多糖提取、分级第42-43页
        2.2.1 原料预处理第42页
        2.2.2 黑木耳粗多糖提取第42页
        2.2.3 黑木耳粗多糖分级第42页
        2.2.4 黑木耳多糖片段分离第42-43页
    2.3 黑木耳多糖硫酸酯制备第43-45页
        2.3.1 硫酸酯化试剂制备第43页
        2.3.2 多糖硫酸酯制备工艺优化第43-44页
        2.3.3 取代度测定第44页
        2.3.4 甲酰胺和N, N-二甲基甲酰胺残留量分析第44-45页
    2.4 黑木耳中性多糖片段硫酸酯结构表征第45-46页
        2.4.1 红外光谱分析第45页
        2.4.2 紫外光谱分析第45页
        2.4.3 拉曼光谱表征第45页
        2.4.4 原子力显微镜表征第45页
        2.4.5 分子量测定第45-46页
        2.4.6 单糖组成分析第46页
    2.5 体外抗氧化活性测定第46-49页
        2.5.1 超氧自由基(O_2~-·)清除能力测定第46-47页
        2.5.2 羟基自由基(·OH)清除能力测定第47页
        2.5.3 ABTS~+·清除能力测定第47-48页
        2.5.4 脂质过氧自由基(ROO·)清除能力测定第48-49页
        2.5.5 总还原能力测定第49页
    2.6 细胞实验第49-52页
        2.6.1 细胞毒性实验第49页
        2.6.2 辐射诱导人外周血氧化应激的防护第49-50页
        2.6.3 Con A诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖指数第50-51页
        2.6.4 小鼠脾淋巴细胞周期分析第51页
        2.6.5 单细胞凝胶电泳第51-52页
    2.7 动物实验第52-57页
        2.7.1 辐射诱导氧化应激动物模型第52页
        2.7.2 脏器指数测定第52-53页
        2.7.3 体重和存活率变化第53页
        2.7.4 外周血象和白细胞损伤分析第53页
        2.7.5 小鼠血液中VE含量测定第53页
        2.7.6 小鼠骨髓细胞微核实验第53-54页
        2.7.7 小鼠骨髓细胞染色体畸变实验第54-55页
        2.7.8 小鼠碳廓清指数测定第55-56页
        2.7.9 小鼠脾组织和小肠绒毛超微结构形态观察第56页
        2.7.10 小鼠生化指标检测第56-57页
    2.8 统计分析第57-58页
第3章 黑木耳中性多糖片段硫酸酯制备及其结构解析第58-78页
    3.1 引言第58页
    3.2 黑木耳多糖分离及分级第58-59页
    3.3 黑木耳多糖片段分离第59-61页
        3.3.1 DEAE-Sephadex-25 柱层析第59-60页
        3.3.2 Sephadex G-200 凝胶层析第60-61页
    3.4 黑木耳多糖硫酸酯制备第61-67页
        3.4.1 酯化试剂优化第62-63页
        3.4.2 取代度分析第63-64页
        3.4.3 SNAAP合成工艺单因素条件的确定第64-66页
        3.4.4 溶剂残留分析第66-67页
    3.5 SNAAP化学性质及结构分析第67-77页
        3.5.1 化学性质分析第67-68页
        3.5.2 红外光谱分析第68-70页
        3.5.3 紫外光谱分析第70-71页
        3.5.4 拉曼光谱表征第71-72页
        3.5.5 原子力显微镜表征第72-74页
        3.5.6 相对分子质量分布分析第74-75页
        3.5.7 单糖组成分析第75-77页
    3.6 本章小结第77-78页
第4章 黑木耳中性多糖片段硫酸酯抗氧化活性研究第78-88页
    4.1 引言第78页
    4.2 SNAAP清除生理自由基第78-83页
        4.2.1 SNAAP清除超氧自由基能力第79-81页
        4.2.2 SNAAP清除羟基自由基能力第81-83页
    4.3 SNAAP清除ABTS~+·自由基能力第83-84页
    4.4 SNAAP抗脂质过氧化作用第84-85页
    4.5 SNAAP总还原能力分析第85-87页
    4.6 本章小结第87-88页
第5章 黑木耳中性多糖硫酸酯对人外周血氧化应激防护作用第88-103页
    5.1 引言第88-89页
    5.2 SNAAP细胞毒性分析第89-90页
    5.3 SNAAP对辐射引起人外周血象变化影响第90-99页
        5.3.1 X辐射模型建立第90-91页
        5.3.2 对人外周血中白细胞数的影响第91-92页
        5.3.3 对人外周血淋巴细胞数变化的影响第92-93页
        5.3.4 对人外周血淋巴细胞比率变化的影响第93-94页
        5.3.5 对人外周血血小板的影响第94-95页
        5.3.6 对人外周血红细胞数的影响第95-96页
        5.3.7 对人外周血血红蛋白的影响第96-97页
        5.3.8 对人外周血脂质过氧化抑制作用第97-99页
    5.4 SNAAP对人外周血的防护作用第99-101页
        5.4.1 SNAAP对白细胞数的作用第99-100页
        5.4.2 SNAAP对辐射条件下白细胞形态变化的影响第100-101页
    5.5 本章小结第101-103页
第6章 黑木耳中性多糖硫酸酯对小鼠氧化应激防护研究第103-144页
    6.1 引言第103页
    6.2 SNAAP对辐射小鼠存活率和体重的影响第103-105页
    6.3 SNAAP对60CO辐射小鼠外周血象影响第105-108页
    6.4 SNAAP对辐射小鼠免疫系统的影响第108-115页
        6.4.1 SNAAP对辐射小鼠脏器指数的影响第109-110页
        6.4.2 SNAAP对巨噬细胞吞噬活性和协同ConA脾淋巴细胞增殖作用第110-111页
        6.4.3 SNAAP对辐射小鼠脾淋巴细胞形态学影响第111-115页
    6.5 SNAAP对小鼠小肠上皮细胞及微绒毛组织超微形态学影响第115-116页
    6.6 SNAAP对辐射小鼠体内相关氧化酶活性影响第116-122页
        6.6.1 SNAAP对超氧化物歧化酶(SOD)的影响第117-118页
        6.6.2 SNAAP对过氧化氢酶(CAT)的影响第118-119页
        6.6.3 SNAAP对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的影响第119-120页
        6.6.4 SNAAP对髓过氧物酶(MPO)的影响第120-122页
    6.7 SNAAP对丙二醛(MDA)含量的影响第122-123页
    6.8 SNAAP对乳酸脱氢酶(LDH)影响第123-124页
    6.9 SNAAP对60CO辐射小鼠体内非酶抗氧化剂影响第124-128页
        6.9.1 对小鼠外周血中VE含量的影响第125-127页
        6.9.2 对谷胱甘肽(GSH)含量影响第127-128页
    6.10 SNAAP对小鼠DNA损伤的影响第128-134页
        6.10.1 SNAAP对骨髓染色体畸变的影响第128-129页
        6.10.2 SNAAP对骨髓细胞微核率的影响第129-131页
        6.10.3 SNAAP对小鼠脾细胞DNA损伤的影响第131-134页
    6.11 SNAAP对小鼠脾淋巴细胞周期调控第134-137页
    6.12 相关性分析第137-142页
        6.12.1 脾组织SOD活性与脾组织细胞增殖之间的相关性分析第137-138页
        6.12.2 脾组织SOD值与微核率之间的相关性分析第138-140页
        6.12.3 脾组织细胞增殖与微核率之间的相关性分析第140-141页
        6.12.4 脾组织MDA值与微核率之间的相关性分析第141-142页
    6.13 本章小结第142-144页
结论第144-146页
创新点第146-147页
前景展望第147-148页
参考文献第148-172页
附录第172-174页
攻读博士学位期间发表的论文及其它成果第174-178页
致谢第178-179页
个人简历第179页

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